医学微生物学实验一课件

医学微生物学 实验课件南华大学病原学实验教学中心Etiology Experimental Teaching Center of University of South China 实验内容一、显微镜的使用操作及注意事项二、细菌的形态和特殊结构观察：1.自阅片：破伤风杆菌（示芽胞）、变形杆菌（示鞭毛）2. 示教片：肺炎链球菌（示荚膜）三、革兰染色法（自做） 实验室规则微生物学实验要求1、微生物无处不在： 故要树立有菌观念，实验过程要无菌操作 ;2、实验材料为病原微生物，具有感染性1）穿好白大衣，除必要的书籍、记录本及文具外，其他个人用品不得带入实验室；2）实验室禁止饮食，未经许可严禁将实验材料带出实验室3、按照实验要求，认真积极的完成实验，有些实验需第二天观察结果，要求同学们亲自观察，并详细记录结果，完成实验报告；4、爱护实验器材，实验用过的器材放置指定位置，实验室仪器不得乱摸乱碰；实验自阅玻片标本损坏 10元 /张；5、实验完毕后，整理实验台，值日生负责室内卫生，并负责关门、关窗、关水、关电。一、显微镜的使用操作及注意事项二、显微镜的使用（一）观察前准备1. 显微镜拿取显微镜拿取2. 调节通光量调节通光量使用 油镜油镜 时，为使通光量最大，可采用：1） 光圈光圈 开到最大；2） 聚光器聚光器 上升到最高；3）低倍（ 10）物镜下，转动 凹面反光镜凹面反光镜 ，使视野的光照达到最明亮 均匀。 （二） 低倍镜 观察 粗粗 旋钮调节：物像出现细细 旋钮调节：物像清晰为什么 镜检任何标本都要先用低倍镜观察镜检任何标本都要先用低倍镜观察 ？操作要点操作要点（三） 高倍镜 观察在低倍镜转换高倍镜（ 40x ）适当调节 细 螺旋即可看到物像忌使用粗螺旋忌使用粗螺旋 ，否则极易压碎标本甚至损坏物镜。操作要点操作要点注意注意（四） 油镜 观察1.滴油（ 不要抹开不要抹开 ）2.转换为油镜头，使其浸入香柏油3.调节 细螺旋细螺旋 即可找到物像l 油镜头须浸入油中l 不使用粗螺旋，细螺旋也不可无限旋转，否不使用粗螺旋，细螺旋也不可无限旋转，否则可压则可压碎玻片及损坏物镜头碎玻片及损坏物镜头l 光圈需开至最大l 聚光器须上升至最高注意注意4.玻片处理5.镜头擦拭：限取 3张擦镜纸 -如香柏油不慎玷污 非油浸镜头非油浸镜头 应立即 直接直接拭去（ 勿用二甲苯）勿用二甲苯）-擦拭时沿一个方向， 禁止旋转禁止旋转6.还原各部分7.填写显微镜使用登记表填写显微镜使用登记表注意注意二、细菌的形态和特殊结构观察（一） 细菌的基本形态1球菌球菌 ：葡萄球菌葡萄球菌 (葡萄状排列 )链球菌 (链状排列 )脑膜炎奈瑟菌 (成双排列 )2杆菌杆菌 ：大肠杆菌大肠杆菌 、枯草杆菌等3螺形菌螺形菌 ：霍乱弧菌等1. 荚 膜 荚膜与微荚膜概念 化学成分 变异 医学意义 （二）细菌的特殊结构取材：小鼠腹腔渗出液染色法： Hiss染色放大倍数： 10X100荚膜菌体肺炎链球菌（示荚膜）肺炎链球菌（示荚膜）2. 鞭 毛（ Flagllum） 概念 数目、位置和排列可不同 鞭毛是细菌的运动器官 医学意义：变形杆菌（示鞭毛）变形杆菌（示鞭毛）鞭毛菌体取材：纯培养物染色法：鞭毛染色放大倍数： 10X1003. 芽 胞 概念 形状、直径、位置随菌种而不同 形成条件 非细菌的繁殖体 抵抗力强 医学意义：破伤风梭菌（示芽胞）破伤风梭菌（示芽胞）芽胞菌体取材：纯培养物染色法：革兰染色放大倍数： 10X1004. 菌 毛 概念 在光镜下看不见，使用电镜才能观察到 分类：普通菌毛和性菌毛 医学意义三、革兰氏染色法 常用染色方法单染法 ： 一种染料使细菌着色，如美蓝和复红染色；复染法 ：两种或两种以上染料染色，有助于鉴别细菌，如革兰染色法和抗酸染色法。结晶紫卢戈碘液液酒精复红G-菌：类脂质 多多肽聚糖 少少G+菌：肽聚糖 多多交联度大类脂质 少少渗透性学说渗透性学说 ： 两类细菌的 细胞壁细胞壁 成分和结构差异【 原理 】【 材料 】1. 葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。2. 革兰染色液。涂片： 注意无菌操作注意无菌操作干 燥 固 定染 色【 步骤 】初染初染 ： 结晶紫染液染 lmin水洗，甩干 媒染媒染 ： 卢戈氏碘液染 1min水洗，甩干 脱色脱色 ： 酒精脱色约 30s水洗，甩干 复染 ： 复红染液染 1min水洗，甩干 印干印干 油镜观检染色 关键步骤！关键步骤！