第二章 药物的鉴别试验1

药物分析 第二章 药物的鉴别试验姚美村中山大学药学院2目的和要求n 1、 掌握一般鉴别 试验的原理n 2、熟悉一般鉴别试验的方法n 3、了解一般鉴别试验的条件和灵敏度n 4、了解专属鉴别试验的相关内容Yao Meicun, Tel: Email: L3一、概述n 在药物分析中，取样、鉴别、检查、含量测定是正常的分析顺序。取样偏于统计方面内容，在分析化学中已有介绍。n 鉴别是整个检验工作的第一步，只有在鉴别无误的情况下，进行杂质检查和含量测定才用意义。n 一票否决！4一、概述（续 1）n 药物的鉴别试验（ Identification Test）是根据药物的 分子结构、理化性质 ，采用 化学、物理化学或生物学方法 来判断药物的 真伪 。n 鉴别项下规定的实验方法，仅能反映该药品的某些物理、化学或生物学的性质，不完全代表对该药品化学结构的确证 。n 鉴别是用来证实要分析的药物是否为标示的药物，由于其专属性不够，因而不是对未知物进行定性分析 。5二、鉴别试验的项目n 性状n 一般鉴别试验n 专属鉴别试验6（一）性状n 药物的 性状反映了药物特有的物理性质 ，包括外观、溶解度和物理常数 等。n 外观 ：药物的 聚集状态、晶型、色泽，以及臭、味 等性质。n 溶解度 ：反映了 药品的纯度 。对于溶解度的说法，可以从药典凡例中得到。n 物理常数 ：既可以作 鉴别 ，又可以作为 纯度检测 的结果。7（一）性状（续 1）n 对于某一药物来说 ，其 物理常数 ，包括熔点、比旋度、酸值、吸收系数等， 应是固定的 。n 但如果其含有一定的杂质时，则表现出一种混合效应， 表观物理常数 则会发生改变。n 熔点 ： 药典中收载方法有好几个，若无特别注明时，一般指用第一法 。 当有杂质存在时，熔点及熔距会发生改变 。8（一）性状（续 2）n 比旋度 ： 手性药物特性之一 。有左旋、右旋和消旋的区分。可以用来 鉴别 药品、 检查纯度 和含量测定 。n 吸收系数 ：具有 共轭结构药物 的性质之一，可以作为鉴别方法，也可以进行含量测定。n 以上为化学药品鉴别方法，中药呢？9例：阿司匹林性状鉴别n 阿司匹林n 【 性状 】 本品为 白色结晶或结晶性粉末 ； 无臭或微带醋酸臭，味微酸； 遇湿气即缓缓水解。 n 本品在 乙醇中易溶 ，在氯仿或乙醚中 溶解 ，在水或无水乙醚中 微溶 ；在氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液中溶解，但同时分解。 10例：阿奇霉素性状鉴别n 阿奇霉素 ：n 【 性状 】 本品为 白色或类白色 结晶性粉末；无臭，味苦；微有引湿性。n 本品在 甲醇、丙酮、氯伤、无水乙醇或稀盐酸中易溶，在水中几乎不溶 。n 比旋度 取本品，精密称定，加无水乙醇溶解并稀释制成每 1ml中含 20mg的溶液，依法测定 (附录 E)， 比旋度应为 45至 4911例：人参的性状12（二）一般鉴别试验n 一般鉴别实验是依据 某一类药物 的 化学结构或理化性质 的特征，通过 化学反应 来鉴别药物的真伪 。n 原则 ：对于 无机药物 是根据其组成的 阴离子和阳离子的特殊反应 ；对 有机物 则大都通过 典型的官能团反应。n 所以， 一般鉴别只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。13（二）一般鉴别试验（续 1）n 通常一般鉴别试验仅供确认药物质量标准中 单一的化学药物 。若 为数种化学药物的混合物或者有干扰物质存在时，除另有规定外，一般是不适用的。n 下面简单介绍几个典型的无机离子和有机官能团的情况：14（二）一般鉴别试验（续 2）n 1、有机氟化物 ：有机氟化物与有机分子结合比较紧密，需要用氧瓶燃烧法破坏，变成无机离子后再测定。（第 4章内容讲）n 2、有机酸盐 ：n 水杨酸盐： 含有酚羟基 ，与 三氯化铁 试液反应呈一定的颜色；另外，可利用其 原型药物在水中不溶性原理进行加酸或加碱的操作 。15（二）一般鉴别试验（续 3）n 3、芳香第一胺类n 药物结构中 含有（或潜在）芳香第一胺 时，可发生重氮化 -偶合反应 ，与 亚硝酸钠和 -萘酚，生成不同颜色的沉淀。（ 经常与脂肪族第一胺的鉴别比较 ）n 4、托烷类生物碱 ：一大类生物碱的鉴别，可发生 Vitali反应。n 5、 无机金属盐和无机酸根 ：焰色反应，以及各种常见的沉淀反应等。16例：阿司匹林的一般鉴别n 【 鉴别 】 (1) 取本品约 0.1g，加水 10ml，煮沸，放冷，加 三氯化铁试液 1 滴 ，即 显紫堇色。（一般鉴别） n (2) 取本品约 0.5g，加碳酸钠试液 10ml，煮沸 2 分钟后，放冷， 加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气 。 n (3) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集 209图）一致。（专属鉴别） 17例、盐酸四环素的鉴别n 【 鉴别 】 (1) 取本品约 0.5mg ，加硫酸 2ml ，即显深紫色，再 加三氯化铁 试液 1滴，溶液变为红棕色。 n (2) 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与盐酸四环素对照品主峰的保留时间一致。 n (3) 本品的水溶液显 氯化物的 鉴别反应（附录 ）。18（三）专属鉴别试验n 专属鉴别是证实某一种药物的依据。 是 根据每一种药物化学结构的差异及其引起的物理化学性质不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。n 每一种药物的专属鉴别方法不同 ，需要区别对待。n IR方法是很好的专属鉴别依据。19（三）专属鉴别试验（续 1）n 一般鉴别试验是根据某些类别药物的共同化学结构为依据，根据其相同的物理化学性质进行真伪的鉴别，以区别不同类别的药物。n 专属鉴别试验是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异，以区别同类药物或具有相同化学结构的各个药物单体，最终达到确证药物真伪的目的。20三、鉴别方法n 可以用来对药物进行鉴别的方法有很多，应选择其中 专属性强、再现性好、灵敏度高 ，以及操作简便、快速 的方法n 化学鉴别法 呈色、沉淀、荧光、气体生成等。n 光谱鉴别法 UV、 IRn 色谱鉴别法 TLC、 HPLC和 GC等。n 生物学方法等21（一）化学鉴别法n 该方法具有 反应迅速、现象明显 的特点， 对于反应是否完全不是主要考虑的 。n 1、呈色反应鉴别法 ：利用加入试剂产生明显颜色的鉴别反应法。n （ 1）三氯化铁反应： 酚羟基 ，或 潜在 的n （ 2）茚三酮反应 ： 脂肪胺基（氨基酸）n （ 3）重氮化偶合反应： 芳伯氨基或潜在的芳伯氨基药物22例：牛磺酸片的鉴别n 【 鉴别 】 取本品的细粉适量（约相当于牛磺酸 0.5g），加水 10ml，振摇使溶解，滤过，滤液照下述方法试验。n (2)取上述滤液 2ml，调节 pH值至中性，加 茚三酮试液 1ml，在 水浴中加热 ,溶液显蓝紫色 。23例：对乙酰氨基酚的鉴别n 【 鉴别 】 (2) 取本品约 0.1g，加 稀盐酸 5ml ，置水浴中加热 40分钟，放冷；取 0.5ml ，滴加 亚硝酸钠试液 5 滴，摇匀，用水 3ml 稀释后，加 碱性 萘酚试液 2ml ，振摇，即显红色。（潜在）24（一）化学鉴别法（续 1）n 2、沉淀生成反应鉴别法n 系指供试品溶液中加入 适当的试剂溶液 ， 在一定条件下进行反应，生成不同颜色的沉淀 ，有的具有特殊的形状。n 常见有重金属离子沉淀剂 ，如铅、铜等25例：二巯丁二酸的鉴别n 【 鉴别 】 （ 1）取本品约 0.2g，加水 2ml与碳酸氢钠试液适量使溶解并呈中性，加 醋酸铅 试液 1ml，即生成 淡黄色沉淀 。26（一）化学鉴别法（续 2）n 3、荧光反应鉴别法： 药物 本身 可以有荧光；加酸后 产生荧光等n 4、气体生成反应鉴别法： 大多数的 胺类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物， 经碱处理后 ， 加热产生气体（氮气 ）；含硫药物可生成硫化氢等。27例：盐酸雷尼替丁 n 【 鉴别 】 (1) 取本品约 0.2g，置试管中， 用小火缓缓加热 ，产生的 气体 能使 湿润的醋酸铅试纸显黑色 。28（二）光谱鉴别法n UV法 ： 共轭结构药物 有紫外吸收，可以用来鉴别。但 UV光谱特点是谱线较宽，专属性不够，做定性不如定量应用广泛n 采用方法 ：n 测 最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长 ；n 规定一定浓度的最大吸收波长处的吸收度值；n 规定吸收波长和吸收系数或吸光度比值法；n 经处理后，测定反应产物的吸收光谱特征等29例：叶酸的鉴别n (2) 取本品，加 0.4 氢氧化钠溶液制成每1ml 中含 10g 的溶液，照分光光度法（附录 A）测定， 在 256nm、 283nm2nm与365nm4nm的波长处有最大吸收。在256nm与 365nm波长处的吸收度比值应为2.8 3.0 。30（二）光谱鉴别法