第二十章 生物制品分析2

药物分析第二十章生物制品分析主要内容生物制品的质量要求 鉴别试验生物制品检查内容4123生物制品的分类 生物制品质量控制实例 5学习要求掌握分类、质量特点和要求鉴别方法、质量检查主要内容质量控制的主要手段熟悉了解生物制品（ Biological products） 定义：是以微生物、细胞、动物或人源组织和体液等为起始原材料 ，用 生物学技术 制成，用于 预防 、 治疗 和 诊断 人类疾病的制剂，如疫苗、血液制品、生物技术药物、微生态制剂、免疫调节剂、诊断制品等。 ChP2015三部凡例生物制品的分类 预防类：细菌类疫苗、病毒类疫苗 治疗类：抗毒素及免疫血清、血液制品、细胞因子、 DNA重组制品、单克隆抗体 诊断类：体内诊断、体外诊断疫苗类药物细菌类疫苗病毒类疫苗联合疫苗多价疫苗细菌类疫苗病毒类疫苗联合疫苗多价疫苗细菌类疫苗病毒类疫苗联合疫苗多价疫苗细菌类疫苗病毒类疫苗联合疫苗多价疫苗抗毒素及抗血清类药物 凡用 细菌类毒素或毒素 免疫马或其他大动物所取得的免疫血清叫抗毒素（或抗毒血清）。 凡用 细菌或病毒 本身免疫马或其他大动物所取得的免疫血清叫抗菌或抗病毒血清。 血液制品 指源自人类血液或血浆的治疗产品。是由健康人的血液或经特异免疫的人血浆，经分离、提纯或由重组 DNA技术制成的血浆蛋白组分，以及血液细胞有形成分。重组 DNA蛋白制品 系采用遗传修饰，将所需制品的编码 DNA通过一种质粒或病毒载体，引入适宜的微生物或细胞系， DNA经过表达和翻译后成为蛋白质，再经提取和纯化而回收所需制品而得。 细胞因子类： IFN-1b、 EPO 生长因子类：重组人表皮生长因子 激素类：重组人生长激素 酶类：重组链激酶 疫苗类：重组乙型肝炎疫苗 单克隆抗体类：尼妥珠单抗 生物类似药：符合审评要求的重组蛋白质制品 诊断制品：体外诊断、体内诊断生物制品的质量要求安全性 有效性 可接受性鉴别试验 免疫双扩散法 免疫电泳法 免疫印迹法 免疫斑点法 酶联免疫法免疫双扩散法 系在琼脂糖凝胶板上按一定距离打数个小孔，在相邻的两孔内分别加入抗原与抗体，若抗原、抗体互相对应，浓度、比例适当，则一定时间后，在抗原与抗体孔之间形成免疫复合物的沉淀线，以此对供试品的特异性进行检查。 伤寒 Vi多糖疫苗、狂犬病人免疫球蛋白和人血白蛋白免疫电泳法 系将供试品通过电泳分离成区带的各抗原，然后与相应的抗体进行双相免疫扩散，当两者比例合适时形成可见的沉淀弧。将沉淀弧与已知标准抗原、抗体生成的沉淀弧的位置和性状进行比较，即可分析供试品中的成分及其性质。 人血白蛋白、冻干人免疫球蛋白免疫印迹法 系以供试品与特异性抗体结合后，抗体再与酶标抗体特异性结合，通过酶学反应的显色，对供试品的抗原特异性进行检查。 重组人促红素注射液（ CHO细胞）、注射用重组人干扰素 1b 免疫斑点法：注射用重组人干扰素 2a等 酶联免疫法：抗毒素和抗血清制品 。如冻干乙型脑炎灭活疫苗（ Vero细胞）、人用狂犬疫苗（ Vero细胞）和重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）等。生物制品检查内容（一）物理性状的检查 外观 真空度及溶解速率 装量（二）蛋白质含量测定 凯氏定氮法（钨酸沉淀法）（三氯醋酸沉淀法） 酚试剂法（ Lowry法） 双缩脲法（紫外 -可见分光光度法） （三）防腐剂和灭活剂含量测定 苯酚、甲醛、三氯甲烷、汞制剂等（四）纯度检查（五）相对分子质量或分子大小测定（六）其他检查对象 菌毒种和主要原材料 半成品 成品（七）安全检查检查内容 过敏物质的检查 杀菌、灭活和脱毒检查 残余毒力和毒性物质的检查 外源性污染的检查血清学试验 活菌数和活病毒滴度测定 （八）生物制品的效力测定免疫力试验 定量免疫定量攻击法 变量免疫定量攻击法 定量免疫变量攻击法 被动保护力测定外源 DNA残留量的检查宿主细胞 （ 菌 )蛋白残留量的检查产品相关杂质的检查残余抗生素的检查（九）杂质检查生物制品质量控制实例 ChP人血白蛋白质量控制规程 ChP尼妥珠单抗注射液质量控制规程 人血白蛋白 人血白蛋白由健康人血浆，经低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法分离纯化，并经 60 10小时加温灭活病毒后制成。1. 原料血浆2. 原液（ 1