瞬态测量的作用荧光原理fls-920原理-曾燕

瞬态荧光光谱曾燕2主要内容荧光光谱的基本原理1稳态 /瞬态荧光光谱仪（ FLS 920）243荧光光谱的基本原理4荧光定义荧光 是一种 光致 冷发光 现象。当某种常温物质经某种波长的入射光（通常是 紫外线 或 X射线 ）照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出出射光（通常波长比入射光的的波长长，在 可见光 波 段） ， 而且一旦停止入射光，发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。5退激发途径辐射跃迁荧光 磷光 内转换 外转换系间窜越 振动弛豫无辐射跃迁退激发途径6雅布隆斯基分子能级图S2S1S0T1吸收发射荧光发射磷光系间窜越内转换 振动弛豫能量l 2l 1l 3外转换l 2T2内转换振动弛豫7激发谱固定发射波长 (一般将其固定于发射波段中感兴趣的峰位 )，扫描出的化合物的 发射光强 (荧光 /磷光 ) 与 入射光波长 的关系曲线。主要光谱参量发射谱固定激发波长 (一般将其固定于激发波段中感兴趣的峰位 )，扫描出的化合物的 发射光强 (荧光 /磷光 ) 与 入射光波长 的关系曲线。吸收谱化合物的 吸收光强 与 入射光波长 的关系曲线 。 8荧光寿命荧光寿命 是荧光强度衰减为初始时的 1/e所需要的时间，常用 表示。如荧光强度的衰减符合指数衰减的规律 :ItI0e-kt 其中 I0是激发时最大荧光强度， It是时间 t时的荧光强度， k是衰减常数。假定在时间 时测得的 It为 I0的 1/e，则 是我们定义的 荧光寿命 。9事实上，在瞬间激发后的某个时间，荧光强度达到最大值，然后荧光强度将按指数规律下降。从最大荧光强度值后任一强度值下降到其 1/e所需的时间都应等于 。 荧光寿命10处于激发态的分子，除了通过发射荧光回到基态以外，还会通过一些其它过程 (如淬灭和能量转移 )回到基态，其结果是加快了激发态分子回到基态的过程，结果是荧光寿命降低。寿命 和这些过程的速率常数有关，总的退激过程的速率常数 k可以用各种退激过程的速率常数之和来表示 :kkF+kiki表示各种非辐射过程的衰减速率常数。则总的 寿命 为 : 1/k1/(kF+ki)荧光寿命11稳态 /瞬态荧光光谱仪（ FLS 920）12功能稳态测 量 ：激 发 光 谱 (荧 / 磷光 强 度 激 发 波 长 )、 发 射光 谱 (荧 / 磷光 强 度 发 射波 长 )、同步 扫描 谱 (固定波 长 差、固定能量差、可 变 角 )。 适合各 类 液体和固体 样 品的 测试 。瞬 态测 量 ： 荧 光 (磷光 )寿命。 13结构14结构15光路图16荧光寿命测试原理时间 相关 单 光子 计 数法， 简 称 “单 光子 计 数 (SPC)法 ”，其基本原理是，脉冲光源激 发样 品后， 样 品 发 出 荧 光光子信号，每次脉冲后只 记录 某特定波 长单 个光子出 现 的 时间 t ，经过 多次 计 数， 测 得 荧 光光子出 现 的几率分布 P(t)，此 P(t)曲 线 就相当于激 发 停止后 荧 光 强 度随 时间 衰减的 I(t)曲 线 。这 好比一束光 ( 许 多光子 ) 通 过 一个小孔形成的衍射 图 与 单 个光子一个一个地通 过 小孔 长时间 的累 计 可得完全相同的衍射图 的原理是一 样 的。 时间