菊花的植物组织培养2

课题 1 菊花的组织培养课题 1 菊花的组织培养 专题 植物的组织培养 技术 教学目标 知识与能力： 1说明植物组织培养的基本原理和影响花药培养的因素。 2说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径。 3学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。 4学习花药培养的基本技术，尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 教学重点： 1植物组织培养过程中使用的无菌技术。 2选取适宜的培养材料和培养基。 教学难点： 1植物组织培养过程中使用的无菌技术。 2选取适宜的培养材料和培养基。 通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？ 组织培养营养繁殖扦插嫁接压条 扦插嫁接压条 植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。植物组织培养简介发展简史 1838-1839年，德国科学家 Schleide 和 Schwann发表了细胞学说，奠定了组织培养的理论基础。1902年，德国植物学家 Haberlandt 根据细胞学说，提出单个细胞的植物细胞全能性（ totipotency） 理论。1904年， Hanning 最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。1922年， Knudson 采用胚培养法获得大量兰花幼苗。1934年， White 用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。1958年，英国科学家 Steward 等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为组织培养的技术程序奠定了基础。 1962年， Murashinge 和 Skoog 在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的 MS培养基。1964-1966年，印度科学家 Guha 和 Maheswari 在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。1972年， Carlson 通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。 外植体灭菌与接种操作在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。 组织培养1、植物组织培养的原理是什么？植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。思考：植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。3、结合录像 外植体灭菌与接种操作 ，谈谈怎样预防组织 培养污染？（一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（三）操作人员严格遵守无菌操作规程（四）保证接种与培养环境清洁离体的 植物器官、组织、细胞脱分化 愈伤组织再分化 根芽植物体植物组织培养过程植物组织培养条件含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的 PH、 适时光照等。愈伤组织植物细胞全能性的表达 脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。 再分化 :经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。MS固体培养基成分及比例微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同， MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。阅读课文，思考以下问题1. 同微生物培养基相比， MS培养基的配方有哪些明显的不同？2、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？组织的脱分化及愈伤组织的再分化。植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是植物激素，细胞分裂素与生长素之间的浓度比可以调控植株组培过程中芽和根的形成。 一、污染的定义指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。1、 细菌污染 ：菌斑呈粘液状，界限比较明显，一般接种后 1 2天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌二、污染原因 2、 真菌污染 ：菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子接种后 3 10天才能发现。主要是霉菌污染。二、污染原因正常苗 污染苗1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带入 4、环境不清洁三、污染途径四、污染的预防措施（一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（三）操作人员严格遵守无菌操作规程（四）保证接种与培养环境清洁（一）防止外植体带菌1、选择好外植体采集时期和采集部位外植体采集以春秋为宜优先选择地上部分作为外植体阴雨天勿采，晴天下午采采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋2、室内或无菌条件下进行预培养（一）防止外植体带菌3、外植体严格灭菌灭菌效果试验多次灭菌和交替灭菌 （一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌1、分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿粘瓶口2、检查封口膜是否有破损看录像培养基的