除草剂生物测定技术

第四章 除草剂生物测定技术 u除草剂生物测定的意义 u除草剂生物测定的基本原理 u除草剂生物测定技术程序和原则u除草剂生物测定方法简介u除草剂田间药效试验一、除草剂生物测定的意义v生物测定是除草剂研究种不可缺少的手段v某种化合物是否具有杀草活性v为特定杂草筛选一种除草剂v除草剂作用方式的研究二、除草剂生物测定的基本原理 试验均在同一控制条件下必须设对照，每一处理重复 3 4次试材应该健壮、整齐、随机排列测定结果应进行统计学分析在一定范围内，生物试材与除草剂浓度成比例的伤害反应三、除草剂生物测定技术的程序和原则 （） 生物测定材料的选择 试材的选择应兼备对药剂较感性高和具有一定的可测范围以及大量易得的均一材料。（二） 测定参数的选择 试材对除草剂的反应可以通过各种参数来评价。除草剂对植物的影响一般为非专一性的，因此，各种器官均能作为某一除草剂的活力指标。 种子发芽率 许多除草剂可抑制敏感种子的发芽及胚根和芽鞘的生长、因此，可以利用观察种子的萌发率来测定某种药剂的存在与否。 植株生长量 在生物测定中，试材重量的测定是最常用的。 主要测定参数生理生化指标 在肉眼可见的反应出现之前，试材的生理生化的变化往往可以测定出来。植物呼吸和光合作用以及所含成分或新陈代谢物质的变化等都可以作为测定的指标 。症状 有些除草剂可引起试材的典型症状，因此，可以利用此种反应来鉴定除草剂。 特殊技术 Parker以青萍为试材，以百草枯和脲类除草剂的拮抗作用来测青萍的浓度；若以愈伤组织为试材，则测愈伤组织的生长量 。 测定结果表达方法正确地评价某一药剂的生物测定结果是很重要的 。常用地上部鲜重减少 50（ ED50）、 地上部干重减少 50 CR50 、 株高减少 50（ LD50。或 ED50） 及覆盖面积减少 50（ EC50） 所需要的除草剂量来表示这一类试验结果。 Y=a+bx0级 同对照1级 抑剂生长 25以下2级 抑制生长 50以下3级 抑制生长 75以下4级 抑制生长 75以上5级 死亡目测的分级标准四、除草剂常用的生物测定方法 v黄瓜幼苗法v小杯法v小球藻法v去胚乳小麦幼苗法v浮萍法种子发芽测定法是一种常用的除草剂活性测定方法，种子发芽率、根与茎的生长量或作长度在一定范围内与药剂剂量呈相关性，因此可用作除草剂的定量测定，有较高的灵敏度。种子发芽测定法1发芽率 调查对照处理和药剂处理种子的发芽数量，然后计算发芽率。 药剂处理的发芽数 发芽率（）一一 X 100对照处理的发芽数 调查项目2 生长抑制率 测定发芽以后芽或根的长度，或者是测量鲜重或干重（较少）。对照处理一药剂处理生长抑制率（ %） X100对照处理1.黄瓜幼苗形态法。123 4CK57%2,4D丁酯乳油对黄瓜种苗的抑制作用100mg/L 10mg/L 1mg/L1mg/L 0.01mg/L CK本方法是测定激素类除草剂及其他植物生长调节剂活性的常用方法，具有反应灵敏、测定范围大（0.11000ppm）， 操作简便等优点。 2.小杯法4 5 CK1 2 3该法是上海植物生理研究所于 1972年建立的。可以测定二苯醚类，酰胺类和氨基甲酸酯类、氯代脂肪酸类等除草剂的活性，但对抑制植物光合作用的除草剂则几乎不能采用。该法具有操作简便，测定周期短、范围较广的优点。试材选用小麦、油菜、水稻、稗草等。以直径 3.5 cm，高 5.0cm的玻璃杯为容器（亦可用 50ml 的小烧杯代替）。杯底放一张圆滤纸片，吸取一定量的有机溶剂溶解的待测药液倒入杯内，挥发干溶剂。若以水稻、稗草等水生杂草种子为试材，则在小烧杯中加入 2ml蒸馏水； 3d后分别记载株高或测定鲜重。计算抑制生长 50所需要的浓度（ LC50）。若以小麦、油菜种子为试材、则在滤纸片下放一层直径约为 0.5cm大小的玻璃珠（短玻棒也可）再加入 3ml蒸馏水。选择刚萌动的种子 10粒，排放到滤纸片上，置 28 恒温箱培养，白天给予日光灯照。培养期间每天加入一定量蒸馏水来补充挥发掉的水份。0级 同对照1级 抑制生长 25以下2级 抑制生长 50以下3级 抑制生长 75以下4级 抑制生长 75以上药效的分级标准为然后计算每一浓度处理的抑制指数：（ 级别 X各级代表株数）抑制指数 X100总株数 X最高级别将抑制指数（抑制百分数）转换为机率值，浓度（剂量）以对数值表示，求出 EC50。本法是 Parker于 1966年首先报道的，后经改进，缩短测定时间。高粱法适宜于测定非光合作用抑制剂，它具有操作简便，培养期间不用管理、周期短，测定范围广等优点。还可改用燕麦、黄瓜等为材料来扩大测试范围。3.高梁法简介 。 。 。 。.。 。 。 。 。培养皿黄 砂除草剂高梁种子上海植生所的方法是：用直径 9cm的培养皿，装满干燥黄砂并刮平，每皿加人 30ml药液，正好使全皿黄砂浸透，然后用有十个齿的齿板在皿的适当位置压孔（或用细玻棒均匀压 10个孔）以便每皿能排 10位根长 12mm（ 根尖尚未长出根鞘）的萌发高粱种子（一般于试验前的一天在 25 温箱内催芽）。为了缩短测试时间，在排种培养的前一天，将上述培养好的培养皿、置于34 恒温箱中过夜，以提高砂温（室温低时尤为重要），排种工作在恒温室中进行，然后放在 34 恒温箱内培养，隔 8小时左右，就可划道标记每一株根尖位置起点，过 14 16h， 对照根长 30mm左右，即可测量，求出抑制生长 50的除草剂浓度。此法对高粱种子要求严格，杂交高粱种子因生长势不整齐不适于作试材，农家品种生长势整齐。可采用。此外，培养皿内装砂量要适合，少了会使植物材料与药剂接触不良，砂多则使植物生长受阻碍，这都会影响到测定结果的精确性本方法是在 Jaworski的黑麦草测定法启发下，由沈阳化工研究院除草剂组建立的。它适宜于测定 一氯代乙酰胺类除草剂，敏感度达0.01PPm； 亦可测除草醚、五氯酚钠等除草剂，但敏感度较低。测定原理是利用稗草中胚轴（从种子到芽鞘节处的长度）在黑暗中伸长的特点，以药剂抑制中胚轴的长度来测定药剂的活性。 4.稗草胚轴中胚轴法 将一系列浓度的敌草胺药液或待测液 50ml注入 50ml小烧杯中。每杯投入10颗刚刚露白的稗草籽。为了避免在测定中可能有个别幼芽浮起，可以在种子周围撒一些石英砂