芹菜叶中黄酮化合物的提取及树脂法纯化

本科生毕业论文(设计) 题 目：芹菜叶中黄酮化合物的提取及树脂法纯化 学生姓名： 导师姓名： 院 别：化学与材料科学学院 专 业：材料化学 年 级：2011届毕业生 学 号：07060342016 完成日期2011年5月22日廊坊师范学院本科生毕业论文（设计）论文题目： 芹菜叶中黄酮化合物的提取及树脂法纯化论文摘要：通过乙醇提取黄酮的实验，对料液比、乙醇浓度、提取时间 等三个因素进行探索，采用正交实验法确定提取黄酮的最佳提取条件。然后采用AB8以及自制的树脂，对粗黄酮进行纯化，对五种树脂的吸附纯化能力进行比对、研究，筛选出最适合于粗黄酮纯化的树脂。最后分别用浓度为60%、70%、80%的乙醇溶液做洗脱液在得到的最佳树脂中对黄酮提取液进行洗脱，筛选出最佳的洗脱液浓度。实验结果表明提取芹菜叶中黄酮的最佳提取条件是：水料比1：40；提取时间2h；乙醇浓度70%。并通过实验得到DVB含量为60%的自制树脂对黄酮的吸附纯化效果比较突出，黄酮纯度为纯化前的4.05倍，AB8树脂次之。在最佳树脂中实验得出用70%的乙醇对黄酮提取液的洗脱效果最好。关键词：大孔吸附树脂； 芹菜叶；总黄酮；芦丁；吸附；正交实验The extraction of flavonoids from the Celer Salt and purification resinGraduate 2007 Faculty of Chemistry and Material Science,Langfang Teachers CollegeWangLinlinAbstract：Through the experiment of ethanol extracting flavonoids, we will have an exploitation for three elements which include the ratio of water, alcohol concentration,and extraction time. Firstly,we should make sure the best condition for extraction with using orthogonal test method. Then using commercial resin called AB8 and self-made resins to purify crude flavonoids, we can choose the most suitable resin for purifying of crude flavonoids, through comparison and research of these five resins adsorption ability and purification ability . Finally, respectively, with 60%、 70% 、80% ethanol solution as eluent at the best available resin elution of flavonoids extract, filter out the best eluent.朗读显示对应的拉丁字符的拼音The result shows that the best condition for purification of flavonoids from the seed of jujube is 70% alcohol, water ratio 1:40,and extraction time 2h.In this experiment, we can see that resin 60% absopts and purifys well to Refers flavonoids. The degree of purity is 4.05times of before the purification, AB8 resin followed. Obtained in the best experimental resin with 70% ethanol the extraction of flavonoids eluting is best.Keywords: Macroporous adsorbing resin; Celery Salt; Flavonoids; Rutin; Adsorbtion; Orthogonal test目 录1前言11.1 芹菜的研究背景11.2 黄酮类化合物的研究背景11.3 大孔吸附树脂的研究背景22 实验部分32.1 试剂及主要仪器32.1.1 主要仪器32.1.2 主要试剂32.2芹菜叶中黄酮的提取工艺32.2.1 芹菜叶的预处理32.2.2 单因素法探讨正交实验的各个因素32.2.3 利用正交实验探讨最佳提取工艺52.2.4 芹菜叶中黄酮的紫外测定方法的建立52.3大孔吸附树脂对黄酮提取液的纯化.6 2.3.1黄酮提取液的浓缩.6 2.3.2动态吸附法纯化黄酮化合物.62.3.3 吸附溶液及解吸溶液中黄酮含量的测定62.3.4 黄酮纯度和回收率的计算62.4最佳洗脱条件的讨论63 结果及讨论73.1 芦丁标准溶液全扫描曲线73.2 芦丁的标准工作曲线73.3 单因素法确定黄酮的最佳提取条件83.4 正交实验确定黄酮的最佳提取条件103.4.1黄酮提取率计算103.4.2正交实验结果与分析113.4.4利用树脂纯化黄酮实验结果133.5 最佳洗脱条件的讨论144 结论15参考文献16致 谢17芹菜叶中的黄酮化合物提取及树脂法纯化1前言1.1 芹菜的研究背景芹菜属伞形花科一年生或二年生草本植物，异名药芹、旱芹。芹菜味辛、甘，性凉，营养丰富。已有研究证实，芹菜含有丰富的黄酮类化合物、多不饱和脂肪酸、矿物元素、丁基苯酞类、菇类、香豆素衍生物、叶绿素、氨基酸与维生素、膳食纤维等，其中，黄酮类化合物主要成分为水寥素及7一甲基水寥素，医学证明，这两种黄酮类化合物是治疗高血压的有效成分。在药理上，芹菜还具有降压、安神、降血糖血脂、软化血管、增强免疫力、增进食欲和健胃等作用。还可作为神经衰弱、小便热涩不利、月经不调等症的食疗1。芹菜中含有大量膳食纤维素，经常食用有促进肠蠕动、防治便秘以及预防大肠癌等效果。 1.2 黄酮类化合物的研究背景黄酮类化合物是一类多酚类抗氧化剂，它是以黄酮（2-苯基色原酮）为母核而衍生的一类黄色色素。黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物，图1为黄酮的母核结构，黄酮类化合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。它在植物界分布很广，多以苷类形式存在 ，并且由于糖的种类、数量、联接位置及联接方式不同可以组成各种各样黄酮苷类。黄酮苷固体为无定形粉末，其余黄酮类化合物多为结晶性固体。图1 黄酮母核结构黄酮类化合物具有多种生物活性和药理作用，已引起了人们广泛的兴趣。黄酮的功效是多方面的，一项由荷兰专家主持的研究发现：由4807位参与者的实验表明，每天饮375ml绿茶的人，其心脏病的发病概率是那些不喝茶的人的一半；致命性心脏病发病率只有三分之一。其中重要的原因就是绿茶中所含的黄酮。除此以外，有研究表明2它还具有以下功能：抗氧化，是一种很强的抗氧剂，有效清除体内的氧自由基，阻止细胞的退化、衰老，阻止癌症的发生；改善血液循环，降低胆固醇，提高免疫力；降低血糖；稳定胶原质；抑制炎性生物酶的渗出，可以增进伤口愈合和止痛等。1.3 大孔吸附树脂的研究背景大孔吸附树脂问世已有半个世纪 ， 其具有与活性炭类似的吸附能力、低成本、工艺简单、树脂可再生使用、环境友好等优势，最早用于废水处理、医药工业、化学工业、分析化学、临床检定和治疗等领域。由于大孔吸附树脂对橙皮苷、三七皂苷、黄茂皂苷、山植黄酮、大豆异黄酮、茶多酚、生物碱、多种天然色素、中药复方药物提取以及抗生素、维生素等生物化学制品的吸附分离也有良好的效果，近年来在我国医药领域(特别是天然药物精制)在有效成分的提取、分离、纯化工作中得到广泛的应用，是提取精制有效成分的一种有效方法3。其中在化学制药和中草药有效成分分离领域 ，常常需要从复杂组分的混合液中分离不同结构的有用成分 ，这就需要对树脂的结构与吸附目标物的组成和结构之间的相关性进行系统的研究。大孔吸附树脂的化学性质与其化学结构密切相关。它包括耐酸碱、耐氧化、耐溶剂、耐热等性能。一类是以苯乙烯二苯乙烯为基础的大孔非极性吸附树脂，另一类是交联聚甲基丙烯酸甲酯结构的中极性吸附树脂。这些大孔吸附树脂为高交联的三维空间结构，因此，有良好的化学稳定性。图2给出了第一类大孔吸附树脂的主要结构。图2吸附树脂的主要结构黄酮类化合物母核上常含有羟基、甲氧基、烃氧基、异戊烯氧基等取代基，可与大孔吸附树脂上的官能团形成氢键作用，故可用大孔吸附树脂对芹菜叶中的黄酮化合物进行纯化研究。2 实验部分2.1 试剂及主要仪器2.1.1 主要仪器电动搅拌器江苏金坛荣华仪器制造有限公司真空泵SHB-郑州长城科工贸有限公司紫外可见分光光度计TU-1201北京大华辰光电子有限公司调温电热套KDM型山东省嘉德仪器厂数显恒温水浴锅CS501型上海浦东荣丰科学仪器有限公司电子天平FA1604N上海精密科学仪器有限公司旋转蒸发器RE-52A上海亚荣生化仪器厂2.1.2 主要试剂无水乙醇分析纯天津市北方天医化学试剂厂芦丁天津市药检所AB8树脂南开大学化工厂 酯基树脂实验室自制 芹菜叶食堂采集2.2芹菜叶中黄酮的提取工艺2.2.1 芹菜叶的预处理取一定量的新鲜芹菜叶，放在阴暗处晾干后，将干的芹菜叶放入粉碎机中粉碎半分钟，将粉碎好的芹菜叶放置在洁净的小烧杯中待用。2.2.2 单因素法探讨正交实验的各个因素在乙醇法提取中影响黄酮提取效率的因素有很多，本实验中主要对料液比（质量比）、乙醇浓度、提取时间等三个因素进行探索，实验中将先采用单因素法对这三个因素进行探讨，分别确定各个因素下黄酮的最佳提取条件4。2.2.2.1探讨料液比单因素的提取工艺用电子天平精确称取3g粉碎的芹菜叶于装有搅拌棒、球型回流冷凝管和温度计(100)的250mL 四口瓶中，分别加入一定体积的60%的乙醇溶液，按照下表1的条件提取1.5h。 表1探讨料液比提取条件表芹菜叶质量（g）料液比乙醇溶液体积（ml）3.00351:10353.00361:20703.00281:301053.00161:401403.00181:501752.2.2.2 探讨乙醇浓度单因素的提取工艺用电子天平精确称取3g粉碎的芹菜叶于装有搅拌棒、球型回流冷凝管和温度计(100)的250mL 四口瓶中，按1:30的料液比，按照下表2的提取条件下提取1.5h。 表2探讨乙醇浓度提取条件表芹菜叶质量（g）乙醇浓度(%)乙醇溶液体积（ml）3.0023501243.0028601053.0025701143.0047801143.0041901142.2.2.3 探讨提取时间单因素的提取工艺用电子天平精确称取3g粉碎的芹菜叶于装有搅拌棒、球型回流冷凝管和温度计(100)的250mL 四口瓶中，加入70%的乙醇溶液，按照1:30的料液比，依如下表3的提取时间进行实验。 表3探讨提取时间条件表芹菜叶质量（g）提取时间(h)乙醇溶液体积（ml）3.00521.01143.00251.51143.00492.01143.00312.51143.00283.0114分别将以上三个单因素实验中所得的提取液进行抽滤，将抽滤得到的澄清液测量其体积并转移至贴有标签的锥形瓶中，保存待用。2.2.3 利用正交实验探讨最佳提取工艺设计正交实验如表4所示：编号料液比乙醇浓度（%）加热时间(h)11：20601.521：20702.031：20802.541：30602.051：30702.561：30801.571：40602.581：40701.591：40802.0 表4正交实验表 用电子天平精确称取3g芹菜叶于装有搅拌棒、球型回流冷凝管和温度计(100)的250mL 四口瓶中，用恒温水浴升温至60，按照正交实验表进行实验。分别按照相应的提取时间反应完全后将提取液进行抽滤，抽滤时需用滑石粉以得到澄清的滤液，将抽滤得到的澄清液测量其体积并转移至贴有标签的锥形瓶中，保存待用。2.2.4 芹菜叶中黄酮的紫外测定方法的建立2.2.4.1 紫外测定法一、全波长扫描确定芦丁标准溶液最大吸收波长配制40mg/L的芦丁标准溶液用紫外分光光度计在200-600nm波长范围内进行全扫描，以确定其最大吸收波长。二、标准曲线的绘制芦丁对照品溶液的制备:准确称取恒温干燥至恒重并于干燥器内冷却至室温的芦丁标准品10.0mg置于50mL容量瓶中，加70%乙醇溶液溶解并定容至刻度，摇匀，即得浓度为200mg/L的芦丁标准液。线性关系考察：准确量取200mg/L的芦丁标准液6.25ml、5.0ml分别置于25ml容量瓶中，加入70的乙醇定容，摇匀，分别得到50mg/l 、40mg/l的芦丁对照品溶液，再从40mg/l的芦丁对照品溶液中取12.5ml于25ml容量瓶中用70的乙醇定容配制成20mg/l的芦丁对照品溶液,然后依次稀释为10mg/l 、5mg/l的溶液，用紫外分光光度计在360nm处测定吸光度A值，以吸光度A值为纵坐标，芦丁标准液浓度y为横坐标，经回归处理的回归方程为：Y=A+BX2.3 大孔吸附树脂对黄酮提取液的纯化2.3.1黄酮提取液的浓缩称取一定量的芹菜叶，在正交实验得出的提取芹菜叶中黄酮的最佳条件下，得到一定量的提取液，利用旋转蒸发仪将溶液浓缩并且转入水相，然后利用大孔吸附树脂对黄酮进行吸附纯化，通过纯化前后黄酮的纯度变化及回收率对几种树脂的性能进行分析研究5。2.3.2动态吸附法纯化黄酮化合物树脂柱依次用无水乙醇、80%、50%、20%的乙醇溶液、纯水冲洗柱子，直至树脂中的乙醇全部替换成水，流速为1倍床体积/h。将20mL溶液上柱，以20mL/h的吸附速率将吸附液通过分离柱，再配制一定量70%的乙醇水溶液，将树脂上吸附的物质解脱下来，收集流出液和解吸液。利用紫外法测定流出液和解吸液中的黄酮含量。 2.3.3 吸附溶液及解吸溶液中黄酮含量的测定分别用六个已经干燥并精确称量的小烧杯，盛装15ml吸附溶液和各个类型树脂的解吸液，放入烘箱在60下烘干至恒重，计算出粗黄酮的质量。然后取一定量的吸附溶液和解吸液于25mL的容量瓶中，用70%的乙醇定容，摇匀，用紫外可见分光光度计测其在360nm处各自的吸光度A值6。根据芦丁标准曲线计算吸附溶液和解吸溶液中的黄酮浓度7。2.3.4 黄酮纯度和回收率的计算根据黄酮的浓度及解吸液蒸干前的体积可以计算出所蒸干的解吸液中总黄酮的质量。利用所得到的粗黄酮质量和纯黄酮质量计算各自的纯度和回收率。2.4 最佳洗脱条件的讨论 在DVB含量为60%的树脂中，分别用60%、70%、80%的乙醇溶液做洗脱液，对黄酮提取液进行洗脱，分别用四个已经干燥并精确称量的小烧杯，盛装15ml吸附溶液和三种浓度的乙醇溶液的解吸液，放入烘箱在60下烘干至恒重，计算出粗黄酮的质量。然后取一定量的吸附溶液和解吸液于25mL的容量瓶中，用70%的乙醇定容，摇匀，用紫外可见分光光度计测其在360nm处各自的吸光度A值8，进而得到纯黄酮质量，利用所得到的粗黄酮质量和纯黄酮质量计算各自的纯度和回收率。通过比较纯度和回收率确定最佳浓度的洗脱液。3 结果及讨论3.1芦丁标准溶液全波长扫描曲线紫外法测定200-600nm波长范围内芦丁标准溶液的全波长扫描图如图3所示吸光度A波长(nm)图3 芦丁标准溶液全扫描图3.2 芦丁的标准工作曲线紫外法测定并绘制得吸光度曲线图如图4所示。浓度mg/L吸光度A图4 紫外法测定法芦丁标准曲线标准直线的方程为：Y=A+BX A=-0.00532 B=0.03076 R=0.99997说明在所测定的浓度范围内，工作曲线中吸光度与溶液浓度线性关系良好。3.3 单因素法确定黄酮的最佳提取条件最佳提取条件以黄酮的提取率作为指标，测定提取液内黄酮浓度，进一步计算出黄酮的提取率，单因素法是对每个因素的最佳条件的探讨，对料液比、乙醇浓度、提取时间的探讨如表5、表6、表7表5 探讨料液比单因素的提取工艺芹菜叶质量（g）料液比乙醇溶液体积（ml）提取液体积（ml）提取液浓度（g/l）提取率（%）3.00351:103520.05.183.43.00361:207060.53.186.53.00281:3010590.52.327.03.00161:40140155.51.236.43.00181:50175163.00.945.1料液比提取率% 图5 料液比对提取率的影响通过固定乙醇浓度、提取时间、温度三个因素，在不同料液比下进行实验，通过紫外法确定黄酮的提取率，由表5中黄酮提取率可得图5，由图5显示随着料液比的增加黄酮提取率先增加后减小，在料液比为1:30时提取率达到最大值，料液比为1:20 1:40时次之，因此应选择料液比为1:20、1:30、1:40 的条件进行正交实验。表6 探讨乙醇浓度单因素的提取工艺芹菜叶质量（g）乙醇浓度(%)乙醇溶液体积（ml）提取液体积（ml）提取液浓度（g/l）提取率（%）3.003250124109.11.094.03.002860105112.01.956.83.002570114112.03.0911.53.00478011496.51.735.63.004190114100.01.304.3乙醇浓度%提取率%图6 乙醇浓度对提取率的影响通过固定料液比、提取时间、温度三个因素，在不同乙醇浓度下进行实验，通过紫外法确定黄酮的提取率，由表6中黄酮提取率可得图6，由图6显示黄酮提取率随乙醇浓度先增大后减小，在乙醇浓度为70%时黄酮提取率达到最大值，乙醇浓度为60%、 80%时提取率次之，所以应该选择乙醇浓度为60% 、70%、 80% 的条件进行正交实验。表7 探讨提取时间单因素的提取工艺芹菜叶质量(g)70%乙醇体积（ml）提取时间(h)提取液体积（ml）提取液浓度（g/l）提取率（%）3.00521141.094.01.877.23.00251141.5112.03.0911.53.00491142.0100.02.618.73.00311142.5111.01.747.53.00281143.099.01.846.0时间（h）提取率% 图7 提取时间对提取率的影响通过固定料液比、乙醇浓度、温度三个因素，在不同提取时间下进行实验，通过紫外法确定黄酮的提取率，由表7中黄酮提取率可得图7，由图7显示实验时间为1.5h时黄酮提取率达到最大值，随时间的增加黄酮提取率呈下降趋势，经比较可知应选择实验时间分别为1h 、1.5h、 2h的条件进行正交实验。 3.4 正交实验确定黄酮的最佳提取条件3.4.1黄酮提取率计算最佳提取条件以黄酮的提取率作为指标，测定提取液内黄酮浓度，进一步计算出黄酮的提取率：如表8所示提取率=C*V/M(C为提取液黄酮的浓度 V为提取液体积 M为实验所称芹菜叶质量)表8 正交实验条件下黄酮的提取率实验编号料液比乙醇浓度(%)加热时间（h）提取率（%）11:20601.54.7421:20702.05.7731:20802.54.9541:30602.06.1351:30702.55.7461:30801.56.1971:40602.56.6381:40701.56.7691:40802.06.883.4.2正交实验结果与分析正交实验结果分析有极差分析法和方差分析法。计算简便，直观，简单易懂，是正交实验结果分析最常用方法。本实验也将通过极差分析法对正交实验结果进行计算、分析，从而找到从芹菜叶中提取黄酮的最佳条件。Rj为第j列因素的极差，反映了第j列因素水平波动时，实验指标的变动幅度。Rj越大，说明该因素对实验指标的影响越大。根据Rj大小，可以判断因素的主次顺序。Kjm为第j列因素m水平所对应的实验指标和，kjm为Kjm的平均值。由kjm大小可以判断第j列因素优水平和优组合。确定实验的优水平和最优组合：将料液比、乙醇浓度、提取时间三个影响因素分别成为A、B、C；1、2、3分别代表每个因素的三个水平。由正交实验表可以看出，A1的影响反映在第1、2、3号实验中，A2的影响反映在第4、5、6号实验中，A3的影响反映在第7、8、9号实验中。A因素的1水平所对应的实验指标之和为KA1=w1+w2+w3 kA1= KA1/3A因素的2水平所对应的实验指标之和为KA2=w4+w5+w6 kA2= KA2/3A因素的3水平所对应的实验指标之和为KA3=w7+w8+w9 kA3= KA3/3根据kA1、kA2、kA3的大小可以判断A1、A2、A3对实验指标的影响大小。由实验中A因素的提取率可知提取率大的为A因素的优水平。同理，可以计算并确定B、C、因素的优水平。确定因素的主次顺序：比较每个因素的极差R，极差值大者说明该因素对实验指标的影响越大。实验优水平优组合及极差计算结果见表9表9 正交实验分析表实验编号因素提取比率（%）A料液比B乙醇浓度（%）C提取时间（h）11:20601.54.7521:20702.05.7731:20802.54.9541:30602.06.1351:30702.55.7461:30801.56.1971:40602.56.6381:40701.56.7691:40802.06.88K115.4717.5117.70K218.0618.2718.78K320.2718.0217.32k15.165.845.90k26.026.096.26k36.766.015.77极差R1.600.250.49主次顺序 料液比提取时间乙醇浓度优水平料液比1：40乙醇浓度70%提取时间2h优组合料液比1：40；提取时间2h；乙醇浓度70%根据正交实验极差分析法对紫外测定法所得数据进行分析、计算,因为料液比因素的K3K2K1，所以此因素的优水平是1:40，同理由乙醇浓度因素的K2K3K1可知此因素的优水平是70%，由提取时间因素的K2K1K3可得此因素的优水平是2h,所以本次正交实验的优组合为：料液比1:40，,提取时间2h，乙醇浓度70%，即为黄酮的最佳提取条件；由极差R1R3R2可知影响因素的主次顺序为： 料液比提取时间乙醇浓度3.4.3 最佳提取条件的验证 表10 最佳条件的验证最佳因素料液比乙醇浓度（%）提取时间（h）提取率（%）紫外测定法1：40702.06.91通过表10可以得出结论：由紫外测定法可知，在表10的实验条件下对芹菜叶中黄酮提取的提取率比在以上其他条件下所得黄酮的提取率都要高，从而最佳条件得以验证。芹菜叶中黄酮的最佳提取条件是：料液比1:40；提取时间2h；乙醇浓度70%。3.4.4 利用树脂纯化黄酮实验结果 本实验是通过树脂对黄酮进行纯化，根据吸附溶液中的黄酮总量和解吸液中的黄酮总量计算黄酮的回收率和纯度，以确定最佳配比树脂，列表如下计算公式：回收率解吸液中黄酮总量/吸附溶液中黄酮总量*100%纯度=溶液中黄酮总量溶液蒸干的质量*100% 表11树脂对黄酮吸附后的纯度及回收率树脂类型洗脱液体积（ml）烘干后洗脱液净重(mg)解吸液浓度（g/l）解吸液中总黄酮量（mg）纯度（%）回收率（%）40%18.228.401.4927.0071.364.550%20.629.511.5231.0178.874.160%19.827.791.6332.0387.577.570%18.934.981.7332.9871.476.2AB820.026.611.4829.9883.770.9表12吸附液中黄酮含量吸附液浓度（g/l）吸附液中总黄酮量（mg）纯度(%)2.0942.0021.6表11中树脂为酯基树脂，由二乙烯苯（DVB）和丙烯酸甲酯聚合而成，其百分含量是指在树脂制备时DVB所占的比例，DVB为非极性苯环结构，其含量越高非极性越强，极性越弱。由表11、12的数据可以看出五种不同极性的树脂都有纯化黄酮的作用，纯化前黄酮纯度是21.6，通过40%、50% 、60% 、70% 、AB8树脂纯化后的黄酮纯度依次是79.3% 、78.8% 、87.5% 、71.4% 、83.7%，分别为纯化前的3.67 、3.65 、4.05 、3.31 、3.88倍。 60%树脂纯化后黄酮的纯度最高，由此可得60%树脂的纯化性能最好，AB8次之。由表11可知通过40% 、50%、 60% 、70% 、AB8 树脂对黄酮吸附后的回收率分别为64.5% 、74.1% 、77.5% 、76.2% 、70.9% 。其中60%树脂回收率最高。由上分析可知60%树脂回收率和纯化效率是最高的，故60%树脂是最佳的。3.4.4.1不同类型树脂对黄酮纯化效果的分析不同类型的树脂对黄酮纯化效果的不同可以通过树脂结构和黄酮结构来进行分析，黄酮是具有一定疏水结构的酚羟基化合物，在较弱的疏水作用协同下，黄酮可以和树脂中的酯基发生特异性的氢键作用，从而提高了树脂对黄酮的吸附选择性9。在本论文的一系列酯基树脂中酯基含量不同，疏水性不同，酯基含量特别高时，疏水性特别弱，受到水分子的抑制作用不能与黄酮的酚羟基形成氢键作用，因此吸附量小，而且纯度也不高10。酯基含量在40%时（DVB含量为60%的树脂）此时的疏水作用可以协同氢键作用，达到对黄酮的选择性吸附的目的，因此纯度和回收率都比较高，超过了非极性的商品化树脂AB8。从上面的分析也可以知道，具有一定疏水性和氢键基团的树脂对黄酮具有更好的吸附选择性，因此如果调节树脂中疏水结构和氢键基团的比例可能会获得对黄酮具有更高选择性的树脂。3.5 最佳洗脱条件的讨论由上一节分析可知DVB含量为60%的树脂对黄酮提取液的吸附纯化效果最好，因此在该树脂中讨论用不同浓度的乙醇溶液做洗脱液对黄酮的洗脱效果，在实验时分别用60% 、70% 、80% 的乙醇溶液做洗脱液，在DVB含量为60%的树脂中对黄酮提取液的洗脱效果进行研究，结果如下表13 表13用不同浓度乙醇对黄酮提取液洗脱后黄酮的纯度与回收率洗脱液乙醇浓度(%)洗脱液体积（ml）吸附液烘干后质量（mg）吸附溶液浓度（g/l）含黄酮质量（mg）吸附后纯度(%)回收率(%)6019.128.301.6130.2880.2572.347019.827.811.6432.4387.4977.478019.627.711.6432.0686.9176.59由上表的纯度和回收率这两个因素数据显示，用70%的乙醇溶液作为洗脱液时，得到的黄酮纯度和回收率最高，所以70%的乙醇溶液是最佳洗脱液。4 结论本实验对芹菜叶黄酮乙醇提取法的主要提取条件：料液比、提取时间、乙醇浓度等三个因素进行了探索、研究。利用正交实验法对各个因素的不同水平条件进行了实验，通过紫外法（360nm