花叶良姜丛生芽诱导及增殖培养技术

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 花叶良姜丛生芽诱导及增殖培养技 术 摘要：试验研究了花叶良姜丛生 芽诱导及增殖培养技术，结果表明：花 叶良姜（Alpinia zerumbet cv.Variegata） 组培最佳配方为 MS+6-BA5.0 mg/L+NAA2.0 mg/L+椰子水 60ml/L， 芽继代培养 30 d，增殖系数达 7.5，增 殖芽健壮，发育形成的叶片有光泽，黄 绿斑纹明显。 中国论文网 /7/view-12990492.htm 关键词：花叶良姜；丛生芽诱导； 增殖培养 中图分类号：S682.19 文献标识码：A 文章编号： 16749944（2017）15007903 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 1 引言 花叶良姜（Alpinia zerumbet cv.Variegata）是姜科山姜属多年生草本 植物，原产于东亚，中国福建等省也有 栽培1。花叶良姜叶片有金黄色富有光 泽的纵斑纹，花姿优美，观赏价值高， 是室内观赏、城市园林绿化、道路隔离 带及两旁绿化的优良植物。目前，花叶 良姜种苗主要采用分蘖繁殖，因为在有 性生殖过程所造成的分离使 90%以上的 实生苗叶片变为绿色，失去黄绿嵌合的 条纹2，而分蘖繁殖一般在 410 月进 行，具有季节性，易导致苗木生产滞后。 近 10 年苗木市场紧俏，遇上喜庆节日， 种苗供不应求。为了解决市场供需矛盾， 采用组培育苗方法是快速培育花叶良姜 苗木的捷径。20 世纪 90 年代学者开始 研究花叶良姜组培技术，芽增殖系数最 高为 43，为进一步提高增殖系数，本 文针对花叶良姜丛生芽诱导及芽增殖培 养技术进行研究。 2 材料与方法 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 2.1 材料 试验材料来源于广东花卉市场。 选用斑纹艳丽，无病虫害、生长健壮的 花叶良姜袋苗作为研究对象，以其根茎 为外植体，通过灭菌消毒获取无菌活体 为试验材料。试验时间 2015 年 4 月2017 年 3 月。 2.2 方法 2.2.1 基本培养基筛选 采用单因素区组设计方法，设计 3 种基本培养基： MS、 N6、ER。每种基本培养基内添加 6- BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L。将形态特 征基本一致的无菌根茎接种于培养基中， 每种培养基接种 20 瓶，每瓶接种无菌 根茎 1 块，3 次重复。培养 40 d 观察记 录根茎萌芽与芽生长状况。 2.2.2 丛生芽诱导最佳细胞分裂 素种类与浓度的筛选 采用完全随机区组设计方法，试 验设计 6 个处理， KT：0.5 mg/L；KT ：1.0 mg/L； 6- -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 BA：2.5 mg/L；6-BA ：5.0 mg/L； ZT：0.5 mg/L；ZT：1.0 mg/L，每处 理添加 MS+NAA 0.1 mg/L。每处理接 种 20 瓶，每瓶接单芽 1 个，3 次重复。 培养 30 d，记录丛生芽形成的数量，计 算丛生芽诱导率。 2.2.3 芽增殖培养 本试验采用 L9（34）方法，详 见表 1。试验共 9 个处理，每个处理接 种 20 瓶，每瓶接单芽 1 个，3 次重复， 培养 30 d 统计新芽增殖数量，计算各处 理芽增殖系数。 2.2.4 椰子水最佳浓度的筛选 椰子水浓度试验设计 3 个处理： 30 mL/L；60 mL/L；120 mL/L， 分别加入 MS+6-BA5.0 mg/L+NAA2.0 mg/L 培养基内。每处理接种 20 瓶，每 瓶接芽 1 个，3 次重复。培养 30d，记 录新芽数量和生长状况，计算芽增殖系 数。 2.3 培养条件 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 所有的培养基均附加白糖 30g/L，琼脂 5 g/L，pH 6.0。培养基在 1.1MP，120高温高压条件下灭菌消毒 20 min。培养室温度（ 253），光照 时间每天 1214 h，光照强度 8003 000 lx。新转接的培养物，在 800 lx 光 照条件下培养 710 d（图 1图 4） 。 2.4 数据分析方法 试验数据采用 Excel 2007、SPSS11.5 进行数据统计及显著性 分析。根茎萌芽率=萌芽的根茎数量/接 种根茎总数100% ；丛生芽诱导率 =形 成丛生芽的单芽数量/接种单芽数量 100%；芽增殖系数 =新增芽的数量/总 接种芽数量。 3 结果与分析 3.1 基本培养基对根茎萌芽和芽 生长的影响 表 2 可知，根茎萌芽率 MS 和 N6 与 ER 之间存在极显著差异。丛芽生 长最适合的基本培养基为 MS，它培养 的芽粗壮，色带明显，叶面有光泽。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 MS 不仅含有较高的无机盐，微量元素 种类齐全，有机营养也丰富。N6 和 ER 不含肌醇。肌醇在糖类的相互转化中起 作用，参与碳水化合物，磷脂代谢及离 子平衡等生理活动，对植物组织和细胞 的繁殖、分化、芽的形成均有良好的促 进作用。由此可见，肌醇对花叶良姜芽 健康生长的促进可能起着有效的作用。 3.2 细胞分裂素对丛生芽诱导和 生长的影响 表 3 可知，丛生芽诱导率处理 2 高达 91.7%，处理 4 和 6 均为 86.67%， 三者不存在显著性差异。它们与处理 5、1 和 3 之间存在极显著差异；适宜丛 生芽诱导的细胞分裂素种类和浓度不代 表适宜丛生芽的生长，如处理 2 诱导萌 发的丛生芽粗短密集，有玻璃化现象， 扦插能生根的有效芽极少；处理 4 诱导 萌发的丛生芽生长健壮，扦插能生根的 有效芽多；处理 6 诱导萌发的丛生芽形 态特征与处理 2 相似。综上所述，花叶 良姜丛生芽诱导比较适宜的细胞分裂素 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 种类和浓度为 6-BA 5.0 mg/L。 表 4 可知，处理 9c 其它处理 之间存在显著性差异，处理 6 与其它处 理之间存在极显著差异。6-BA 在芽增 殖诱导过程中起主导作用，NAA 起辅 助 6-BA 促进细胞分裂和芽伸长生长作 用。随着 6-BA 浓度的增加芽增殖系数 不断的提高，当 6-BA 为 7.5 mg/L 时， 芽增殖系数最高，平均为 8.66，但芽玻 璃化严重；当 6-BA 为 5.0 mg/L 时，芽 增殖系数平均为 5.9，芽健康生长；当 6-BA 为 2.5 mg/L 时，芽增殖系数平均 仅 1.1。当 6-BA 为 5 mg/L 时，在培养 基内添加不同浓度的 NAA，其增殖芽 的生长状况不一致，如处理 4 增殖芽健 壮，生长良好，偶有根系出现，处理 6 增殖系数比处理 4 高 29.8%，但芽细小， 叶片黄化现象偶有发生。然而，为使花 叶良姜组培苗生产长期较高效化，建议 处理 4 和处理 6 交替使用。 3.4 椰子水浓度对芽增殖和生长的影响 由图 5 可知，从增殖芽生长状况 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 看， 增殖芽生长于椰子水 30 ml/L 的培养基时，芽生长缓慢，培养 30 d， 芽高 0.5 cm；生长于含椰子水 60 mL/L 的培养基中时，培养 30 d，芽高达 3 cm，并分化出一定量的根系；生长于含 椰子水 120 mL/L 的培养基中时，细胞 分裂和芽生长活性过强，引起细胞生长 不均衡而导致芽粗短密集成团，部分芽 玻璃化严重致死。因此，本试验以椰子 水 60 mL/L 添加到培养基对花叶良姜芽 的增殖效果较好，培养 30 d 芽增殖系数 达 7.5，且芽良好地生长，能满足产业 化生产的需求。 4 结论与讨论 通过试验筛选出花叶良姜最佳丛 生芽诱导及增殖培养基配方为 MS+6- BA5.0 mg/L+NAA2.0 mg/L+椰子水 60 ml/L。花叶良姜好肥，MS 培养基无机 盐含量均较高，微量元素种类较齐全， 浓度也较高，为较稳定的平衡溶液，能 满足花叶良姜芽增殖和生长的营养需求。 细胞分裂素和生长素种类组合及浓度配 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 比对芽的生长发育起着极其重要的作用。 试验结果显示，细胞分裂素 6-BA 起主 导作用，生长素 NAA 起辅助作用。但 不同的浓度配比，对花叶良姜芽增殖和 生长的效果不一。表 4 处理 6 芽增殖系 数 6.8，虽然比处理 9 低，但增殖芽健 康，有活性，继代培养时芽生长迅速， 叶片黄绿斑纹明显有光泽，后劲足。处 理 9，芽增殖系数高达 9.2，但芽玻璃化 严重，继代培养时，芽生长缓慢，褐化 死亡。这可能是因为 6-BA 与 NAA 浓 度比例过高，细胞分裂能力