有机磷农药及其解救药对兔血压和呼吸的影响

成 都 医 学 院 教 案 联 授课教师 荣成 职 称 初级（技术） 授课时间（次数） （2 次） 课 课程名称 医学机能实验学 授课专业 2004 级临床（甲班） 教学层次 本科 教材名称 医学机能实验学 出 版 社 科学出版社 章节名称 有机磷农药及其解救药对兔血压和呼吸的影响 课 型 实验课 教学时数 3 教学要求 1、观察有机磷酸酯类农药的毒性作用以及动物的中毒症状 2、观察阿托品及派姆（PAM）的解毒作用 3、观察有机磷酸酯类农药中毒对动物血压和呼吸的影响 旧课复习 1、什么是黄疸？其分类有那些？ 2、黄疸发生的机理是什么？ 新课过渡 1、什么是有机磷中毒？中毒原理？M、N 受体怎样传递？ 2、有机磷中毒的 M、N 样症状的表现？中毒时呼吸、血压的变化情况？ 教学主要内容 教学方法 时间分配 实验原理】 敌百虫等农药中含有的有机磷酸酯类可以与胆碱酯酶牢固的结合，其结合点位 于胆碱酯酶的酯解部位丝氨酸的羟基，磷氧二原子易于形成共价键结合，生成难以 水解的磷酰化胆碱酯酶。结果使胆碱酯酶失去水解乙酰胆碱（Ach）的能力，造成体 内 Ach 大量聚集，引起一系列中毒症状，包括 M 症状、 N 症状和中枢神经系统症状。 如果不及时抢救，酶在几分钟或几小时内老化，形成更稳定的单烷氧基磷酰化胆碱 酯酶。此时即使使用胆碱酯酶复活药，也不能恢复酶的活性，必须等待新生的胆碱 酯酶出现，需要 1530 天，因此有机磷中毒要迅速抢救。阿托品为 M 受体拮抗剂， 通过阻断 Ach 对 M 受体的激动作用来减少有机磷中毒时过量 Ach 对机体造成的损 伤。解磷定（PAM）进入中毒者体内，以其带正电荷的季铵氮与被磷酰化的胆碱酯 酶的阴离子部位以静电引力结合，结合后使其（=N-OH ）基团趋向磷酰化胆碱酯酶 的磷原子，进而与磷酰基形成共价键结合，生成磷酰化胆碱酯酶和解磷定的复合物， 后者进一步裂解为磷酰化解磷定，同时使胆碱酯酶游离出来，恢复其水解 Ach 的活 性。 【方法与步骤】 1.称重：取家兔，称重，识性别。 2.麻醉：自耳缘静脉按 1ml/kg 的剂量注射 3%的戊巴比妥钠。 3.固定与备皮：仰卧位固定动物后，剪去颈部的兔被毛，暴露相应的手术视野。 4.颈部手术：做颈部正中切口，先做气管插管，然后分离一侧颈总动脉，穿线 备用。 5.颈动脉插管：先在动脉插管中注满肝素生理盐水，并将动脉插管和压力传感 器相通，准备测量颈总动脉血压。 6.实验装置准备：将带有动脉插管的血压换能器与 BL-410 生物机能实验系统的 输入通道相连，并连接入通道 1，选择输入信号-压力。将呼吸换能器和气管插管相 连，并连接入通道 2，选择输入信号-呼吸。 7.观察动物的活动、呼吸、唾液、瞳孔大小、肠鸣音、大小便及其有无肌肉震 颤等情况，观察并记录正常呼吸和血压。 8.给药：实验分为 3 组，3 只家兔均以敌百虫 80mg/kg(8%，1ml/kg)耳缘静脉注 射（或用 0.5%敌敌畏 0.5ml/kg 肌肉注射） ，观察动物上述指标的变化。当中毒症状 明显时，甲兔由耳缘静脉注射阿托品 1mg/kg（0.1%,1ml/kg） ，乙兔由耳缘静脉注射 PAM 50mg/kg（2.5%，2ml/kg） ，丙兔由耳缘静脉注射阿托品 1ml/kg（ 0.1%，1ml/kg）和 PAM 50mg/kg（2.5% ，2ml/kg ） 。 9.观察比较两兔中毒症状消失情况，哪些中毒症状消失，哪些没有消失，为什 么？怎样使中毒症状完全消失？ 附：主要递质的合成、消除与附：主要递质的合成、消除与主要效应 ACH 为传出神经 递质递质 神经递质的释放方式有： 1.胞裂外排 2.量子化释放：无神经冲动时也有少量（一个囊泡为一个量子单位）递质释放，但 不能引起动作电位。 2.量子化释放：无神经冲动时也有少量（一个囊泡为一个量子单位）递质释放，但 不能引起动作电位。 3.共同传递：一种神经可同时释放多种递质。 4.其它：溢出(量少，难引起效；置换(量较大，可引起效应) 胆碱能神经：全部自主神经节前纤维；全部运动神经；全部副交感神经 节后纤维；极少数交感神经节后纤维。 合成与消除 讲 授 法 15 分 钟 乙酰 CoA CoA 突触前膜胆碱乙酰化酶 Ach 胆碱 Ach Ach 入血 胆碱+乙酸 chE Ach 突触后膜 突触间隙 胆碱受体的主要分布和兴奋时的主要效应受体 主要分布 激动时的效应 M 与 N 效应 M 受体为 G 蛋白偶联受体 AchM 受体 激活 PLC IP3 DAG 效应 N 受体为门控离子通道型受体 Ach+N 受体 钠、钾、钙通透性 去极化 神经节兴奋 骨骼肌收缩 肾上腺髓质释 放 AD、NE 讲 授 法 15 分 钟 心脏 抑制(心率 、传导 、收缩力 支气管平滑肌 收缩 内脏平滑肌(胃肠、膀胱、胆道) 收缩 M 眼(虹膜括约肌、睫状肌) 收缩(缩瞳、调节痉挛) 腺体(汗腺、唾液腺、支气管腺) 分泌 突触前膜 负反馈调节Ach、NA释放 N1 神经节 兴奋 N 肾上腺髓质 促NA、Adr释放 N2 骨骼肌 收缩 激活钾通道 或抑制钙通 道 AC cAMP 抑制 有机磷酸酯的毒理、解毒机制与阿托品应用 【应用】 与阿托品合用于中度以上有机磷酸酯类中毒的解救。 【不良反应】 过量(2g/次)或静注过快(500mg/min)可致乏力、视力模糊、复视、眩晕、 头痛、恶心、呕吐、心率加快等。(系阻断神经-肌接头和抑制 chE 所致) 胆碱酯酶复活药及特点： 磷酰化 chE 磷酰化 chE-PAM 复合物 + + chE(复活) 游离有机磷 磷酰化 PAM(无毒) 【特点】 1.只能使未“老化”磷酰化 chE 复活 2.对不同有机磷酸酯类中毒疗效不同：对内吸磷、马拉硫磷、对硫磷等效果较好； 对敌百虫、敌敌畏效果差；对乐果无效。 3.对解除骨骼肌震颤效果好；对恢复植物神经功能效果差；对解除中枢症状有一定 效果。 4.不能直接对抗体内聚集的 Ach 的作用，故应与阿托品合用。 5.过量可阻断神经-肌接头和抑制 chE。 讲 授 法 15 分 钟 阿托品 Ach M 样 症 状 N 样 症 状 中 枢 症 状 Ch+CH3COOH chE P P chE PAM PAMP-chE P-PAM 随尿排出 PAM 教学 重点 及解 决方 案 教学重点: 1.有机磷中毒及解救的机制。 2.递质和受体来发挥对效应器的调节作用。 解决方案:理论结合板书讲解。 教学 难点 及解 决方 案 教学难点：药物作用的靶位与效应 解决方案： 1.密切观察反应，及时抢救。若阿托品耳缘静脉注射失败，立即腹腔注射 PAM。 2.观测瞳孔时，注意光线强弱前后一致。 3. 理论结合讲解 与其他 学科交 叉或结 合内容 药理学 内科学有机磷中毒时药物的应用与治疗。 外 语 要 求 中文 中毒 有机磷杀虫药 碘解磷定 英文 poisoning Organophosphorous insecticides pralidoxime iodide,PAM 中文 双解磷 氯磷定 英文 trimedoxime,TMB4 pyraloxime methylchoride,PAM-Cl 课后 练习 1.有机磷酸酯类农药主要中毒症状有哪些？其机制是什么？ 2.阿托品能对抗哪些中毒症状?为什么? 3.PAM 的解毒原理是什么? 为什么用药越早越好? 新课 预习 1.心电图的相关内容； 2.实验-心律失常模型的复制和解救的相关理论及相关步骤。 教具 1.实验器械 2.动