临床硕士开题报告---B7-H4在系统性红斑狼疮发病机制中的初步研究

B7-H4在系统性红斑狼疮发病机 制中的初步研究 目录目录 研究背景 研究目的及意义 研究内容与方法 可行性分析 预期结果 目前进展 1 3 4 5 2 6 研究背景研究背景 研究背景研究背景 Carroll MC et al, Nat Rev Immunol. 2004;4:825-31. 研究背景研究背景 T/B淋巴细胞的活化过程需要双信号传导 1.抗原提呈细胞在 MHC-I或者 MHC-II类分子的作用下将抗原肽 提成给淋巴细胞的 TCR/BCR分子，为第一信号 2.抗原提呈细胞与淋巴细胞表面的共刺激分子 B7/CD28之间的 相互作用，将信号往下传导，为第二信号 Salomon B et al.Annu Rev Immunol,2001.19:225-52. 研究背景研究背景 B7家族分子可以分为以下两类： 1.传递免疫激活信号分子：如 B7.1 (CD80)、 B7.2(CD86)、可诱导 T细胞激活因子配体（ B7-H2、 ICOSL)等； 2.传递免疫抑制信号分子：如：程序性死亡受体的配体 1、 2（ PD-L1)、（ PD-L2) Ghiotto M et al. Int Immunol, 2010. 22:651-60. Hamel KM. et al. Arthritis Rheumatol, 2014.66:60-7. 研究背景研究背景 免疫平衡的维持示意图 Salomon B et al. Annu Rev Immunol, 2001. 19: 225-52. Kuroiwa T et al. J Immunol. 2000;164:3323-3329. Starke A et . Kidney Int, 2010. 78: 38-47. Wahl P et al J Am Soc Nephrol, 2002. 13： 1517-26. 研究背景研究背景 研究背景研究背景 B7-H4（ B7x） 新发现的 B7家族抑制性分子，然而， 其受体在 T淋巴细胞的表达是未知的， sB7-H4 是其 可溶性形式，存在于血清中，已被报道存在在肿瘤 患者中 B7-H4 mRNA水平在外周组织中广泛表达，主要表达在 非造血细胞中，目前研究表明 B7-H4在肾小管上皮细 胞（ TEC)中组成型表达 Sica GL et al. Immunity, 2003. 18:849-61. Prasad DV et al. Immunity, 2003. 18:863-73. Pawar RD et al. Clin Exp Immunol, 2015. 179:329-43. 研究背景研究背景 Pawar RD et al. Clin Exp Immunol, 2015. 179: 329-43 研究背景研究背景 Yu DL et al. Anhui Medical Journal, 2012. 33: 793-796. 研究目的及意义研究目的及意义 1.初步揭示 B7-H4在 SLE和 LN中的作 用机制。 2.初步研究 B7-H4分子是否可以成 为 SLE诊断的标记分子 研究内容和方法研究内容和方法 主要研究内容 ：1.ELISA方法检测可溶性分子 sB7-H4在 SLE和 LN血清中水平及其与狼疮活 动度的相关性。 2. 免疫组化检测肾脏组织中膜性 B7-H4在 SLE合并狼疮肾炎中的表达情况 及与狼疮活动度的相关性。 研究内容与方法研究内容与方法 研究方法和内容研究方法和内容 u符合条件的 患者进行调查 ： u调查内容 包括 ： 1.一般人口学特征 、目前临床表现及实验室检 查（包括体格检查、 SLEDAI评分、血常规、尿 常规、生化肝肾功能、免疫学指标等） 2.肾脏病理检查结果、激素治疗及反应情况 研究内容和方法研究内容和方法 1.活动性 SLE(ASLE): SLEDAI 8 2.非活动性 SLE(ISLE)： SLEDAI0.5g/24h或者病理检 查为膜性、增生性、系膜性肾小球肾炎等。 分组标准： 研究内容与方法研究内容与方法 SLE患者和健康对照人群 纳入标准 排除标准 一般人口学特征实验室检查血清 或肾 标本收集 临床表现及特点 根据临床表现及实验室检查进行评分及分组 病人组 健康对照组 非活动组 活动组 狼疮肾炎组 ELISA、免疫组化检测， 分析各组，可溶性 B7-H4、膜性 B7-H4是否有统计学差异，及 与 SLEDAI或者 C3、 C4等是否存在线性相关性 统计学处理统计学处理 1.定量资料正态性数据用 xs 描述，两组 比较用独立样本 t检验； 2.非正态性数据用中位数（四分位间距） ，组间比较用秩和检验； 3. 正态数据， Pearson线性相关分析检测 两组数据之间的相关性，非正态数据，用 Spearmen分析。 二 可溶性或者膜性 B7-H4在 SLE、 LN中水平较健康对 照升高，而且与 SLEDAI评分有一定的相关性 初步揭示 B7-H4分子在 SLE和狼疮肾炎中的作用机制 ，可能为其治疗提供新的药物靶点 ? 预期结果 可行性分析可行性分析 (2) 整个实验有多位教授、博士、硕士、同学等指导、帮助 (3) 掌握 ELISA，免疫组化等操作 (1) 整体实验依托生命科学院实验室，条件环境均完善 目前进展目前进展 SLE NC P Number 56 29 Sex (female/male) 52:4 26:3 0.611 Age (yr) 33.28.6 32.26.1 0.053 Glu 5.381.77 4.760.76 0.076 ALB 31.18.9 48.71.8 P0.001 TG 1.851.15 4.541.09 P0.001 Scr 155.6197.0 57.917.0 0.016 SLEDAI 12.48.3 NA C3(g/l) 0.690.37 NA C4(g/l) 0.130.09 NA dsDNA(+/-) 24/32 NA ANA(+/-) 50/6 NA BUN(mmol/l) 8.597.79 NA ESR(mm/h) 50.333.8 NA CRP(mg/l) 18.730.4 NA mTP(g/d) 2.704.09 NA Glu or IS no.(%) 39:17(69.64%) NA 目前进展目前进展 sB7-H4在 SLE的水平 目前进展目前进展 sB7-H4 在狼疮肾炎血清中水平 目前进展目前进展 sB7-H4与 SLEDAI的线性相关 (ng/ml) 创新点创新点 （ 1） B7-H4是新发现的分子，在 SLE患者中的表达 情况很少报道，本研究同时用 ELISA、免疫组化 的方法检测 B