分子诊断及基因检测的临床应用ppt课件(1)

1 分子诊断及基因检测 在临床中应用的进展 2 文献检索及学术趋势文献检索及学术趋势 检索策略：查询2012-2018年间，以“gene diagnostic” or “molecular diagnostic”为关键词；主要查找遗传学领域文献和肿瘤学领域的文献，发 表文献量较大，在两个领域中均有广泛应用 3 过去 宏观水平检测 检测只是判断有无疾病 根据部位和改变程度诊断疾病 实验室诊断技术的进步 今天 分子水平检测 根据细胞生物学或DNA诊断疾病 检测可区分疾病类别 预测特定治疗结果 预测不良反应 监测疾病进展 明天 预测性检测 多技术平台，更高精确度 多因素分析常见和复杂疾病 多基因信息作为疾病诊断标准 新的检测标本:尿、唾液、呼吸气、其他 更多应用诊断性影像学 4 生化生化- -细胞细胞- -染色体染色体-CNV-STR-SNP-CNV-STR-SNP水平上水平上 5 分子诊断及基因诊断在遗传学中的应用 进展 分子诊断及基因诊断在肿瘤学中的应用 进展 6 基于分子诊断的遗传学应用 遗传疾病风险筛查 查出孟德尔疾病致病基因 早期疾病预测 孕前/胚胎植入前筛查 药物基因组学 风险分层 药物效应和剂量 不良反应预测 常见疾病风险 风险预测 风险分层 查出早期的行为异常风险显现 7 2018/12/14 Friday7 遗传学疾病的筛查应用 8 2018/12/14 Friday8 1 1、间期荧光原位杂交、间期荧光原位杂交,iFISH,iFISH 8 Only 24h 9 2018/12/14 Friday9 2 2、Q-PCRQ-PCR荧光定量荧光定量PCRPCR 荧光标记荧光标记 的引物扩的引物扩 增增STRSTR片片 段，然后段，然后 经毛细管经毛细管 电泳检测电泳检测 扩增的峰扩增的峰 型来判断型来判断 扩增位点扩增位点 倍性。倍性。 10 2018/12/14 Friday10 3 3、MLPA MLPA 多重多重连接探针扩增连接探针扩增 如果检测的靶序列发生点如果检测的靶序列发生点 突变或缺失、扩增突变，突变或缺失、扩增突变， 那么相应探针的扩增峰便那么相应探针的扩增峰便 会缺失、降低或增加，因会缺失、降低或增加，因 此，根据扩增峰的改变就此，根据扩增峰的改变就 可判断靶序列是否有拷贝可判断靶序列是否有拷贝 数的异常或点突变存在。数的异常或点突变存在。 11 2018/12/14 Friday11 4、High-throughput sequencing（二代测序-非侵入产前诊断） 胎儿 12 2018/12/14 Friday12 5 5、Array-CGHArray-CGH 13 2018/12/14 Friday13 携带不同荧光的待测样本和对照样本竞争性地与液相磁珠上的携带不同荧光的待测样本和对照样本竞争性地与液相磁珠上的21chr BAC21chr BAC进行杂进行杂 交，再检测荧光强度评价待测样本剂量，同交，再检测荧光强度评价待测样本剂量，同aCGHaCGH！ 6 6、BOBsBOBs液相芯片液相芯片 14 分子诊断技术的发展诊断精准程度的发展 100Mb 10Mb 1Mb 100Kb 10Kb 1Kb 100bp 10bp 1bp Feature size of detectable genomic imbalances in log scale Karyotyping FISH MLPA RT-PCR BAC array CGH Oligo microarrays Sanger/ Next generation Sequencing 15 发病易感遗 传缺陷 早期查出 针对性预防疾 病发展 预测对药物的 可能反应 监测药物反应和 发病反复 健康状态无症状疾病状态慢病治疗有症状疾病状态 个体化医学 当今医疗保健重点 病人分层 / 治疗 未来医疗保健重点 个体化药物治疗 疾病基因组学药物基因组学 遗传学疾病的治疗应用个体化治疗 16 ? 均有哮喘急性发作 受体遗传变异引起疗效和安全性个体差异 哮喘发作终止 均吸入2肾上腺素受体激动药 沙丁胺醇(Albuterol) 沙美特罗 (Salmeterol) 死亡 2肾上腺素受体基因 变异 (Arg/Arg16) 17 人数 药物代谢酶遗传变异引起疗效和毒性个体差异 使用相同剂量后体内药物总量 酶活性过高酶活性适中酶活性过低 无效毒性 血内药物浓度 18 疾病相关基因 疾病预测与诊断 药物作用相关基因 个体化药物治疗 罕见孟德尔遗传病 致病基因 常见复杂疾病 易感基因 药物代谢/作用 基因 药物代谢/作用 SNPs 疾病预测-对疾病的新认识和控制个体化用药-最佳药物反应 伦理、法律、社会问题 分子诊断是实施优生优育及个体化治疗的必备技术 基因检测 19 分子诊断及基因诊断在遗传学中的应用 进展 分子诊断及基因诊断在肿瘤学中的应用 进展 20 细胞增殖 血管新生 与细胞外基质的黏附 局部侵犯 进入血管内、存活、 外渗 细胞增殖 与细胞外基质的黏附 未知功能的基因 (25) 基因与肿瘤细胞生物学各个方面均有关 21 分子诊断在肿瘤学应用的主要技术 诊断 预后评估 判定治疗效果 内容 基因突变 基因表达 有无 类型 位置 效应 有无 水平 效应 临床应用 检测技术 PCR 基因测序 蛋白芯片 核酸杂交 免疫化学 22 样本 内容 与遗传有关的基因突变 检测技术 PCR 基因测序 蛋白芯片 基因测序 免疫化学 血液 肿瘤组织 血浆DNA变化 血浆变中癌基因表达检测 肿瘤标志物的检测 肿瘤细胞的基因突变 肿瘤细胞的基因表达 肿瘤细胞的蛋白表达 PCR 23 24 BRACAnalysis Campath (坎帕斯 ) CD52人源化单克隆抗体 Herceptin (赫赛汀) Camptosar (伊立替康 ) Gleevec(格列卫) Oncotype DX 乳腺癌 判断病情 慢性淋巴细胞性白血病 选药 乳腺癌 确定剂量 结肠直肠癌 判断药物疗效 慢性髓细胞性白血病 复发风险 乳腺癌 基因测序, 风险分析 轻微后遗症 HER2基因表达 UGT1A1多态性分析 BCR-ABL荧光定量 多变量分析 分子诊断在肿瘤学的临床应用分类及举例 疾病易感 25 发现 生物标记