炭疽病原精要课件

炭疽的病原学与实验室检测 自治区疾控中心应急办 赛娜瓦尔 内容 l病原学 l培养特性与生化反应 l抗原结构 l致病性 l毒力 l变异性 l抵抗力 l军事医学意义 l实验室检测 l鉴定方法 病原学 形态与染色 炭疽芽孢杆菌是病原菌中最大的杆菌之 一，大小为（35）um（11.2）um，革 兰氏染色阳性，无鞭毛，无动力，有荚膜， 能形成芽孢。镜检两端平切，在动物和人体 标本中，常呈单个或短链排列，在人工培养 基中常形成竹节状长链，有的链长达数百个 菌体，菌体相连处有胞间链丝。 形态与染色 炭疽杆菌在机体内或含血清或碳酸氢钠特殊 培养基中可形成荚膜。荚膜抗腐败能力大于菌 体，因此在腐尸检片中可见到称为菌影的无内 容物的荚膜。荚膜是由质粒DNA编码，无毒菌株 不产生荚膜。 荚膜成分为D-多聚谷氨酸，由荚膜质粒控 制，与炭疽杆菌治病力有关，在体内能抑制白 细胞的吞噬和消化，在体外能阻断菌体胞壁上 的噬菌体受体，有助于病菌在体内繁殖扩散和 建立感染。 病原学 芽孢 炭疽杆菌是需氧芽孢杆菌属（Bacillus ）中最重要的致病菌，在有氧、温度适宜（25- 30）的外界环境或人工培养基上，易形成芽 孢。芽孢位于菌体中央，呈椭圆形，孢子囊不 膨大。芽孢又称内生孢子，带有完整的核质、 酶系统，合成菌体的机构，保存细菌的全部生 命活性。 病原学 图1 在血琼脂平板上炭疽杆菌 G（X1000 ） 图2 带芽胞炭疽杆菌，G（1000 ） 芽孢 在适宜的条件下，芽孢通过激活、发芽、 生长3个阶段又可成为新的繁殖体，继续分 裂、增殖、活跃生长，所以芽孢是处于休眠 状态的细菌，广泛存在于空气、尘埃、地表 、水源、土壤和腐烂物体中。每种细菌的芽 孢形态、大小和在菌体中所处部位相当稳定 ，这在细菌鉴别上重要意义。 病原学 芽孢 芽孢具有多层厚膜结构，其中芽孢壳由 一种类似角蛋白的疏水蛋白组成，非常致 密、不具渗透性，对外界抵抗力强，能抵 抗表面火性剂、化学药物的渗透和常用物 理灭菌法 。 病原学 芽孢 炭疽芽孢污染点难以彻底消除，往往成为顽固疫 点，是炭疽的自然疫源地，也是炭疽在畜间、人 间暴发流行的源头。 芽孢是炭疽杆菌在自然条件下存在的主要形式 ；在宿主体内和完整尸体内，炭疽杆菌保持繁殖 体形态，不形成芽孢。所以，炭疽病死尸体严禁 解剖、屠宰、剥皮，以防止炭疽芽孢污染环境。 病原学 芽孢 由于炭疽芽孢可大量制备、长期存放， 并适宜于气溶胶施放，其在军事医学上 有特殊意义。人吸入极微量的炭疽芽孢 即可造成致死性感染。美国国会报告中 称，于大都市在适宜的气象条件下施放 1Kg的炭疽芽孢，可造成数十万人员死亡 ，其威力可见一斑。 病原学 培养特性与生化反应 炭疽杆菌营养要求不高，一般营 养肉汤和普通琼脂均可生长，需氧菌或 蒹性厌氧菌，最适pH7.2-7.4，最适温度 34-37，低于12或高于45则不能生 长。菌落灰白色粗糙型，表面稍隆起， 干燥无光泽不透明，边缘不整齐，常有 小尾突起，放大镜观察菌落呈卷发状， 边缘有菌丝射出的典型菌落形态。 培养特性与生化反应 培养3天后，菌落表面有小泡状颗粒即 所谓仔集落。在血琼脂平板上，早期无溶 血环，培养24h后有轻微溶血。有毒株在含 动物血清培养基或0.9%NaHCO3培养基，置 于20%CO2、37条件下培养24-48h可形成 粘液性菌落，用接种针挑取时可见拉丝状 ，此粘液物质为炭疽菌的荚膜，主要成分 为D-多聚谷氨酸：无毒株不形成荚膜，菌 落仍保持粗糙型。 培养特性与生化反应 炭疽杆菌在适当浓度青霉素溶液 作用下，菌体形态发生肿胀，成 为均匀链状串珠，称为串珠试验 ，对本菌有鉴别意义，其他需氧 芽孢杆菌无此现象。 培养特性与生化反应 在肉汤培养时由于形成长链，呈絮状 发育，管底有絮状、卷绕成团的沉淀， 液体透明，摇之均匀浑浊，不形成菌膜 或壁环。炭疽杆菌能分解葡萄糖、麦芽 糖、果糖，产酸不产气，不分解乳糖、 阿伯拉糖、甘露醇、水杨素，不产生 H2S。在明胶培养基中经3724h培养， 可使表面液化呈漏斗状，由于细菌沿穿 刺线向四周扩散成倒松树状生长。 在某些培养基上，炭疽杆菌在培 养6h开始产生紫红色色素，在碱性条 件下为红色，24h达高峰，色素的生 物学功能不详，据认为与培养基的硫 酸亚铁含量有关。 培养特性与生化反应 抗原结构 炭疽芽孢杆菌的抗原组成主要 包括荚膜抗原、菌体抗原、芽孢抗原 及保护性抗原等四种成分。 抗原结构 荚膜多肽抗原： 仅见于有毒菌株，是由D-谷氨酸多肽组 成的一种半抗原，可由腐败破坏而失去抗 原性，具抗吞噬作用。与细菌毒力有关。 由质粒DNA（pOX2）编码，质粒丢失，形成 荚膜能力也消失。荚膜抗原所产生的抗体 对动物无保护作用。若以高效价抗荚膜多 肽血清作荚膜肿胀试验及免疫荧光抗体试 验，对鉴定本菌有一定意义。 抗原结构 菌体多糖抗原： 由N-乙酰葡萄胺、D-半乳糖组成，与毒 力无关。由于耐热、耐腐败，在病畜皮毛 和腐败脏器中的此抗原虽经长时间煮沸仍 可与相应抗体（特异免疫血清）发生沉淀 反应，称Ascoli热沉淀反应，对追溯炭疽 芽孢杆菌病源方面有用。但由于此抗原特 异性不高，与其他需氧芽孢杆菌、14型肺 炎链球菌，甚至人类A血型抗原之间发生交 叉反应，故Ascoli反应目前已很少使用。 抗原结构 芽孢抗原： 由芽孢的外膜、芽孢壳等组成的芽孢特异 性抗原，具有免疫原性和血清学诊断价值 。最新研究发现炭疽芽孢抗原在炭疽芽孢 感染、致病和免疫上也起作用。芽孢外膜 的胶原样糖蛋白是免疫显性抗原，能刺激 机体产生强烈免疫应答。 抗原结构 保护性抗原（PA）： 是一种胞外蛋白质抗原成分，在人工培养 条件下亦可产生，为炭疽毒素的组成成分 之一，具有免疫原性，能使机体产生抗炭 疽杆菌的保护力。 庄汗澜、牟兆钦等探讨了保护性抗原（ PA）的免疫机制，发现： 1、PA免疫后，动物产生抗PA抗体、血中 吞噬细胞被激活，抗PA抗体除中和作用外 ，在体内能直接杀灭炭疽芽孢杆菌； 2、PA免疫动物抑制入侵的炭疽芽孢出芽 ，在炭疽强毒芽孢攻击后1-3天内，PA免疫 兔的肝、脾、淋巴结切片中只见少量芽孢 而无繁殖体，而对照兔组织内细菌以繁殖 体为主； 抗原结构 3、PA能非特异性的激活小鼠腹腔吞噬细胞 ，增强对入侵炭疽芽孢和金葡菌的吞噬和 杀灭； 4、被动转移PA免疫小鼠的血清和T细胞均 可提高受体小鼠对炭疽芽孢的攻击保护， 细胞免疫反应较弱，起着辅助B细胞的作用 ； 抗原结构 5、抗PA抗体水平与保护力之间并不绝对呈 平行关系、如粗制PA免疫，抗体滴度不很高 攻击后动物存活，而用纯化PA免疫，抗体滴 度很高攻击后却有动物死亡，提示除抗PA抗 体外，吞噬细胞及其他防御因素也参与抗炭 疽保护力的形成。 抗原结构 致病性 炭疽杆菌对绵羊、山羊致病力最强，牛、 马、驴、骡、驼、鹿等草食动物皆很易感 ，猪、犬、猫等杂食动物亦可感染；虎、 狮、豹、狼等肉食动物，误食炭疽病畜肉 ，亦可引起感染而死亡。猪常无症状，仅 在宰后肉检时才被发现。或仅局部出现淋 巴结炎、咽峡炎，个别出现肺炎及败血症 。 前苏联一家动物园因喂食病马肉，使一些 豺、獾、貂、黄鼬、美洲豹、山猫、豹死亡 ，白熊感染发病。家畜改良品种较土种易感 ，幼龄家畜较老龄家畜易感。 人对炭疽杆菌中等敏感、介于草食和肉 食动物之间。实验动物猴、兔、羊、豚鼠、 大鼠、小鼠对炭疽人工感染皆相对敏感，其 中猴、兔、羊、较豚鼠、大鼠、小鼠敏感。 在感染濒死阶段（临死前10-14h），血中菌 数倍增时间：小鼠、豚鼠为50min，羊95min ，大鼠115min。 致病性 炭疽毒株芽孢皮下感染兔后，芽孢出芽、 增殖，全身扩散，血、肝、脾、肺、淋巴 结等组织都可找到炭疽杆菌和芽孢，当菌 数达108/ml时，实验兔死亡。肺中菌数约 比其他脏器高10倍；组织切片可见吞噬细 胞内有芽孢和大量短链菌体位于细胞间隙 。按照猴数据推算，人LD50计量为吸入 2500-55000个炭疽芽孢。F-344大鼠是炭 疽毒素试验的模型动物。 致病性 在自然界，野鼠中鼬鼠特别敏感，曾从 自然条件中的大沙土鼠、黄胸鼠体内分 离出炭疽杆菌。鸟类在自然条件下是不 感染的，只有马达加斯加和南部非洲的 鸵鸟较常患病。曾有报告，青蛙和鱼也 能感染炭疽，国内也曾有从鱼体内分离 出炭疽杆菌的报道。 致病性 毒力 炭疽的毒力依赖于荚膜和毒素两种成分， 这两种成分是由不同质粒编码的。荚膜物 质在体内可防御吞噬消化，在体外可掩盖 噬菌体受体，免于被噬菌体裂解。毒素含 有三个因子，即水肿因子（EF）、致死因 子（LF）和保护性抗原（PA）。其中水肿 因子（EF）能使血管渗透压增加，大量浆 液渗出，红细胞大量溶解引起血红蛋白和 氧结合不全，可产生缺氧性休克； 致死因子（LF）是非常强大的毒素，只要一分 子进入细胞，就可以导致细胞死亡。致死因子 作用于中枢神经，可以引起中枢麻痹，导致呼 吸衰竭而死亡。这两种毒素的作用都需要保护 性抗原的协同才能发挥作用。毒素作用是死亡 的主要原因，但毒素产生的本身并不能使炭疽 菌具有完全毒力，该菌需要在一个地方繁殖并 从那里扩散，从而在体内产生致死量的毒素， 这就需要荚膜的抗吞噬作用。所以完全毒力的 炭疽杆菌至少有两个特点：有荚膜、能产毒。 毒力 变异性 在自然条件下，炭疽杆菌易受物理 、化学、生理因素影响而发生变异。 实验时会出现形状不一的光滑型或 黏液型菌落、无明显卷发状边菌落、 显示色素的菌落、不产生荚膜的菌株 、毒力减弱或消失的菌株。 变异性 巴斯德（Pasteur1881年）通过42.5高温 连续培育研制出兽用菌苗即炭疽杆菌减毒 疫苗。Vodkin和Leppla(1983年)首先发现 了炭疽杆菌毒素质粒，Green等（1985年） 又发现了炭疽杆菌荚膜质粒，后分别命名 为Pxo1和Pxo2。 变异性 两个质粒的相继发现，证明了炭疽杆菌的 自然毒力处决定于染色体基因外，还与两 个编码质粒有关，从而对培养传代减毒、 通过机体减毒、强烈理化因素作用等人工 获得减毒菌株的方法中的分子机制和有关 炭疽毒素产生的遗传学提供了合理的解释 。 梁旭东等（1994年）对我国不同时期、 不同地区、不同来源所收集的炭疽杆菌进行 了质粒电泳图分析谱分析，强毒株含有两个 质粒，弱毒株因表现型不同，所含质粒各异 ，但只能单一存在。我国杨叔雅等通过新生 霉素、紫外线等理化因子诱变、筛选，或无 荚膜减毒株。现已清楚，这些都是由于编码 荚膜和毒素的质粒丢失而引起的变异。 变异性 变异性 Boehm用DNA-DNA杂交技术检测多株炭疽杆 菌和蜡状杆菌发现，10株炭疽杆菌强、弱 毒株的DNA同源性为90%-99%，与17株蜡状 杆菌的DNA同源性为32%-59%。根据伯杰 氏鉴定细菌学手册，种内同源性为70% ，亚种间同源性为60%-70%。炭疽杆菌与其 他需氧芽孢杆菌的同源性未高于59%，因此 炭疽杆菌应视为独立种。 变异性 大家公认全球的炭疽杆菌菌株间无多大 差异，最近Smith等用重复序列可变数法 分析从非洲Kruger国家公园分离的98株炭 疽菌存在A、B2个基本型。全球引起炭疽 暴发流行的菌株皆属A型。仅非洲存在A、 B2个型菌株。分离出B型菌株土壤的钙含 量和pH值高于A型，提示基因型与泥土的 化学特性相关。 抵抗力 炭疽杆菌繁殖体在562h、 6015min、75 1min即可灭之。常用的 消毒方法也能迅速杀灭。繁殖体在干燥的 血液中能生存1个月以上，对低温抵抗力 较强，保存于-15 鲜肉中能存活两周以 上。 抵抗力 芽孢对外界因素的抵抗力很强，气溶胶的 衰亡率0.1%/min。炭疽芽孢在学块和动物 粪粒中可存活40年以上，在干燥明胶或琼 脂中保存55年仍能发芽和有毒力，染色标 本中的芽孢仍可引起实验感染，在皮革中 也能生存数年。 抵抗力 Peeler证明，在堆肥中，温度达72-76.5 ，4天内可杀死芽孢。腌渍一个半月可杀死 肉中菌体，但芽孢仍有存活。经石灰水处理 的皮革在125天后芽孢仍有存活。所以在自 然条件下，炭疽芽孢在引发炭疽感染和传播 上起着主要作用。据报告煮沸10min、140 干热2h、湿热121需30min和2h，紫外线照 射需4h才能将芽孢杀死。 抵抗力 化学消毒剂以强氧化剂效果为好，如过氧 乙酸、氯亚明、环氧乙烷。炭疽芽孢对碘 敏感，1：2500碘液10min即可破坏芽孢， 如有污秽物不宜使用。新配制的20%石灰乳 、20%漂白粉需浸泡48h，可杀死芽孢。甲 醛杀灭力强，在有大量有机物存在时，采 用10%甲醛溶液较1%碘液好。 抵抗力 因此对炭疽杆菌消毒效果的评价，应以芽 孢是否被消灭为标准，即使残存几个芽孢 也会引起严重后患。 1964年Wilson报道在干燥土壤中的炭疽芽 孢40年后仍能发芽、致死动物。1959年我 国因挖掘64年前埋葬的墓地引发炭疽疫情 。 1970年，在某一国家公园，考古学家在考 古时挖掘出一些骨骼，根据碳原子测定， 估计约有200年左右，该骨骼经培养后分离 出炭疽杆菌。被炭疽芽孢污染的地表自然 疫源地，土壤中的病原体虽在阳光等环境 因素作用下存在生物衰亡，但30年后仍可 检测出相当数量有感染力的芽孢 ，可引起 炭疽暴发流行。 抵抗力 抵抗力 牧场一旦被污染，传染性往往达30年以 上。1941-1942年，英国在苏格兰实验炭疽 芽孢炸弹，估计约41014个芽孢被扩散， 安置于起爆点下风向的羊在几天内死于炭 疽，说明炭疽芽孢可通过爆炸分散成气溶 胶，使牲畜吸入感染死亡。第二次世界大 战后的20多年中，每年皆查出活芽孢。， 1979年（污染后37年）从约6cm的深的土层 中仍检出活芽孢。 抵抗力 为了消除污染，1986年英国国防部多次使 用表面喷洒、钻孔注入甲醛液，历时一年 多才洗消结束，共用去280吨福尔马林和 2000吨海水。由此可见，在泥土中炭疽芽 孢可存活至少37年以上，杀灭它非常困难 。 炭疽菌对青霉素、红霉素、氯霉素、四 环素、环丙沙星多种抗生素皆敏感，美国 报道存在含有青霉素酶菌株，将减低青霉 素的疗效 军事医学意义 炭疽芽孢长期被日、美、英、伊拉克和 前苏联等国家作为致死性战剂加以研究和储 备，美军将炭疽杆菌列为制式生物战剂。 WHO 顾问组将炭疽杆菌列为可能的生物战 剂。 1940年设在哈尔滨郊区的“731”细菌部队 每月以能生产炭疽杆菌500-600公斤。1952年 侵朝战争中，美国飞机在辽宁投掷带有炭疽 杆菌的羽毛、杂物，曾使5人患吸入性炭疽和 炭疽脑膜炎致死。 军事医学意义 据国外报道，1979年前苏联的Sverdlovsk事 件，曾发生吸入性炭疽，至少79人感染，68 人死亡。1985-1991年，伊拉克秘密研制炭疽 战剂，至海湾战争前夕以完成生物战剂导弹 的装填，所幸战争期间并未使用。 美国“9.11”事件以后，又发生无数起 炭疽粉末相关生物恐怖事件，更加深了全世 界对本病原体的重视和研究 实验室检测 检验程序 实验室检测的要求是快速检出、分离病原 菌和正确鉴定，以利早期确诊、查清疫源 、及时治疗和采取正确合理的防治对策。 炭疽杆菌的检验操作应按炭疽细菌学检查 要求（）进行。 实验室检测 检验方法 1、标本采集和处理 样品采集的原则是在治疗、消毒处理前， 尽量无菌、多部位、采足量，注意个人、 环境防护，妥善运送。对疑似炭疽污染样 品推荐用多黏菌素-溶菌酶-EDTA-醋酸佗选 择性琼脂培养基；对细菌含量较少的样品 采用血清肉汤增菌和感染豚鼠、小鼠法提 高检出率。 实验室检测 标本采集： 患者 皮肤炭疽以无菌手续采取局部病灶渗 出物、水疱内容物；肺炭疽采取血液和痰 ；肠炭疽采取血液、呕吐物及血样便；败 血症型炭疽采取血液；脑膜性炭疽采集脑 脊液。 病畜死畜、实验动物 炭疽感染尸体严禁屠宰解剖，以防芽孢形 成，一般割取耳朵、舌尖组织供检；实验 动物静脉或心脏采血和肋部切开检查病变, 无菌手续取脾一块.病、死猪切开咽喉部采 取淋巴结和出血性浸液。 外界现场标本 根据污染情况采取空气、土壤、水、食品 、物件表面等标本 实验室检测 实验室检测 标本处理 患者、病畜标本：血液直接检查。脏器经研磨制 成1：10至1：20悬液，供检。 外界现场标本：炭疽芽孢杆菌沾染的外界现场， 天然的基本是芽孢；人为的也是用芽孢作为生物 战剂。芽孢气溶胶沾染的外界标本中混有杂菌和 杂质，应先将标本经过稀释、洗脱（振荡10- 15min，静置5-10min，吸出上清液）、加温处理 ：60-65，30min，不要超过65 ，以防止炭 疽芽孢被杀死，吸出上清液。 实验室检测 分离培养 分泌液、血液、脑脊液等可直接分离接种于血琼 脂平板、普通琼脂平板和碳酸氢钠平板。血标本应 先增菌培养。皮毛等检材杂菌污染严重时可加热60- 65，30min以杀死无芽孢杂菌。 实验室检测 分泌物体液或洗涤掖等临床标本可直接分离 接种，每份至少分离接种5%血琼脂平板各 一个。接种前血琼脂平板应置37 孵箱内 将表面烘干。脏器组织标本应切成几个不 同的断面，压印琼脂平板表面，或滴加组 织悬液（1：20）稀释）0.05ml，然后用L 形玻棒均匀涂布。 外界现场标本经加温处理后，每份标本分别接 种5%血琼脂平板与戊烷脒选择性血琼脂平板各一 个。接种量视不同标本的杂菌污染程度而定。如 皮毛、土壤等污染程度较严重的标本，每个血琼 脂平板接种0.010.02ml，必要时稀释后再接种 ，戊烷脒琼脂平板因能抑制大部分杂菌，一般接 种0.1ml。 实验室检测 实验室检测 接种后，琼脂平板孵育于37。血琼 脂平板培养12h，取出观察早期菌落特征和 溶血性的观察。最迟不得超过15h，因培养 时间过长，炭疽芽孢杆菌菌落过大，会影 响菌落特征与溶血性的观察。 戊烷脒血琼脂平板培养1524h，对多数其他 需氧芽孢杆菌有抑制其出芽与繁殖的作用，而炭 疽芽孢杆菌能适应出芽繁殖，其生长仍受到轻度 抑制，菌落生长较慢、较小，但仍可保持狮子头 状和不溶血的特征。但戊烷脒血琼脂平板对某些 溶血性蜡样杆菌的抑制仍嫌不足。 实验室检测 根据菌落特征和溶血反应，挑选可 疑炭疽芽孢杆菌菌落，接种于增菌肉汤 中，用37氺浴箱孵育34h，观察肉汤生长 情况及时做动力等检查，再将分离得到的纯菌 进行鉴定。 实验室检测 鉴定方法 如培养后发现可疑菌落，可根据形态特征、青霉素串 珠试验、动物实验等鉴定，操作方法: 一、直接涂片镜检（荚膜检查）： 渗出液、血液可直接涂片，新鲜器官组织切面制成压 印片。自然干燥后，通过火焰固定，在10%福尔马 林中浸泡1015min或1：1000升汞中固定5min以 杀死芽孢。晾干后革兰氏染色，若见有荚膜的典 型竹节状革兰氏阳性大杆菌，可作为初步判定的 依据之一，并结合临床症状即可做初步诊断。 二、菌落形状： 观察37培养1215h的血琼脂平板上菌落形状，炭 疽芽孢杆菌典型菌落呈狮子头状，常有小尾突起 ，大小23mm，表面粗糙，呈毛玻璃样色调，边 缘不整，低倍镜检菌落边缘呈“卷发状”。用接 种针挑取时有黏性，呈“拉丝状”，这些特征在 其他需氧芽孢杆菌则少见。 鉴定方法 三、肉汤串珠试验：炭疽杆菌在含有适当浓度的青霉素 培养基中，可发生生态变异，菌体肿大而呈均匀的圆 球，呈串珠状。先制备琼脂板，将营养琼脂溶化后倾 注平皿，待凝固后用手术刀切取琼脂片，大小为长、 宽、厚相当（3cm0.5cm 0.3cm ）,置玻片中央，接 种待检菌均匀涂满再取灭菌的滤纸条（1.5cm 0.5cm），浸渍新配制的青霉素溶液（10100U/ml） ，不宜太湿紧贴于接种菌琼脂片之一端，置平皿中于 37培养46h。取出载玻片，与低倍镜下观察，在有 菌生长和抑菌区的临界线处，应有明显典型串珠形态 。 鉴定方法 四、噬菌体裂解试验：取一接种环被检 新鲜菌液，均匀涂布于烘干的普通琼脂平 板表面，干后，在涂菌区中心滴加诊断噬 菌体1滴，干后，置37培养8h，观察有 无噬菌斑；必要时，孵育18h再观察一次 。最好同时用人用炭疽芽孢杆菌疫苗株作 为阳性对照。 鉴定方法 五、溶血性：观察37培养1215h血琼脂 平板上菌落的溶血性。炭疽芽孢杆菌多 不容血，或仅少数菌株微溶血；其他需 氧芽孢杆菌大多迅速溶血，而且强烈。 鉴定方法 六、肉汤生长：将可疑菌落纯培养物 种于增菌肉汤中，37水浴中培养，4h， 观察生长情况，必要时培养1218h再观察 一次。炭疽芽孢杆菌在肉汤中生长的特点 为絮状沉淀生长、上液澄清，而其他需氧 芽孢杆菌则为颗粒状沉淀、均匀混浊，有 的形成菌膜。 鉴定方法 七、动力检查：取37水浴培养4h的新鲜 肉汤培养物一滴，置于盖玻片上，做悬滴 标本，镜检。炭疽芽孢杆菌无动力，而其 他需氧芽孢杆菌大多有动力。 八、青霉素抑制试验：取一接种环肉汤 培养物接种与10U/ml青霉素琼脂平板上， 培养18h，观察有无细菌生长。炭疽芽孢杆 菌一般不生长，或仅微生长 ；而大多数蜡 样芽孢杆菌等则生长良好。 鉴定方法 九、动物致