厌氧性细菌白喉杆菌结核杆菌课件

厌氧性细菌厌氧性细菌 需氧芽孢杆菌需氧芽孢杆菌 白喉杆菌白喉杆菌 结核分枝杆菌结核分枝杆菌 第十次实验第十次实验 1.1.掌握其他细菌（厌氧性细菌、需氧芽掌握其他细菌（厌氧性细菌、需氧芽 孢杆菌、白喉杆菌、孢杆菌、白喉杆菌、结核分枝杆菌结核分枝杆菌） 的形态、培养特点。的形态、培养特点。 2.2.掌握白喉杆菌的奈瑟氏染色和结核杆掌握白喉杆菌的奈瑟氏染色和结核杆 菌的抗酸染色方法。菌的抗酸染色方法。 实验目的与要求 实验内容 厌氧菌：破伤风杆菌、产气荚膜杆菌 1. 厌氧培养法 2.破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒梭菌 的生物学特性 需氧芽孢杆菌：炭疽杆菌和枯草杆菌的生 物学特性 白喉杆菌： 结核杆菌： 本次实验示教 产气荚膜“汹涌发酵”、破伤风庖肉培养管 产气荚膜庖肉培养管 动物实验：小鼠破伤风 厌氧培养：焦性没食子酸法 枯草普通平板，白喉亚碲酸钾血平板 本次实验操作 镜下观察：炭疽杆菌、枯草杆菌、破伤风 梭菌、产气荚膜梭菌、炭疽杆菌串珠、肉 毒梭菌。 实验标本：病人痰液和白喉培养物各1支 实验操作：Neisser染色（白喉培养物） 抗酸染色（病人痰液） 小结 厌氧培养法 1.庖肉培养基厌氧培养法 2.焦性没食子酸法 3.气袋法 4.厌氧罐法 5.厌氧手套箱法 破伤风梭菌 1. 形态观察-示教 2. 培养物观察 -示教 破伤风梭菌 庖肉培养基 破伤风梭菌血琼脂平板 3. 破伤风外毒素毒性作用试验（示教） 原理：破伤风梭菌产生的外毒素封闭 抑制性神经介质释放，伸肌、屈肌同 时强烈收缩，导致骨骼肌痉挛。 产气荚膜梭菌 1.形态观察-示教片 2.培养物观察-示教 产气荚膜梭菌 庖肉培养基 产气荚膜梭菌 血琼脂平板 “汹涌发酵”现象 产气荚膜梭菌能分解牛乳培养基 中的乳糖产酸，使酪蛋白凝固，同 时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲 成蜂窝状，将培养基中隔绝氧气的 凡士林冲向试管口，甚至冲开管口 棉塞，此现象称“汹涌发酵”。 肉毒梭菌形态观察-示教片 炭疽杆菌 炭疽杆菌串珠试验 炭疽杆菌（普通平板） 炭疽杆菌（血平板菌落） 枯草杆菌 枯草杆菌 枯草杆菌 白喉杆菌 白喉杆菌的奈瑟氏染色 取吕氏血清斜面上培养的白喉杆菌涂 片 干燥固定 奈瑟氏染液 第一液（美兰） 第二液 水冲洗 水冲洗 待干镜检 染7分钟 染1分钟 涂片 奈瑟氏染液 Neissser染色 Albert染色 菌落观察 白喉棒状杆菌 血平板 白喉亚碲酸钾血平板 Elek平板试验结果 Elek Test 沉淀线(阳性 ) 含白喉抗毒素滤纸片 白喉杆菌菌苔 3 2 1 结核杆菌 结核杆菌的抗酸染色 痰涂 片 干燥固定 石炭酸复红加温染色5分钟 冷却 水冲洗 3%盐酸酒精脱色1分钟 水冲洗 碱性美蓝复染1分钟 待干镜检 水冲洗 庖肉培养基培养法 由于肉渣培养基含不饱和脂肪酸 ，氧化时能消耗溶解于培养液中 的氧气，且组织中所含的还原性 化合物为谷胱甘肽（含SH基） 可使培养基的氧化还原电势下降 ，造成厌氧环境，故适于培养厌 氧菌。 焦性没食子酸法（示教） 将厌氧菌接种血平板。用方形 的消毒玻板一块，中央放焦性 没食子酸0.2g，覆盖纱布或棉