自身抗体的检测及应用 高三生物ppt课件教案

自身抗体的检测自身抗体的检测 及应用及应用 谷俊莹谷俊莹 一、概述 自身免疫耐受。 自身免疫（autoimmunity） 自身抗体（autoantibody）或自身 致敏淋巴细胞 自身免疫性疾病 二、自身抗体的检测 （一）抗核抗体 （ antinuclear antibody，ANA） 泛指抗各种细胞核成分（DNA， RNA，蛋白质和酶）的抗体。 1、ANA的类型 （1）抗核蛋白抗体 （2）抗DNA抗体 抗双链DNA抗体（抗dsDNA） 抗单链DNA抗体（抗ssDNA）。 （3）抗ENA抗体 可提取性核抗原（extractable nuclear antigens，ENA） 2、ANA的检测方法 间接免疫荧光法 用小鼠肝切片或印片作为细胞核基质， 还可用核质丰富的培养细胞如Hep-2，作 为抗原。 用荧光显微镜观察ANA荧光着染强度和免 疫荧光图形。 稀释待检血清可检测ANA效价。 3.常见的ANA图形及临床意义 均质型（ homogeneo us，H） 斑点型（ speckled，S ） 核膜型（ membranous ，M） 核仁型（ nucheolar ，N） 4.抗dsDNA的检测 常用间接免疫 荧光法检测， 常用的抗原基 质是马疫锥虫 或绿蝇短膜虫 。 （二）抗ENA抗体谱 不同的自身免疫病可产生不同的 抗ENA抗体。通过检测抗ENA抗体 的类型及其组合，可综合诊断自 身免疫病的类型。 1、检测方法 双向免疫扩散 对流免疫电泳 斑点酶免疫技术 免疫印迹技术 免疫印迹技术（最常用） 先将ENA混合抗原作凝胶电泳， 分离开不同的区带，然后把这些 区带转印到硝酸纤维膜上，加入 待检血清，最后用酶标抗体使相 应的抗原带显色 2、抗ENA抗体的主要类型及 临床意义 （1）抗Sm抗体 抗Sm是SLE的特异性标志之一 （2）抗核RNP抗体（抗nRNP抗体 ）又称抗U1RNP抗体。 抗U1RNP抗体是诊断混合性结缔 组织病（ MCTD）的重要血清学 依据，是MCTD的诊断标准之一。 （3）抗SSA/Ro和抗SSB/La 这两种抗体是干燥综合症 （SS）患者最常见的两种自身抗 体 （4）抗J0 -1抗体 最常见于多发性肌炎（PM） 患者。 （5）抗Scl-70抗体 几乎仅出现在PSS（进行性 系统性硬皮病）患者体内，是 PSS的特征抗体 （三）类风湿因子 （rheumatoid factor，RF） RF是以变性IgG为靶抗原的抗体 ，它能与人或动物的变性IgG结 合，而不与正常IgG结合，RF主 要出现在类风湿关节炎患者。 RF的检测最常用IgG致敏的胶乳 颗粒凝集试验，或速度散射比浊 法，但只能检测IgM类的RF。IgG 类，IgA类和IgE类RF需ELISA等 方法检测。 （四）其他自身抗体 1.抗中性粒细胞胞质抗体 （ anineutrophil cytoplasmic antibodies，ANCA） 以人中性粒细胞胞质为靶抗原 ，与临床多种小血管炎性疾病有 关。分胞质型（cANCA）和核周 型（pANCA）。可用ELISA或间接 免疫荧光法测定。 2.抗心磷脂抗体（anti- phospholipid antibody，APLA） 靶抗原是血浆中的磷脂结合蛋白 。APLA包括一组自身抗体，如抗 心磷脂抗体（ACLA），抗磷脂酸 抗体（APAA）和抗磷脂酰丝氨酸 抗体等。 3.抗平滑肌抗体（anti-smooth muscle antibody，ASMA） 是自身免疫性肝炎的血清学标志 性抗体。常用间接免疫荧光分析 检测。 4.抗角蛋白抗体（anti-keratin antibody，AKA） 主要见于类风湿性关节炎患者， 对于早期诊断RA有重要意义。可 用间接免疫荧光法检测。但敏感 性较低。与RF不平行。 5.抗乙酰胆碱受体抗体 是重症肌无力的标志性自身抗体 ，对重症肌无力的诊断有特异性 。可用ELISA