自身抗体在风湿病诊断中的意义ppt课件

自身抗体在风风湿病诊诊断 中的意义义 自身免疫性疾病（autoimmune diseases）是指机体对自身抗原 发生免疫反应而导致自身组织 损害所引起的疾病。 当自身抗原变性、损伤、移位及免疫功能失调 、免疫耐受破坏、原发或继发性免疫缺陷或障碍 和免疫识别紊乱时，会对自身抗原产生抗体， 即自身抗体，从而造成免疫性病理损伤或功能障 碍，引发自身免疫性疾病。 自身免疫性疾病病变累及多个系统，临床症状 个体差异较大，诊断也较困难。但由于此病患者 的血清中均会出现特异或相对特异的自身抗体， 临床医生大多依据自身抗体检查诊 断此类疾病 。 自身抗体对风湿病的诊断具有重要的临床意义 。 2 酶联免疫吸 附法（ ELISA） 1 间接免疫荧 光法（IFA Indirect Fluorescen t Assay ） 3 免疫印迹法 （IB） Westernblot LIA 项项目检验检验 方法 SLE四项项 ANA间接免疫荧光 抗DSDNA抗体间接免疫荧光 抗组蛋白抗体ELISA 抗核小体抗体ELISA ENA系列 抗RNP免疫印迹、 ELISA 抗SM免疫印迹、 ELISA 抗SSA免疫印迹、 ELISA 抗SSB免疫印迹、 ELISA 抗JO-1免疫印迹、 ELISA 抗SCL-70免疫印迹、 ELISA 抗核糖体P蛋白免疫印迹、 ELISA RA三项项 AKA（抗角质蛋白抗体）间接免疫荧光 抗RA33ELISA 抗CCP（抗环瓜氨酸肽抗体）ELISA ANCA四项项 P-ANCA（荧光模型为核周模型）间接免疫荧光 C-ANCA（荧光模型为细 胞质模型）间接免疫荧光 MPO-ANCA（髓过氧化酶抗体）ELISA PR3-ANCA（抗蛋白酶3抗体）ELISA 常 见见 的 自 身 抗 体 及 其 检检 测测 方 法 (1) (2 ) 自身免疫肝炎七项项 ANA间接免疫荧光 抗LMA抗（肝细胞膜抗体）间接免疫荧光 ASMA（抗平滑肌抗体）间接免疫荧光 抗LKM（抗肝肾微粒体抗体）间接免疫荧光 抗SLA（抗可溶性肝抗原抗体）间接免疫荧光 AMA（线粒体抗体）间接免疫荧光 抗LSP（抗肝脏特异性蛋白抗体）间接免疫荧光 RF三项项 RF-IgGELISA RF-IgAELISA RF-IgMELISA 抗磷脂综综合征三项项（ASP）ELISA PT-IgG（凝血素抗体）ELISA PT-IgMELISA 抗2-糖蛋白1抗体ELISA 常 见见 的 自 身 抗 体 及 其 检检 测测 方 法 类风类风湿因子（RF） u 抗人IgG分子Fc片段上抗原决定簇的特异性抗 体,分为IgM、IgG、IgA、IgE型 u RF在RA中的阳性率为70%80，是诊断RA的重 要标准之一 u RF含量与病情的活动性和严重性成正比，持续 高滴度的RF常提示RA病情活动，骨侵蚀发生率 高，常可伴有皮下结节或血管炎等关节外表现 ，提示预后不良 类风湿因子（RF） u RF并非RA独有的特异性抗体，对RA的诊断不具特 异性 SLE 30% SS 70%90% SSc 20%30% MCTD 50%60% 非风湿性疾病（结核） 5%以下的正常人 u RF阳性不等于一定就是RA u RF阴性也不等于一定就不是RA RF常用检测方法 u RF 1：40阳性 乳胶凝集法（测IgM-RF） u RF 256 Iu/ml 双抗夹心ElISA法(测总RF） u RF-IgG 110IU/ml -IgA 18IU/ml ELISA法 -IgM 200IU/ml RA早期诊诊断的系列指标标 敏感性 特异性 抗RA33/36抗体 35.8% 99.6% APF 40%-80% 70%-90% AKA 40%-55% 85%-95% 抗Sa抗体 40%-60% 98.6% 抗CCP 46%-70% 96% 抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP） u 瓜氨酸是RA血清抗聚角蛋白微丝蛋白相关 抗体的主要抗原决定簇 u 对RA诊断具有高度特异性（98%） u 可在RA早期出现 u 预测早期关节炎发展为RA u RA关节侵蚀破坏的早期识别及预测 (二)系统性红斑狼疮（SLE） u 是一种临床表现有多系统损害症状的慢性系统性自身 免疫性疾病，其血清有以抗核抗体为主的大量不同的 自身抗体 u 自身抗体 （1）抗核抗体谱ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗体 （2）抗磷脂抗体 （3）抗组织细胞抗体抗RBC抗体 抗血小板相关 抗体 抗神经元抗体 （4）其它RF、p-ANCA 抗核抗体（ANA） u 定义以细胞核内物质为抗原的抗体 u 临床意义 SLE的筛查抗体: 95%阳性，但滴度与SLE活动性无相关 阴性基本可排除SLE 阳性并非SLE特异 阳性并非风湿病特异: 风湿病（SLE、SSc、SS、RA) 非风湿性疾病（感染、慢肝、肺纤维化、肿瘤） 服用某些药物（INH、苯妥英钠、肼苯达嗪、普鲁卡因酰胺 ） 抗核抗体（ANA） u 方法间接免疫荧光法 u 结果判断: 滴度1：100为阳性 常见核型5种 不同核型的临床意义不同 核膜型 与抗ds-DNA有关， 多见见于SLE，特别别是有肾肾炎者 均质质型 与AHA（抗组组蛋白抗体）、抗 DNA有关，主要见见于SLE、药药 物性狼疮疮 斑点型 与抗ENA有关，应进应进 一步查查特 异性抗体 核仁型 多见见于硬皮病 着丝丝点型 多见见于CREST综综合征 ANA常见五种核型及临床意义 u 核膜型与抗ds-DNA有关， 多见于SLE，特别是有肾炎者 u 均质型与AHA、抗DNA有关， 主要见于SLE、药物性狼疮 u 斑点型与抗ENA有关，应进一步查特异性抗体 u 核仁型多见于硬皮病 u 着丝点型多见于CREST综合征 ANA检测方法 u 间接免疫荧光法 u 印迹法 u ELISA法 抗核抗体谱（ANAs） 定义义：以细细胞核内物质为质为 抗原的抗体 u 抗DNA抗体抗ss-DNA 抗ds-DNA u 抗组组蛋白抗体H1，H2A，H2B，H3，H4 u 抗非组组蛋白抗体抗ENA抗体 抗着丝丝点抗体 u 抗核仁抗体 核小体 u 其它线线粒体、溶酶体、高尔基体等 抗ds-DNA抗体 u 临临床意义义 对对SLE的诊诊断有较较高特异性 滴度与SLE活动动相关，可作为为病情监测监测及疗疗效观观察指标标 与SLE肾损肾损害有关 u 检测检测方法 放免法（Farr)敏感，有利于早期预测预测 检测检测高亲亲合力的抗ds- DNA 间间接免疫荧荧光法(IF)特异 ELISA可检测检测低亲亲合力的抗ds-DNA 有助于中枢狼疮疮的病情监测监测 金标标免疫斑点法 抗ENA抗体 u 抗RNP MCTD100%阳性，且滴度高 双手肿胀，雷诺现象，肌炎，指（趾）端硬化 肾脏保护性抗体？ u 抗Sm SLE的标记性抗体，阳性率30% 有助于早期、不典型及治疗缓解后SLE的回顾性诊断 u 抗SSA 原发性SS：60-75% SLE: 40-50% 与皮损、光过敏、白细胞减少、淋巴结肿大、 血管炎、紫癜相关 可造成新生儿狼疮、婴儿心脏传导阻滞 u 抗SSB原发性SS：40%，较抗SSA更特异 其它CTD伴抗SSB者常伴继发性SS u 抗Scl-70 硬皮病标记性抗体 u 抗Jo-1 多肌炎/皮肌炎标记性抗体 抗核小体抗体（AnuA） u 核小体是细胞染色质中的一种成分，它是由 DNA和组蛋白以特殊的方式相连而组成，在 SLE的诱导和致病中起重要作用 u 对SLE的早期诊断有重要意义 比抗ds-DNA、抗组蛋白抗体更早出现 阳性率：50%90% 特异性98% 27 抗核糖体P抗体 针对磷蛋白P0、P1和P2的抗体。 诊断SLE的高度特异性标记物。 在1015的SLE患者中出现。 抗体水平与疾病的活动度相关。 与狼疮患者严重的行为异常、情感异常有关。 抗组蛋白抗体 n在药物性狼疮的患者中出现率很高（78） (三)皮肌炎/多发性肌炎（PM/DM） u 免疫学检查检查 ANA ENA抗Jo-1阳性 u 其它检查检查 肌酶谱谱 肌酸磷酸激酶（CPK）: MM-心肌和骨骼肌 MB-心肌 BB-平滑肌和脑脑内 乳酸脱氢氢酶（LDH） 谷草转转氨酶（AST） 谷丙转转氨酶（ALT） 碱性磷酸酶（ALP） (四)干燥综合征（SS） u ANA阳性率40%70% u ENA抗SSA抗体阳性率70%96% 抗SSB抗体阳性率50%87% u 抗-Fordrin对对于pSS或sSS的诊诊断有一 定意义义，但特异性和敏感性并不理想。 u RF阳性率75%100% u 高球蛋白血症 u WBC下降 (五)系统性硬化病（SSc） u ANA阳性率50%55% u ENA抗Scl-70阳性率15%40% u 抗着丝丝点抗体阳性 (六)混合性结缔组织病（MCTD） u ANA阳性 u ENA抗RNP高滴度阳性 （七）血管炎 抗中性粒细细胞胞浆浆抗体（ANCA） 荧荧光图谱图谱 分型主要抗原成分 胞浆浆型cANCA 核周型pANCA 蛋白酶3（PR3） 髓过过氧化物酶（MPO） ANCA的临床意义 u c-ANCA和PR3-ANCA 对韦格纳肉芽肿有高度特异性（95%），敏感性80% 与病情活动性相关 常作为判断药物疗效和病情复发的指标 u p-ANCA和MPO-ANCA 不如c-ANCA具有诊断特异性 阳性者血管炎程度较高，其滴度也与病情活动相关 主要与显微镜下多血管炎 坏死性新月体肾小球肾炎 变应性肉芽肿性血管炎 相关 （八）抗磷脂抗体综合征（APS） u 是一种非炎症性自身免疫病，临床上以动/静 脉血栓形成、习惯性流产和血小板减少等症状 为表现，血清中存在抗磷脂抗体 u 血清学检查 抗心磷脂抗体（ ACA ）IgG、IgM、IgA（ELISA） 抗2糖蛋白1抗体（抗2-GP1) 狼疮抗凝物（LA）凝血酶原时间（PT） 激活的部分凝血活 酶时间（APTT） 白陶土凝集时间（ KCT） 蛇毒试验（RVVT ） 抗磷脂抗体 u 抗2-GP1抗体比LA和ACA在APS患者中更具有特异性，是导致 APS的主要抗体 u 抗2-GP1抗体只出现于自身免疫性疾病, 而ACA也可出现于一 些感染性疾病, 如梅毒、AIDS、肝炎、结核等 （九）自身免疫性肝病 抗核抗体（ANA） 抗肝细胞膜抗体(抗LMA) 抗平滑肌抗体（ASMA） 抗肝肾微粒体抗体（抗LKM抗体） 抗肝-胰抗体(抗LP抗体) 抗可溶性肝细胞抗体（抗SLA） 抗线粒体抗体（AMA） u 自身免疫性肝炎（AIH） ANA 抗平滑肌抗体（SMA） 抗肝肾微粒体抗体 u 原发性胆汁性肝硬化（PBC） 抗线粒体抗体（AMA） u 原发性硬化性胆管炎 ANCA阳性 自身免疫性肝病 风湿病的实验室诊断 u 自身抗体特异性 u 非特异的免疫相关指标 u 一般的实验室检查项目 血常规 尿常规 肝功能 肾