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文档简介
临床免疫学检验技术 感染性疾病及其免疫检测 目 录 第一节 概述 第二节 细菌感染性疾病 第三节 真菌感染性疾病 第四节 病毒感染性疾病 第五节 TORCH感染 第六节 寄生虫感染 第七节 其他病原体感染 第一节 概述 重点提示 感染和感染性疾病 机体对病原体入侵的响应模式 感染性疾病的免疫学标志物及其应用 先天性感染、TORCH综合征和性传播疾病 感染和感染性疾病 感染是病原体和人体之间相互作用、相互斗争,导致 机体发生病理改变的过程。 感染性疾病是指病原体破坏机体正常机能后产生的各 种感染症状。 机体对病原体入侵的响应模式 分为固有免疫和适应性免疫。根据机体的反应不同, 免疫应答分为保护性免疫应答和变态反应。根据参与成分 和功能不同,免疫应答分为体液免疫和细胞免疫。 感染性疾病的免疫学标志物及其应用 包括特异性标志物和非特异性标志物。特异性标志物 主要是抗原、抗体和特异性免疫细胞。非特异性标志物指 感染性疾病在内的多种疾病均可引起其升高的标志物。 特异性抗原是直接诊断指标;IgM抗体常作为感 染早期的间接诊断指标;IgG抗体是流行病学调查的指 标,也是机体主要的保护性抗体。 先天性感染、TORCH综合征和性传播疾病 先天性感染:胎儿在母体内受到的感染,又称宫内感 染。 TORCH综合征:TOX、CMV、RV、HSV等病原体引起宫内 感染时,可导致流产、死胎、畸形、发育异常,或出现智 力低下、视听障碍等严重后果。 性传播疾病:可以通过亲密接触传播的传染病。 第二节 细菌感染性疾病 重点提示 非特异性标志物:降钙素原、C-反应蛋白、白细胞介 素6 链球菌感染:ASO 沙门菌感染:肥达试验 结核分枝杆菌感染:抗TB抗体和结核感染T细胞 幽门螺旋杆菌感染:抗Hp抗体、Hp尿素酶 一、非特异性标志物 降钙素原:全身性细菌、真菌和寄生虫感染时,PCT 异常增高,且与感染的严重程度及预后相关,常用ELISA 和CLIA检测。 C-反应蛋白: 细菌感染时CRP10mg/L。可作为细菌 感染与病毒感染的鉴别诊断指标。 白细胞介素-6:IL-6目前主要用于感染性疾病的辅助 诊断,常用ELISA和CLIA检测细胞外IL-6,用FCM检测细胞 内IL-6。 链球菌感染 ASO增高见于A族链球菌感染。常用速率散射免疫比浊、 ELISA等方法检测,其中速率散射免疫比浊试剂可在全自 动生化分析仪上使用。 沙门菌感染 肥达试验 伤寒沙门菌抗O凝集效价1:80、抗H1:160、副伤 寒沙门菌抗H1:80才有诊断意义。 结核分枝杆菌感染 常用检验项目有抗TB抗体和结核感染T细胞。抗 TB抗体常用ELISA和ICGT检测,结核感染T细胞使用T- SPOT TB检测。 抗TB抗体多呈弱阳性反应。T-SPOT TB检测结核 激活的特异性T细胞分泌的IFN-,可避免接种BCG的 影响。二者均不能区分既往感染和现症感染。 幽门螺旋杆菌感染 常用检验项目有抗Hp抗体和Hp尿素酶。抗体常用 ELISA、IBT和ICGT检测。抗原常用ELISA和ICGT检测。 未进行Hp根治的人群,抗体阳性反应考虑Hp感染;进 行过Hp根治的人群,抗体阳性反应需要鉴别既往感染与复 发感染。 Hp抗原检测阳性反应结合临床症状可诊断Hp感染。 第三节 真菌感染性疾病 重点提示 常用检验项目有G试验和GM试验,常用ELISA和CLIA检 测。 G试验在念珠菌、曲霉菌、肺孢子菌、镰刀菌、地霉 菌、组织胞浆菌、毛孢子菌等感染中均可升高。透析、链 球菌败血症、输入蛋白或使用香菇多糖和磺胺类药物可导 致假阳性反应。 GM试验在隐球菌属、曲霉菌属、青霉/拟青霉等感染 中均可升高。哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林-克拉维酸、 食物中的GM抗原、肠道中定值的曲霉释放GM进入血液循环 可导致假阳性反应。 第四节 病毒感染性疾病 重点提示 病毒和病毒感染 肝炎病毒感染 呼吸道病毒感染 轮状病毒感染 EB病毒感染 人类免疫缺陷病毒感染 病毒和病毒感染 病毒侵入机体后可引起病毒清除或病毒感染,取决于 侵入病毒的毒力和数量以及机体的易感性和免疫状态。病 毒侵入机体并在体细胞内增殖的过程称为病毒感染。 肝炎病毒感染-分型与传播途径 典型的肝炎病毒有五种亚型,分别是HAV、HBV、HCV、HDV 和HEV。 传播途径分别是:HAV和HEV通过污染的食物和水, HBV和HCV通过血液、性途径和母婴途径等,HDV在HBV感染 人群中传播。 肝炎病毒感染-HAV感染 常用检验项目是抗-HAV IgM。抗HAV IgM是近期感染 的标志。抗HAV IgG具有保护性,是流行病学调查的指标。 肝炎病毒感染-HBV感染(1) HBV的抗原抗体系统包括HBsAg与抗-HBs、HBeAg与抗- HBe、HBcAg与抗-HBc、PreS1Ag与抗-PreS1、PreS2Ag与抗 -PreS2。 肝炎病毒感染-HBV感染(2) HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc五项俗称乙 肝五项或乙肝两对半。HBsAg、抗-HBs和HBeAg常用双抗夹 心法检测,抗-HBe和抗-HBc常用竞争抑制法检测,抗-HBc IgM常用捕获法检测。 肝炎病毒感染-HBV感染(3) 临床意义(HBsAg) HBV感染后首先出现HBsAg,是早期诊断的指标。 窗口期或S基因突变可出现HBsAg阴性反应。 定量分析HBsAg用于动态评价患者病情和抗病毒治疗 效果有非常重要的价值。 HBsAg转阴并出现抗-HBs是HBV感染治疗的最终目标。 肝炎病毒感染-HBV感染(4) 临床意义(抗-HBs) 抗-HBs是HBV保护性抗体的一种,血清浓度大于 10mIU/ml才有保护作用。 阳性反应见于HBV感染恢复期、既往感染或乙肝疫苗 接种后。 肝炎病毒感染-HBV感染(5) 临床意义(HBeAg) HBeAg一般仅见于HBsAg阳性者,阳性反应表示HBV传 染性较强,患者处于高感染低应答期。 肝炎病毒感染-HBV感染(6) 临床意义(抗-HBe) 抗-HBe可长期存在,无保护作用。HBeAg消失伴抗- HBe出现称为HBeAg的血清转换。 肝炎病毒感染-HBV感染(7) 临床意义(抗-HBc) 抗-HBc IgM是HBV急性感染的早期指标和病毒复制标 志。 抗-HBc IgG是既往感染的标志,现症感染也可出现。 肝炎病毒感染-HCV感染 常用检验项目有抗-HCV和HCV核心抗原,常用 ELISA和CLIA检测。 临床意义:抗-HCV不是保护性抗体,仅作为HCV 感染的标志物之一,不能区分现症感染与既往感染。 HCV核心抗原检测是HCV感染的直接证据,理论上可以 用于HCV现症感染的判断。 肝炎病毒感染-HEV感染 HEV均为急性感染。常用检验项目有抗HEV IgG和 抗HEV IgM,检测方法主要是ELISA。一般认为抗HEV IgM是早期感染的指标。 呼吸道病毒感染(1) 常见病毒:流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞 病毒和冠状病毒。 高危病毒:高致病性禽流感病毒(H5N1)、SARS 冠状病毒。 呼吸道病毒感染(2) 人流感病毒:特异性抗原在感染早期即可呈阳性 反应,具有诊断价值。 禽流感病毒:H5N1被称为高致病性禽流感,IgM 抗体检测用于近期感染的辅助诊断。 呼吸道病毒感染(3) 副流感病毒感染:IgG抗体无保护作用。抗原用 于早期诊断,IgM抗体用于近期感染的辅助诊断。 呼吸道合胞病毒感染:RSV抗原用于早期诊断, IgM抗体用于近期感染的辅助诊断。 呼吸道病毒感染(4) SARS冠状病毒引起SARS,急性期传染性强,潜伏 期传染性低,康复后无传染性。急性期到恢复期出现 IgM抗体或者IgG抗体效价增长4倍以上,提示有近期 感染。 轮状病毒感染 经粪-口途径传播,引起婴幼儿和成人急性胃肠 炎和腹泻。抗原检测用于早期诊断和疫情监测。IgM 抗体用于早期辅助诊断。 EB病毒感染 EBV抗原有EA、VCA、MA、NA和LMP。初次感染后,体 内首先出现抗VCA抗体和抗MA抗体,其后出现抗EA抗体, 恢复期出现抗NA抗体。 IgA抗体与鼻咽癌关系密切,IgM抗体、短期存在的 IgG抗体和异嗜性抗体用于感染传染性单核细胞增多症的 辅助诊断。 人类免疫缺陷病毒感染(1) HIV主要经性接触、血液和母婴传播,分为HIV-1和 HIV-2两个型,临床以HIV-1型最常见。 抗体检测是HIV感染诊断的金标准,RNA和抗原检测可 以发现窗口期感染者,CD4+和CD8+ T淋巴细胞检测可用于 感染者免疫状况评价。 人类免疫缺陷病毒感染(2) 常用检验项目有抗-HIV、抗-HIV抗体确认试验、HIV 抗原抗体联合检测和HIV p24抗原。抗体初筛常用ELISA和 CLIA,抗体确认常用IBT。 人类免疫缺陷病毒感染(3) 初筛试验 初筛试验阳性反应,用原有试剂和另外一种不 同原理(或厂家)的试剂,或另外两种不同原理或 不同厂家的试剂进行复检试验。两种试剂均呈阴性 反应,则报告抗-HIV阴性();如均呈阳性反应 ,或一阴一阳,需送艾滋病确证实验室进行确证试 验。 人类免疫缺陷病毒感染(4) 确认试验 确认试验使用HIV-1/2混合型试剂进行检测, 阴性反应,报告抗-HIV阴性()。阳性反 应,报告抗-HIV阳性();不是阴性反应, 又不满足阳性判断标准,报告抗-HIV不确定( ),建议4周后随访检测,仍然不能确定者,继续 随访到8周。 第五节 TORCH感染 重点提示 弓形虫感染 风疹病毒感染 巨细胞病毒感染 单纯疱疹病毒感染 弓形虫和风疹病毒感染 TOX感染:可引起先天性TOX病。新生儿IgM阳性反应 提示宫内感染。双份血清IgG效价增高4倍以上或IgG低亲 和力,提示近期感染。 RV感染:可导致先天性RV综合征。孕龄期母亲筛查从 未感染过RV的个体,注射疫苗,使其获得免疫力,建议在 怀孕前检测。抗RV IgM作为近期感染的指标,新生儿IgM 阳性反应提示宫内RV感染。抗RV IgG单独阳性反应提示既 往感染,与抗RV IgM同时阳性反应,提示有近期感染。 巨细胞病毒和单纯疱疹病毒感染 CMV感染:若妊娠3个月内发生宫内感染,可引起流产、 死胎、早产、小头、智力低下等。新生儿IgM阳性反应提 示宫内CMV感染。双份血清IgG效价增高4倍以上或IgG低亲 和力,可辅助诊断近期活动性感染。 HSV感染:有HSV-1和HSV-2两个亚型,宫内感染可引 起流产、早产、死胎或畸形。新生儿IgM阳性反应提示宫 内HSV感染。急性期和恢复期双份血清IgG效价增高4倍以 上,提示有HSV近期感染。 第六节 寄生虫感染 重点提示 疟原虫感染:外周血中疟原虫抗原和特异性抗体检测 可辅助诊断疟原虫感染,常用ELISA检测。 血吸虫感染:外周血抗原和抗体检测可辅助诊断血吸 虫感染,常用ELISA和COPT检测。 丝虫感染:抗原和抗体检测用于辅助诊断。 猪囊尾蚴感染:免疫学检测对病原学和影像学不能确 诊的可疑患者有重要意义。 第七节 其他病原体感染 重点提示 梅毒螺旋体感染 支原体感染 衣原体感染 立克次体感染 梅毒螺旋体感染(1) TP感染后机体产生特异性抗体和非特异性抗体两类。 前者检测抗TP抗体,常用ELISA、CLIA和PA检测。后者检 测反应素,常用RPR和TRUST检测。 梅毒螺旋体感染(2) 临床意义 支原体、衣原体和立克次体感染 支原体感染:检测抗原可用于早期诊断。急性期和恢 复期双份血清抗体效价增高4倍以上,提示有支原体近期 感染。 衣原体感染:直接抗原可用于早期诊断。急性期和恢 复期双份血清抗体效价增高4倍以上,提示有衣原体近期 感染。 立克次体感染:立克次体
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