高考生物选修三高考试题汇编.doc

选修三、现代生物科技专题专题1、基因工程（2012全国卷新课标版）40现代生物科技专题（15分）根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（）限制性内切酶切割分子后产生的片段，其末端类型有 和。（）质粒运载体用ecor切割后产生的片段如下：为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的dna除可用ecor切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是 。（）按其来源不同，基因工程中所使用的dna连接酶有两类，即dna连接酶和dna连接酶。（）反转录作用的模板是 ，产物是 。若要在体外获得大量反转录产物，常采用 技术。（）基因工程中除质粒外，和也可作为运载体。（）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是 。【解析】本题着重考查基因工程方面的知识。限制性核酸内切酶可以将dna分子切成两种类型的末端，平末端和黏性末端。两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同。colidna连接酶可以连接黏性末端，dna连接酶可以连接两种末端，反转录是以mrna为模板逆转录先合成单链dna，再合成双链dna，利用技术进行大量扩增。基因工程中可以选用质粒，噬菌体、动植物病毒做载体。当受体细胞是细菌时，为了增大导入的成功率，常用ca+处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。【答案】（）平末端和粘性末端 （）切割产生的dna片段末端与ecor切割产生的相同 （）coli （）mrna 单链（聚合酶链式反应） （）动植物病毒噬菌体的衍生物 （）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源dna）的能力极弱（2012福建卷）32现代生物科技专题肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因ras表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图。请回答：（）进行过程时，需用酶切开载体以插入let-7基因。载体应用rna聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为。（）进行过程时，需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。（）研究发现，let-7基因能影响ras的表达，其影响机理如图。据图分析，可从细胞提取进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中（rasmrna/ras蛋白）含量减少引起的。【答案】（10分）（1）限制性核酸内切酶（或限制） 启动子（2）胰蛋白（3）rna ras蛋白【解析】（1）过程表示基因表达载体的构建，在该过程中需要用限制酶对载体进行切割以便于目的基因的插入（限制性核酸内切酶，简称限制酶，写其他的不得分）；启动子是一段特殊的dna序列，是rna聚合酶结合和识别的位点，rna聚合酶结合到该位点，可驱动转录过程。（2）过程表示动物细胞培养，培养过程中出现接触抑制后可以用胰蛋白酶处理，使之分散成单个的细胞，之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养。（3）判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来进行，从细胞中提取mrna和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链dna片段进行杂交。根据题中信息“肺组织细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因ras表达就增强，引发肺癌”导入let7基因后，肺癌细胞受到抑制，说明ras基因表达减弱，导致细胞中的ras蛋白质含量减少进而导致癌细胞受抑制。【试题点评】本题主要考查选修3中有关基因工程和细胞工程中的知识，涉及的知识点主要有表达载体的构建、目的基因的检测、动物细胞培养等。试题难度不大。（2012山东卷）35（8分）【生物现代生物科技专题】毛角蛋白型中间丝（kif）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转kif基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。（）过程中最常用的运载工具是_ _，所需要的酶是限制酶和_ _。（）在过程中，用_处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5%co2的气体环境中，co2的作用是_ _。（）在过成中，用_处理以获取更多的卵（母）细胞。成熟卵（母）细胞在核移植前需要进行_处理。（）从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是_。在胚胎移植前，通过_技术可获得较多胚胎。【答案】（1）质粒 dna连接酶（2）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） 维持培养基（液）的ph（3）促性腺激素（或促滤泡素，孕马血清） 去核（4）（早期）胚胎培养 胚胎分割【解析】本题综合考查基因工程的基本工具、动物细胞工程和胚胎工程的基础知识，考查识图、获取信息与处理信息的能力。基因工程所用的基本工具有限制性内切酶、dna连接酶和运载体，其中，常用的运载体是质粒，也可用噬菌体衍生物和动植物病毒。在动物细胞工程中，若将动物组织分散成单个细胞，常用胰蛋白酶和胶原蛋白酶来处理；若进行核移植，需先对卵母细胞培养到m中期并做去核处理；动物细胞的培养需要无菌无毒条件，一定的营养条件，血浆血清和o2、co2气体条件，其中的气体co2主要用于维持培养液的ph。在动物胚胎工程中，常用促性腺激素处理雌性个体而使其超数排卵；常采用核移植和早期胚胎培养技术获得重组胚胎，并进一步培育出克隆动物，常采用胚胎分割并移植技术获得更多的优良个体。（2012浙江卷）6天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因b，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因b。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是 ba提取矮牵牛蓝色花的mrna，经逆转录获得互补的dna，再扩增基因bb利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因bc利用dna聚合酶将基因b与质粒连接后导入玫瑰细胞d将基因b直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞【答案】a【命题透析】通过特定的实例考查基因工程的相关概念及操作要领。【思路点拨】控制蓝色色素合成的基因b即为我们所需要的目的基因，可通过逆转录法获得基因b，再进行扩增以增加其数量；基因文库中保存的是各基因片段，提取时无须使用限制性核酸内切酶；为使目的基因在受体细胞中稳定存在且能向下一代遗传，应先在体外使用dna连接酶构建基因表达载体，然后再导入大肠杆菌。(2012天津卷，7) 7.（13分）生物分子间的特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-dna复合体”获得dna片段信息的过程图。据图回答：（1）过程酶作用的部位是 键，此过程只发生在非结合区dna，过程酶作用的部位是 键。（2）、两过程利用了酶的 特性。（3）若将得到的dna片段用于构建重组质粒，需要过程的测序结果与 的识别序列进行对比，已确定选用何种酶。（4）如果复合体中的蛋白质为rna酶聚合，则其识别、结合dna序列位基因的 。（5）以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有 （多选）a.分离得到核糖体，用蛋白酶酶解后提rrna b.用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素c通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位d将抑制成熟基因导入番茄，其mrna与催化成熟酶基因的mrna互补结合，终止后者翻译，延迟果实成熟。【答案】（1）磷酸二酯键，肽键（2）专一（3）限制性dna内切酶 （4）启动子（5）acd【解析】（1）dna酶作用的部位是dna的磷酸二酯键，蛋白酶作用的部位是肽键。（2）过程利用了各种酶催化一种或一类化学反应的特性，即专一性。（3）dna要构建重组质粒，需要用限制性dna内切酶切割，再与质粒重组。（4）rna聚合酶识别和结合在基因的启动子上，才能驱动基因转录。（5）蛋白酶能特异性的酶解蛋白质，分子杂交手段也是利用各物质分子结合的特异性，抑制成熟基因转录出的mrna与催化成熟酶基因的mrna碱基互补结合，也具有特异性，光和色素易溶于有机溶剂，与酒精并不是特异性的溶解，所以选abc。（2012四川卷）2.将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是 ba.发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物b.大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传c.大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等d.生长激素基因在转录时需要解旋酶和dna连接酶【答案】b 【解析】a初级代谢产物是微生物生长必需的，而人的生长激素不是大肠杆菌必需的，帮a错。b可遗传的变异有基因突变、基因重组和染色体变异，大肠杆菌是原核生物，但其变异来源是基因重组。c基因为有遗传效应的dna片段，不含有u。d转录时不需要形成磷酸二酯键，不需要dna连接酶。 （2012江苏卷）32图1表示含有目的基因d的dna片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有msp 、bamh 、mbo 、sma 4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为ccgg、ggatcc、gatc、cccggg。请回答下列问题：（1）图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由 连接。（2）若用限制酶sma 完全切割图1中dna片段，产生的末端是末端，其产物长度为、 。（3）若图1中虚线方框内的碱基对被ta碱基对替换，那么基因d就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的dna片段，用限制酶sma 完全切割，产物中共有种不同dna片段。（4）若将图2中质粒和目的基因d通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因d不能正确表达，其最可能的原因是。【答案】（1）脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖（2）平537bp、790bp、661bp（3）4（4）bamh i 抗生素b同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因d与质粒反向连接【解析】（1）dna单链中相邻两个碱基之间通过“脱氧核糖磷酸脱氧核糖”连接。（2）sma i识别的序列为gggccc，切割后会产生平末端；图1所示的dna分子中含有两个sma i的识别位点，第一个识别位点在左端534bp序列向右三个碱基对的位置；第二个识别位点在右端658bp序列向左三个碱基对的位置，从这两个位点切割后产生的dna片段长度分别为534+3，796-3-3，658+3，即得到的dna片段长度分别为537bp、790bp和661bp。（3）在杂合子体内含有基因d和基因d，基因d的序列中含有两个识别位点，经过smai完全切割会产生537bp、790bp和661bp三种不同长度的片段，基因d的序列中含有一个识别位点，经过切割后会产生1327bp和661bp两种长度的片段，综上，杂合子中分离到该基因的dna片段经过切割后会产生4种不同长度的片段。（4）能够获取目的基因并切开质粒的限制酶有识别序列为ggatcc的bamh i和识别序列为gatc的mbo i，若使用mbo i会同时破坏质粒中的抗生素a抗性基因和抗生素b抗性基因，所以要用bamh i来切割目的基因和质粒，切割后保留了完整的抗生素b抗性基因，便于筛选出含有重组质粒的大肠杆菌。因为目的基因和运载体是用同种限制酶切割的，目的基因两端的末端和质粒切割后的两个末端都能进行互补，可能出现目的基因反向连接在运载体上的情况，导致基因d不能正确表达。（2011年江苏卷）请回答基因工程方面的有关问题：(1)利用pcr技术扩增目的基因，其原理与细胞内dna复制类似（如下图所示）。 图中引物为单链dna片段，它是子链合成延伸的基础。从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物a的dna片段所占的比例为 。在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的dna片段。(2)设计引物是pcr技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。 第1组： ； 第2组： 。(3) pcr反应体系中含有热稳定dna聚合酶，下面的表达式不能正确反映dna聚合酶的 功能，这是因为 。(4)用限制酶ecorv、mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的dna片段长度如下图(1 kb 即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上ecorv、mbol的切割位点。 【答案】：(1)15/16 三(2)引物i和引物局部发生碱基互补配对而失效 引物i自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效(3) dna聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结 合到双链dna片段的引物链上(4)见右图（11年北京卷）t-dna可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的t-dna上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为t1代）。（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除 ，因为后者产生的 会抑制侧芽的生长。（2） 为筛选出已转化的个体，需将t代播种在含 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为t代）。（3） 为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将t代播种在含 的培养基上，获得所需个体。（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。（5）若上述t-dna的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。（6）根据t-dna的已知序列，利用pcr技术可以扩增出被插入的基因片段。其过程是：提取 植株的dna，用限制酶处理后，再用 将获得的dna片段连接成环（如右图）以此为模板，从图中a、b、c、d四种单链dna片断中选取 作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。【答案】：（1）顶芽 生长素（2）（一定浓度的）除草剂（3）（一定浓度的）盐（4）野生型 1（5）降低（6）突变体 dna连接酶 b、c（2011年安徽卷）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前，需用_酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cdna文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_和_之间。(3)采用pcr技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改pcr反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板dna、_和_。(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。【答案】：（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）（2）启动子 终止子 （3）taqdna聚合酶 对干扰素基因特异性的dna引物对 （4）增大细胞贴壁生长的附着面积（11年上海卷）回答下列有关基因工程的问题。57基因工程中使用的限制酶，其特点是。答案: 特异性识别和切割dna下图四种质粒含有e1和e2两种限制酶的识别，apr表示抗青霉素的抗性基因，tcr表示抗四环素的抗性基因。58将两端用e1切开的tcr基因与用e1切开的质粒x1混合连接，连接后获得的质粒类型有。（可多选）ax1 bx2 cx3 dx4答案: abc59若将上图所示x1、x2、x3、x4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有、。答案: 无质粒细胞 含x-3的细胞60如果x1用e1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒x2（tcr基因的长度为1200对碱基）用e2酶切后的片段长度为对碱基。答案: 475061若将外源的tcr基因两端用e2切开，再与用e2切开的x1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含x4的细胞数与含x1的细胞数之比为13，增大dna连接酶用量能否提高上述比值？。原因是。答案: 不能 dna连接酶对dna片段没有选择性或者dna末端相同（11天津理综卷）某致病基因h位于x染色体上，该基因和正常基因h中的某一特定序列bcli酶切后，可产生大小不同的片段（如图1，bp表示碱基对），据此可进行基因诊断。图2为某家庭病的遗传系谱。下列叙述错误的是a h基因特定序列中bcl 1酶切位点的消失是碱基序列改变的结果b ii-1的基因诊断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲c ii-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三个片段，其基因型为xhxhd ii-3的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2.答案：d（11年四川卷）北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是a过程获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序b多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，c过程构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选d应用dna探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达答案：b（2011年浙江卷）ada（酸脱氨酶基因）通过质粒pet28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 a. 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 b. 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 c. 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada d. 每个人的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子答案：c（11年重庆卷）拟南芥是遗传学研究的模式植物，某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（tt），某突变体的种皮为黄色（tt）,下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(tn)功能的流程示意图。（1）与拟南芥t基因的mrna相比，若油菜tn基因的mrna中uga变为，其末端序列成为“”，则tn比多编码个氨基酸（起始密码子位置相同，、为终止密码子）。（）图中应为。若不能在含抗生素的培养基上生长，则原因是 .若的种皮颜色为 ，则说明油菜基因与拟南芥t基因的功能相同。（3）假设该油菜基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个t基因，则中进行减数分裂的细胞在联会时的基因为 ；同时，的叶片卷曲（叶片正常对叶片卷曲为显性，且与种皮性状独立遗传），用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交，其后代中所占比列最小的个体表现为 ；取的茎尖培养成16颗植珠，其性状通常 （填 不变或改变）。（4）所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥 （填是或者不是）同一个物种。【答案】： （1）2（2）重组质粒（重组dna分子） 重组质粒未导入 深褐色（3）tntntt； 黄色正常、黄色卷曲； 不变（4）是（11年广东卷）登革热病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人时将病毒传染给人，可引起病人发热、出血甚至休克。科学家用以下方法控制病毒的传播。（1）将s基因转入蚊子体内，使蚊子的唾液腺细胞大量表达s蛋白，该蛋白可以抑制登革热病毒的复制。为了获得转基因蚊子，需要将携带s基因的载体导入蚊子的 细胞。如果转基因成功，在转基因蚊子体内可检测出 、 和 。（2）科学家获得一种显性突变蚊子（aabb）。a、b基因位于非同源染色体上，只有a或b基因的胚胎致死。若纯合的雄蚊（aabb）与野生型雌蚊（aabb）交配，f1群体中a基因频率是 ，f2群体中a基因频率是 。（3）将s基因分别插入到a、b基因的紧邻位置（如图11），将该纯合的转基因雄蚊释放到野生群体中，群体中蚊子体内病毒的平均数目会逐代 ，原因是 。【答案】：（1）受精卵 s基因、由s基因转录的mrna s蛋白（2）50% 60%（3）减少 s基因表达的s蛋白会抑制登革热病毒复制（11年海南卷）生物选修3：现代生物科技专题回答有关基因工程的问题：（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割dna后，可能产生粘性末端，也可能产生_ _末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_（相同，不同）粘性末端的限制酶。（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是 。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用 处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mrna，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mrna杂交，该杂交技术称为 。为了检测胰岛素基因转录的mrna是否翻译成 _，常用抗原-抗体杂交技术。如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌ti质粒的 _中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过dna重组将目的基因插入植物细胞的_ 上。【答案】： （1）平 相同（2）提供rna聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录 ca2+ dnarna分子杂交胰岛素原（蛋白质） tdna 染色体（11年山东卷）【生物现代生物科技专题】人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从处死的雌鼠_中获取。（2）图中的高血压相关基因作为_，质粒作为_,二者需用_切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有_有关。 （3）子代大鼠如果_和_，即可分别在水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是_、早期胚胎培养和胚胎移植。【答案】：（1）卵巢（2）目的基因 载体 同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶） 限制酶切割位点（3）检测到体内有相关蛋白 出现高血压（4）体外受精（10安徽卷）42008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是a追踪目的基因在细胞内的复制过程b追踪目的基因插入到染色体上的位置c追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布d追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构 答案：c解析：将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质带有绿色荧光，从而可以追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布。故c正确。（10浙江卷）3下列关于基因工程的叙述，错误的是a目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物b限制性核酸内切酶和dna连接酶是两类常用的工具酶c人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性d载体上的抗性基因有利于筛选含重组dna的细胞和促进目的基因的表达答案：d解析：基因工程中目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物；常用的工具酶是限制性核酸内切酶和dna连接酶；人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，只有经过一定的物质激活以后，才有生物活性。载体上的抗性基因主要是有利于筛选含重组dna的细胞，不能促进目的基因的表达。所以d错误。（10广东理基）45钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知 a该生物的基因型是杂合的 b该生物与水母有很近的亲缘关系 c绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达 d改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光答案：c解析：某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光，说明绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达。（10重庆卷）2.下表有关基因表达的选项中，不可能的是基因表达的细胞表达产物a细菌抗虫蛋白基因抗虫棉叶肉细胞细菌抗虫蛋白b人酪氨酸酶基因正常人皮肤细胞人酪氨酸酶c动物胰岛素基因大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛素d兔血红蛋白基因兔成熟红细胞兔血红蛋白答案：d解析：抗虫棉叶肉细胞中存在细菌抗虫蛋白基因，细菌抗虫蛋白基因能够表达产生细菌抗虫蛋白；正常人皮肤细胞中含有人酪氨酸酶基因，人酪氨酸酶基因能够表达产生人酪氨酸酶；大肠杆菌工程菌细胞存在动物胰岛素基因，动物胰岛素基因能够表达产生动物胰岛素；兔成熟红细胞中无细胞核，所以无兔血红蛋白基因不能表达产生兔血红蛋白。此题为容易题，识记理解类。（10上海理综卷）20科学家运用基因工程技术将人胰岛素基因与大肠杆菌的质粒dna分子重组，并且在大肠杆菌体内获得成功表达。图示a处为胰岛素基因与大肠杆菌质粒dna结合的位置，它们彼此能结合的依据是a基因自由组合定律b半保留复制原则c基因分离定律d碱基互补配对原则答案：d解析：本题考查基因工程的相关知识，重组质粒依据的是粘性末端的碱基互补配对原则。（10天津卷）8（30分）水稻种子中70的磷以植酸形式存在。植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，同时，排出的大量磷进入水体易引起水华。（1）磷元素除了形成植酸外，还可以出现在下列_分子或结构中（多选）。a.核糖b.atpc.核糖体d.核膜（2）种植芦苇能有效抑制水华的发生，表明芦苇与引起水华的藻类关系是_。（3）植酸酶可降解植酸，在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的_ 利用率。（4）酵母菌中植酸的活性较高。下图是从不同类型酵母菌的发酵液中提取植酸酶的工艺流程。据图回答：植酸酶_（/）属于分泌蛋白。若植酸酶和的肽链组成不同，其差异体现在_。提纯的植酸酶需做活性条件测定。右图为测定结果。图中的自变量可为_(答一种)；因变量可以通过测定_来表示。（5）为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。据图回答：图中基因组文库_（小于/等于/大于）cdna文库。b过程需要的酶是_；a、c过程中_（可以/不可以）使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。目的基因和除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中_。和_为模板直接进行pcr扩增，该过程中所用酶的显著特点是_。（6）已获得的转植酸酶基因水稻品系植酸含量低，但易感病，下图为选育低植酸抗病水稻品种的过程。图中两对相对性形状分别由两对基因控制，并独立遗传。采用上图育种过程，需从_代开始筛选，经筛选淘汰后，在选留的植株中低植酸抗病纯合体所占的比例是_。选留植株多代自交，经筛选可获得低植酸抗病性状稳定的品性。【答案】：（1）bcd（2）竞争关系（3）营养成分（4）i 氨基酸的种类、数量和排列顺序不同 温度（或ph） 单位时间内植酸的降解量（或植酸降解产物的生成量）（5）大于逆转录酶 可以dna cdna耐高温（6）f2 1/9【解析】：本题考查物质的元素组成、生物的种间关系、蛋白质、酶、基因工程、遗传定律的相关知识，涉及的知识点较多，综合性很强。（1）只有核糖中不含磷元素，atp（磷酸基团）、核糖体（含rna）、核膜（含磷脂）中均含有磷元素。（2）芦苇能抑制水华的发生，表明芦苇与水华的藻类关系是竞争。（3）植酸易同铁、钙等金属离子或蛋白质结合排出体外，是多种动物的抗营养因子，而植酸酶可降解植酸，因此在谷物类饲料中添加植酸酶可提高饲料的营养成分的利用率。（4）分析图可知，植酸酶需要经过两次离心，因此植酸酶属于分泌蛋白。若植酸酶和的肽链组成不同，其差异体现在氨基酸的种类、数量和排列顺序的不同。从图的可看出，自变量可为温度或ph，因变量可以通过测定单位时间内植酸的降解量或植酸降解量产物的生成量来表示。（5）分析获取植酸酶基因的流程图可知，图中基因组文库大于cdna文库。b过程需要的酶应该是逆转录酶，因为a、c过程都能获得含目的基因的菌株，所以可以使用同一种探针进行筛选。目的基因和除从构建的文库中分离外，还可以分别利用图中dna和cdna为模板直接进行pcr扩增，该过程中所用酶的显著特点是耐高温。（6）根据上图育种过程，所需性状在f2代中才开始出现，所以应从f2代开始筛选。从图中可以看出，低植酸抗病是双显性（在f2中占9/16），经筛选淘汰后，在选留的植株中纯合体所占的比例是1/9。（10福建卷）32.（10分） 转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有pst、sma、ecor、apa等四种限制酶切割位点。请回答： （1）构建含抗病基因的表达载体a时，应选用限制酶 ，对 进行切割。（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体a中含有 ，作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。【答案】：（1）pst、ecor 含抗病基因的dna 、质粒（2）抗卡那霉素基因（3）全能性 脱分化、再分化【解析】：本题考查基因工程的有关知识。（1）从图可看出，只有pst、ecor两种酶能保持抗病基因结构的完整性，所以构建含抗病基因的表达载体a时，应选用限制酶pst、ecor两种酶，对抗病基因的dna和质粒进行切割。（2）卡那霉素能抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体a中含有抗卡那霉素基因，以此作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有全能性，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的脱分化和再分化。（10重庆卷）31.（16分）小鼠基因敲除技术获得2007年诺贝尔奖，该技术采用基因工程、细胞工程、杂交等手段使小鼠体内的某一基因失去功能，以研究基因在生物个体发育和病理过程中的作用。例如现有基因型为bb的小鼠，要敲除基因b，可先用体外合成的突变基因b取代正常基因b，使bb细胞改变为bb细胞，最终培育成为基因敲除小鼠。（1）基因敲除过程中外源基因是否导入受体细胞，可利用重组质粒上的 检测。如果被敲除的是小鼠抑癌基因，则可能导致细胞内的 被激活，使小鼠细胞发生癌变。（2）通过基因敲除，得到一只aabb小鼠。假设棕毛基因a、白毛基因a、褐齿基因b和黄齿基因b均位于常染色体上，现要得到白毛黄齿新类型小鼠，用来与aabb小鼠杂交的纯合亲本的基因型是 ，杂交子代的基因型是 。让f1代中双杂合基因型的雌雄小鼠相互交配，子代中带有b基因个体的概率是 。不带b基因个体的概率是 。（3）在上述f1代中只考虑齿色这对性状，假设这对性状的遗传属x染色体伴性遗传，则表现黄齿个体的性别是 ，这一代中具有这种性别的个体基因是 。【答案】：（1）标记基因；原癌基因（2）aabb；aabb；12/16（3/4）；4/16（1/4）（3）雄性（）；xby、xby【解析】：（1）作为质粒的一个条件之一就是要具有标记基因，以检测外源基因是否导入受体细胞。癌变的产生就是原癌基因由抑制态变激活态。（2）根据题意aabb基因敲除小鼠的表现型是棕毛褐齿，现要得到白毛黄齿新类型小鼠（aabb），应选取用与aabb小鼠杂交的纯合亲本的基因型是，用图解表示：亲本：aabbx子代：aabb则此亲本必含有a基因，而又是纯合的基因型只能为aabb或aabb，而aabb是要培育的新品种不可能有，所以只用选用基因型为aabb的亲本，亲本：aabbxaabb子一代：1/2aabb 1/2 aabbf1代中双杂合基因型aabb的雌雄小鼠相互交配即自交,由于是常染色体遗传,即bb自交后代的基因型及比例为:1/4bb、2/4bb、1/4bb，带有b基因个体的概率是3/4，不带b基因个体的概率是1/4。（只考虑b和b这一对基因的计算，用基因分离定律）也可两对同时计算用自由组合定律，aabb自交得1/4aax1/4bb、1/4aax2/4bb、1/4aax/4bb、2/4aax1/4bb、2/4aax2/4bb、24aax/4bb、1/4aax1/4bb、1/4aax2/4bb、1/4aax/4bb、可得带有b基因个体的概率是12/16，不带b基因个体的概率是4/16。（3）假设齿色性状的遗传属x染色体伴性遗传，则亲本都为褐齿，基因型为xbxb和xy，则f1代的基因型为xbxb、xx、xb、xby，其中xby为黄齿是雄性个体，雄性个体基因还有xb。此题考查学生对两大遗传定律的理解与掌握情况及基因工程的有关知识。（10江苏卷）34（7分）苏云金杆菌（bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图（为抗氨苄青霉素基因），据图回答下列问题。（1）将图中的dna用hind、bamh完全酶切后，反应管中有 种dna片段。（2）图中表示 hind与bamh酶切、dna连接酶连接的过程，此过程可获得 种重组质粒；如果换用bst l与bamh酶切，目的基因与质粒连接后可获得 种重组质粒。 （3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的 。（4）图中的ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的tdna导人植物细胞，并防止植物细胞中 对tdna的降解。（5）已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞 。 （6）生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的 基因频率的增长速率。【答案】：（1）4 （2）2 1 （3）复制 （4）dna水解酶（5）表面无相应的特异性受体（6）抗性【解析】：本题考查基因工程的相关知识。（1）由于上述两种酶形成的末端不一样，所以被两种不同的限制酶切割之后所形成的片段有aa、ab、ba、bb四种切法形成的四种片段。（a表示hind，b表示bamh）（2）同时被两种限制酶切割有两种不同的目的基因，即ab和ba，所以重组质粒有两种。bst l与bamh酶切割的末端一样，所以同时用这两种限制酶切割只能形成一种目的基因，所以只能形成一种重组质粒。（3）质粒要进行复制才能更多的表达出产物，所以重组之后要能复制。（4）酶具有专一性，对tdna的降解酶为dna水解酶。（5）生物的细胞表面的受体具有特异性，人类肠上皮细胞没有昆虫肠上皮细胞表面的特异受体。所以该毒素蛋白对人类的风险相对较小（6）自然选择是普遍存在的，纯种种植自然选择会使害虫抗性基因频率快速增长。所以混合种植降低害虫的抗性基因频率的增长速率。（10上海卷）37.（9分）人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。（1）目的基因的获取方法通常包括_和_。（2）上图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改编的碱基对，这种变异被称为_。（3）已知限制酶e识别序列为ccgg,若用限制酶e分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域（见上图），那么正常人的会被切成_个片段，而患者的则被切割成长度为_对碱基和_对碱基的两种片段。（4）如果某人的p53基因部分区域经限制酶e完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是_（以p+表示正常基因，pn表示异常基因）。【答案】：（1）从细胞中分离 通过化学方法人工合成（2）见下图 基因碱基对的替换（基因突变）（3）3 460 220（4）【解析】：本题主要考查基因工程相关知识。（1）目的基因的获取方法有直接分离和化学方法人工合成两种；（2）仔细对比正常人与患者的基因序列可知是cg碱基对变为了ta碱基对，这种变化属于基因突变；（3）正常人p53基因终于两个限制酶e的识别序列，完全切割后可产生三个片段，患者p53基因中有一个限制酶e的识别序列发生突变，且突变点位于识别位点内，这样患者就只有一个限制酶e的识别序列，切割后产生两个片段，分别为290+170=460对碱基，220对碱基；（4）正常人经限制酶e完全切割后产生三个片段，290对碱基、170对碱基和220对碱基，患者产生两个片段460对碱基和220对碱基，则该人的基因型应为p+p-。（09安徽卷）2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是 ca追踪目的基因在细胞内的复制过程b追踪目的基因插入到染色体上的位置c追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布d追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构 （09浙江卷）下列关于基因工程的叙述，错误的是 da目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物b限制性核酸内切酶和dna连接酶是两类常用的工具酶c人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性d载体上的抗性基因有利于筛选含重组dna的细胞