微生物学实验报告__考试报告.docx

实验温度：18 湿度：32% 实验时间：2012年11月13日 实验考查：粪便和脓汁的细菌学检验【主要材料与试剂】脓汁、粪便标本各1份、ss平板、血平板、清洁载玻片、酒精灯、接种环、火柴、显微镜、擦镜纸、结晶紫溶液、nahco3溶液、碱性碘液、丙酮酒精、稀释碱性复红、触酶试剂、氧化酶试剂、optochin纸片、无菌生理盐水、kia、miu、志贺菌诊断血清等。【检验程序】（一）脓汁标本（p54）1.肉眼观察脓汁性状、颜色、气味2.直接涂片革兰染色镜检3.接种血平板，1824h 35分离培养，观察菌落形态，涂片、革兰染色镜检：4.生化试验1）g+c触酶：触酶阳性，葡萄c血浆凝固酶试验：阳性为金葡，阴性为表葡触酶阴性，链coptochin敏感试验、胆汁溶菌试验：阳性为肺链，阴性为甲链。2）g-b氧化酶氧化酶阳性，为非发酵菌，o-f（o+）铜绿水溶性色素绿脓b氧化酶阴性，肠道杆菌kia、miu初步鉴定血清学试验最终鉴定（二）粪便标本（s18）1.接种ss平板，1824h 35分离培养，观察菌落形态2.取可疑菌落（无色、透明）涂片、革兰染色镜检：3.g-b氧化酶氧化酶阳性，为非发酵菌，o-f（o+）,铜绿水溶性色素绿脓b氧化酶阴性，肠道杆菌kia、miu初步鉴定血清学试验最终鉴定4.kia、miu试验 5.血清学试验：【实验记录与结果】（一）脓汁标本（p54）1、脓汁性状、颜色、气味：灰白色、无味、粘稠液体。标本号p54 赵富海 2009221792 2012.11.132、观察菌落形态：血平板上形成直径为0.51.5mm，灰白色、半透明、表面光滑草绿色溶血环的扁平菌落。3.涂片、革兰染色镜检：直接g染色镜检，g+球菌圆形 血平板g染色镜检：g+球菌圆形 或卵圆形、成双或链状排列 或卵圆形、成双或链状排列 4.生化试验触酶（-） optochin敏感试验（-） 胆汁溶菌试验（-）（二）粪便标本（s18） 1.观察菌落形态：（ss平板）标本号s18 赵富海 2009221792 2012.11.13形成有无色、半透明、圆形、湿润、光滑、突起、大小为12mm的菌落。2.取无色、半透明菌落革兰染色镜检： zfh zfh g染色镜检：g-杆菌、散在分布 3.生化试验：氧化酶阴性4.kia、miu试验结果： kia miu观察项目斜面底层产气h2s动力吲哚脲酶结果 ka-5.血清学试验结果：【初步诊断】（一）脓汁标本（p54）鉴定结果：p54号脓汁标本直接涂片革兰染色观察，再经过血平板分离培养，观察菌落特征，革兰染色，生化反应，鉴定p54号脓汁标本中的细菌为：甲型溶血性链球菌。（二）粪便标本（s18）鉴定结果：s18号粪便标本经ss平板分离培养，观察菌落特征，取可疑菌落（无色）、革兰染色，生化鉴定、血清学试验，鉴定s18号粪便标本中分离出 志贺菌【讨论】1.粪便标本的采集：腹泻患者用抗生素前采集脓血粘液或稀便2-3或1-2ml或肛拭无菌试管甘油盐水保存液增菌培养基。食物中毒者采集可疑食物、呕吐物、胃液、粪便等。消化道溃疡取胃窦和胃体粘膜活检标本各一块置无菌ns立即送检，或将标本放于运送培养基，4保存，24h内送检.2.常见肠道感染的病原体：以肠毒素为主的病原菌：志贺菌（福氏、宋氏）、大肠埃希菌（etec、ehec、eaggec）、金葡、艰难梭菌、产气荚膜梭菌、霍乱弧菌。侵袭性为主的病原菌：沙门菌、大肠埃希菌（epec、eiec）、志贺菌（鲍氏志贺）、弯曲菌、副溶血弧菌、小肠结肠炎耶尔森菌、结核分枝b、白假丝酵母。病毒：轮状v、echov、norwo1kv、hav、hev、adenov3.脓汁标本的采集：封闭性脓肿：消毒皮肤粘膜注射器无菌抽取脓液灭菌试管 一般细菌培养厌氧送检 供厌氧菌培养开放性脓肿或脓性分泌物：用ns冲洗表面两支无菌棉拭取脓液或分泌物直接涂片染色镜检分离培养（疑为淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌的标本应注意保暖，最好床旁接种）疑为放线菌感染标本：应选取脓汁中的“硫磺样颗粒”置无菌试管送检。也可用无菌纱布条塞入瘘管，次日拔出送检。大面积烧伤感染：无菌棉拭取多部位创面脓汁分泌物无菌试管送检。胸腔、腹腔、心包腔和滑膜腔感染标本：应在临床医生指导下，严格无菌操作，用注射器抽吸脓液或分泌物。4.常见引起化脓性感染的病原体：外伤性创伤感染葡萄c、链c多见，放线菌、tb、大肠b、绿脓b常见，且易发生混合感染。深部创伤极易由破伤风梭菌和产气荚膜梭菌引起厌氧感染。烧伤感染以绿脓b等g-b为主，其次为gc，也可混合感染。急性化脓性骨关节炎、慢性骨髓炎tb、葡萄c、链c。皮下软组织化脓性炎症（放线菌病）放线菌5.脓汁标本先观察性状、颜色、气味，再直接涂片革兰染色观察：g+球菌圆形或卵圆形、成双或链状排列，经血平板分离培养形成直径为0.51.5mm，灰白色、半透明、表面光滑扁平菌落，革兰染色（g+球菌圆形或卵圆形、成双或链状排列），生化鉴定（触酶-、optochin敏感试验-、胆汁溶菌试验-），鉴定p54脓汁标本中细菌为甲型溶血性链球菌。6.粪便标本经ss平板分离培养形成无色、半透明、圆形、湿润、光滑、突起、大小为12mm菌落，取可疑菌落（无色）、革兰染色