《分子荧光分析法》PPT课件.ppt

编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 仪器分析实验仪器分析实验 实验10 分子荧光分析法 MMolecularolecular F Fluorimetryluorimetry For short:For short: M-F M-F 厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析( (含实验含实验) ) 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 一、分子荧光分析法简介一、分子荧光分析法简介 (对光的吸收) 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 发生激发 态反应 分子内的激发和衰变过程 1.1 1.1 荧光的产生荧光的产生 激发态能量的跃迁与转 化的形式和速率： A1,A2 吸收: 10-15 s VR 振动松弛： 10-12 s ic 内转化： 10-11 s isc 系间窜越： 10-6 10-2 s F 荧光： 10-9 10-6 s P 磷光： 10-6 100 s 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 激发光谱发射光谱 1.2 1.2 荧光光谱荧光光谱 任何荧光化合物，都具有两种特征的光谱：激发光谱和发 射光谱。 组成、结构与衍化信息 物质的化学结构 环境与介质条件 与其它溶质的相互作用 反应动力学 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 1.3 1.3 荧光定量荧光定量 F = KI0fC I0：光源强度； f：荧光量子产率； C：荧光体浓度） 1）影响相对荧光强度的因素有哪些？ 2）试比较荧光法与紫外-可见分光光度法的分析性能。 ? 问题： （注意：在一定浓度范围内适用） 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 1.4 1.4 荧光仪的基本构造荧光仪的基本构造 ？问题：荧光光度计与紫外-可见分光光度计在光路设置 上有什么不同？为什么？ 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 1.5 1.5 分子荧光分析法的应用简介分子荧光分析法的应用简介 常规分析应用： 定性分析：f；ex；em；峰形等 定量检测： F = KI0fC 其它（略） 高端生化研究： 分子相互作用研究； 代谢动力学跟踪； 显微成像（物理迁移与化学衍化的原位“显迹”） 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 二、维生素二、维生素B6B6注射液中维生素注射液中维生素B6B6含量的含量的 荧光法测定荧光法测定 2.1 实验原理 在近中性的水溶液中 有较强的荧光发射: （323nm/392nm 附近） 在碱性介质中不稳定 易发生光降解 VB6 的化学结构 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 2.2 2.2 实验流程实验流程 、试液配制 、VB6的荧光光谱的绘 制 、标准工作曲线的制 作 、未知液的配制 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 2.3 2.3 注意事项：注意事项： 注射液的移取与稀 释 系列标液的测定顺 序 即放即测，防光降 解 荧光仪的开关机顺 序 编写教师：郑洪副教授编写日期：2006年9月 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 2.4 2.4 数据处理数据