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文档简介

蛋白质的盐析作用 实验目的 n掌握盐析的原理和方法 n熟练使用基本仪器 实验原理 n用中性盐类使蛋白质从溶液中沉淀析出的过程 称为蛋白质的盐析作用. n蛋白质是亲水胶体,当加入适量的轻金属盐类时 蛋白质分子即处于高渗透压的溶液中,使蛋白质 外周水化膜被破坏，同时盐类的离子中和了蛋 白质分子的电荷,结果蛋白质的胶体稳定性遭到 破坏而沉淀;但此时蛋白质分子内部的结构没有 改变,仍然保持其天然蛋白质的性质,即可复溶解 于原来的溶剂中. n沉淀蛋白质所需盐类浓度视蛋白质种类而异.呈 粗分散系者(如球蛋白)较细分散系者(如清蛋白) 容易盐析. 实验操作 n取小试管或离心管加蛋清稀释液1ml及饱和（NH4）SO4 （74.5%）溶液1ml混和后静置10分钟，球蛋白即沉淀 析出，离心十分钟（2000转/分）。 n将离心后的上清液（含有清蛋白），吸出1ml加入另一 支小试管，逐渐加入(NH4)SO4结晶粉末，每加一次需用 细玻璃棒充分搅拌，直至粉末不再溶解而达到饱和状态 为止，静置约十分钟，离心十分钟，倾去上清液，此时 的沉淀即为清蛋白。 n向上述两个离心管的沉淀内各加水1ml，用细玻璃棒搅 拌沉淀，观察沉淀能否复溶，此得出什么结论。 注意事项 n加(NH4)SO4沉淀清蛋白时，一定加入适量 ，倘若太过量则清蛋白不能沉淀，而呈乳 胶状物
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