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目的对染色法、培养基和试剂配制方法作出明确规定,为检测结果的准确性提供最基本的保证。2 范围适用于微生物检验。3 职责 3.1微检人员负责培养基、试剂配制。3.2微检人员掌握微生物的染色方法。4 培养基和试剂配制名称、用途名称用途4.1 革兰氏染色液微生物染色4.2 营养琼脂细菌培养和细菌总数测定4.3 孟加拉红培养基霉菌、酵母菌计数4.4 乳糖胆盐发酵管大肠菌群,粪大肠菌群及大肠杆菌的测定4.5 乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用4.6 三糖铁琼脂肠杆菌科细菌的生化反应筛选4.7 伊红美兰琼脂分离肠道致病菌。4.8 缓冲蛋白胨水沙门氏菌检验中的前增菌4.9 四硫酸钠煌(TTB)绿增菌液沙门氏菌检验中的前增菌4.10 GN增菌液志贺氏菌的前增菌4.11 亚硒酸盐胱氨酸增菌液沙门氏菌选择性增菌培养4.12 SS琼脂沙门氏菌、志贺氏菌的分离4.13 V-P半固体琼脂细菌检验的V-P试验4.14 7.5%氯化钠肉汤金黄色葡萄球菌的增菌培养4.15 Baird-Parker培养基金黄色葡萄球菌的检验4.16 酸性肉汤酸性罐头食品商业无菌检验4.17 尿素琼脂基础细菌检验中的尿素酶试验4.18 赖氨酸脱羧酶培养基细菌检验中的赖氨酸脱羧酶试验4.19 吲哚培养基细菌靛基质试验,亦称色氨酸肉汤4.20 硝酸盐氰化钾培养基细菌检验中的硝酸盐还原试验和氰化钾试验4.21 生理盐水检样的溶解与稀释5 具体内容5.1革兰氏染色法5.1.1革兰氏染色液5.1.1.1结晶紫染色液成份: 结晶紫 1.0g95%乙醇 20.0ml1%草酸铵水溶液 80.0ml5.1.1.2革兰氏碘液成份: 碘 1.0g碘化钾 2.0g蒸馏水 300.0ml5.1.1.3 95%乙醇5.1.1.4沙黄复染液 成份: 沙黄 0.25g95%乙醇 10.0ml 蒸馏水 90.0ml 5.1.2染色法5.1.2.1将涂片在火焰上固定。5.1.2.2初染:滴加结晶紫染色液,染1min,水洗。5.1.2.3媒染:滴加革兰氏碘液,作用1 min,水洗。5.1.2.4脱色:滴加95%乙醇脱色,水洗;或将乙醇滴满整个涂片,立即倾去,再用乙醇滴满整个涂片,脱色10s,水洗。5.1.2.5复染:滴加沙黄复染液,染1min,水洗,待干,镜检。5.1.2.6结果判定:革兰氏阳性菌呈紫色;革兰氏阴性菌呈红色。5.2一般培养基和专用培养基5.2.1营养琼脂5.2.1.1用途:用于一般细菌培养及细菌总数测定。5.2.2.2成份(g/L): 蛋白胨 10.0 牛肉粉 3.0 氯化钠 5.0 琼脂 15.0 PH7.30.15.2.2.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热煮沸至完全溶解,分装,12115 min高压灭菌备用。5.2.2.4注意事项:密封保存于阴凉干燥处。5.2.2孟加拉红培养基5.2.2.1用途:用于粮食、食品、饮料中霉菌、酵母菌计数。5.2.2.2成份(g/L): 蛋白胨 5.0 葡萄糖 10.0 磷酸二氢钾 1.0 硫酸镁 0.5 孟加拉红 0.03 氯霉菌 0.1 琼脂 15.05.2.2.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热煮沸至完全溶解,分装,12120 min高压灭菌备用。5.2.2.4注意事项:保存于阴凉干燥处;密封、避光。5.2.3乳糖胆盐发酵管5.2.3.1用途:用于大肠菌群,粪大肠菌群及大肠杆菌的测定。5.2.3.2成份(g/L): 蛋白胨 20.0 胆盐 3.0 乳糖 5.0 溴甲酚紫 0.01PH7.40.15.2.3.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热煮沸至完全溶解,分装于有倒立发酵管的试管中,11515min高压灭菌,双料乳糖胆盐发酵管除纯水外,其它成份加倍。5.2.3.4注意事项:密封保存于阴凉干燥处。5.2.4乳糖复发酵管5.2.4.1用途:供大肠菌群证实试验用。5.2.4.2成份(g/L): 蛋白胨 20.0 乳糖 10.0 溴甲酚紫 0.01PH7.40.15.2.4.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热煮沸至完全溶解,分装10ml于有倒立发酵管的试管中,11515min高压灭菌备用。5.2.4.4注意事项:密封保存于阴凉干燥处。5.2.5三糖铁琼脂5.2.5.1用途:主要用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选。5.2.5.2成份(g/L): 蛋白胨 20.0 酚红 0.025 牛肉膏 3.0 氯化钠 5.0 乳糖 10.0 硫酸亚铁铵(6H2O) 0.5 蔗糖 10.0 硫代硫酸钠 0.5 琼脂 12.0 葡萄糖 1.0PH7.40.15.2.5.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热煮沸至溶解,分装试管,11515min高压灭菌制成高层斜面备用。5.2.5.4注意事项:保存于阴凉干燥处,密封、避光。5.2.6伊红美兰琼脂5.2.6.1用途:弱选择性培养基,用于分离肠道致病菌。5.2.6.2成份(g/L): 蛋白胨 10.0 乳糖 10.0 磷酸氢二钾 2.0 琼脂 15.0 伊红 0.4 美兰 0.065PH7.10.25.2.6.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热溶解,12115min高压灭菌,冷至55倾注平板备用。5.2.6.4注意事项:保存于阴凉干燥处,密封、避光。实施纠正措施5.2.7缓冲蛋白胨水5.2.7.1用途:用于沙门氏菌检验中的前增菌。5.2.7.2成份(g/L): 蛋白胨 10.0 氯化钠 5.0 Na2HPO4(12H2O) 9.0 KH2PO4 1.5最终PH7.20.15.2.7.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热煮沸至完全溶解,分装,每瓶225ml,12115min高压灭菌备用。5.2.7.4注意事项:密封保存于阴凉干燥处。5.2.8四硫酸钠煌(TTB)绿增菌液5.2.8.1用途:用于沙门氏菌检验中前增菌。5.2.8.2成份(g/L):A基础培养基多胨或胨 5.0g胆盐 1.0g碳酸钙 10.0g硫代硫酸钠 30.0g蒸馏水 1000mlB碘溶液碘 5.0g碘化钾 6.0g蒸馏水 20ml5.2.8.3制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100 ml。分装时应随时震荡,使其中的碳酸钙混匀。121高压灭菌15min备用,临用时每100 ml基础培养基中加入碘溶液2 ml、0.1%煌绿溶液1 ml。5.2.8.4注意事项:密封保存于阴凉干燥处。5.2.9GN增菌液 5.2.9.1用途:用于志贺氏菌的前增菌液5.2.9.2成份(g/L):胰蛋白胨 20.0 g葡萄糖 1.0 g甘露醇 2.0 g柠檬酸钠 5.0 g去氧胆酸钠 0.5 g磷酸氢二钾 4.0 g磷酸二氢钾 1.5 g氯化钠 5.0 g蒸馏水 1000ml5.2.9.3制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH。分装每瓶225 ml,115高压灭菌15min。5.2.9.4注意事项:密封保存于阴凉干燥处。5.2.10亚硒酸盐胱氨酸增菌液5.2.10.1用途:用于沙门氏菌选择性增菌培养。5.2.10.2成份(g/L): 蛋白胨 5.0 乳糖 4.0 磷酸氢二钠 10.0 亚硒酸氢钠 4.0 L-胱氨酸 0.1PH7.00.15.2.10.3制法: 称取各成份溶于灭菌纯水中,在无菌容器中溶解,分装,每瓶100ml,备用。5.2.10.4注意事项:于4冰箱中密封保存。5.2.11 SS琼脂5.2.11.1用途:用于沙门氏菌、志贺氏菌的分离。5.2.11.2成份(g/L): 蛋白胨 5.0 牛肉粉 5.0 乳糖 10.0 三号胆盐 3.5 柠檬酸铁 10.0 柠檬酸钠 8.5 中性红 0.025 硫代硫酸钠 8.5 琼脂 15.0 煌绿 0.00033PH7.00.15.2.11.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热煮沸溶解,冷至55,倾注平板备用。5.2.11.4注意事项:A保存于阴凉干燥处,密封、避光。 B勿高压灭菌。5.2.12V-P半固体琼脂5.2.12.1用途:用于细菌检验的V-P试验。5.2.12.2成份(g/L): 蛋白胨 12.0 酵母膏 1.0 葡萄糖 10.0 氯化钠 5.0 琼脂 3.0 PH7.30.15.2.12.3制法: 称取各成份于纯水中,加热煮沸至溶解,分装试管,每管11.5ml,12110min高压灭菌,立即取出冷却备用。5.2.12.4配制试剂:甲液: -萘酚 6.0g 无水乙醇溶液 100.0ml乙液: 氢氧化钾 40.0g 肌酸 0.3g 蒸馏水 100.0ml先将氢氧化钾溶于水中,再加入肌酸。甲液和乙液保存于4冰箱内,可使用2个月。5.2.12.5试验方法:挑取琼脂培养物接种V-P培养基中,于361培养24h2h,将甲液0.2ml(约6滴)加入试管中,摇混均匀,再加入乙酸0.1ml(约3滴),再摇混均匀。阳性反应立即或15min内呈现红色,阴性反应为铜色。阴性结果在1h后再做一次检查。有些试管在数小时后红色会逐渐消失,此仍作阳性反应。5.2.12.6注意事项:保存于阴凉干燥处,密封、避光。5.2.13 7.5%氯化钠肉汤5.2.13.1用途:用于金黄色葡萄球菌的增菌培养。5.2.13.2成份(g/L): 蛋白胨 10.0 牛肉粉 3.0 氯化钠 75.0 PH7.40.15.2.13.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热煮沸至完全溶解,分装,每瓶50ml,12115min高压灭菌备用。5.2.13.4注意事项:密封保存于阴凉干燥处。5.2.14 Baird-Parker培养基5.2.14.1用途:用于食品中金黄色葡萄球菌的检验。5.2.14.2成份(g/L): 胰蛋白胨 10.0 丙酮酸钠 10.0 牛肉膏 5.0 甘氨酸 12.0 酵母膏 1.0 氯化锂(6H2O) 5.0 琼脂 20.0 PH7.40.15.2.14.3用法: 称取各成份于纯水中,加热煮沸至溶解,分装每瓶95ml,12115min高压灭菌,冷至50时,每95ml加入5ml亚碲酸钾卵黄增菌液。5.2.14.4注意事项:A保存于阴凉干燥处,密封、避光。B平板冰箱贮存不超过48小时。5.2.15酸性肉汤5.2.15.1用途:用于酸性罐头食品商业无菌检验。5.2.15.2成份(g/L): 多价蛋白胨 5.0 酵母粉 5.0 葡萄糖 5.0 磷酸氢二钾 4.0 PH5.00.2 5.2.15.3制法: 称取各成份溶于纯水中,加热煮沸至完全溶解,分装,12120 min高压灭菌备用。5.2.15.4注意事项:保存于阴凉干燥处;密封、避光。5.3生化试验培养基和试剂5.3.1尿素琼脂基础 5.3.1.1用途:用于细菌检验中的尿素酶试验。5.3.1.2成份(g/L): 蛋白胨 1.0 葡萄糖 1.0 氯化钠 5.0 磷酸二氢钾 2.0 酚红 0.012 琼脂 15.0 PH6.80.15.3.1.3制法: 称取各成份于纯水中,加热煮沸至完全溶解,12115min高压灭菌,冷至55以无菌技术每95ml溶液加入40%尿素水溶液5ml,混匀后制成斜面备用。5.3.1.4试验方法:挑取琼脂培养物接种,在361培养24h,观察结果。尿素酶阳性者出于产碱而使培养基变为红色。5.3.1.5注意事项:保存于阴凉干燥处;密封、避光。5.3.2赖氨酸脱羧酶培养基5.3.2.1用途:用于细菌检验中的赖氨酸脱羧酶试验。5.3.2.2成份(g/L): 酵母膏 3.0 葡萄糖 1.0 L-赖氨酸 5.0 溴甲酚紫 0.016 PH6.70.15.3.2.3制法: 称取各成份于纯水中,加热煮沸至完全溶解,分装试管,每管1-1.5ml,12115min高压灭菌备用。5.3.2.4试验方法:从琼脂斜面上挑取琼脂培养物接种,在361培养18-24h,观察结果。赖氨酸脱羧酶阳性者出于产碱而使培养基变为紫色。阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变黄色。对照管应为黄色。5.3.2.5注意事项:保存于阴凉干燥处;密封、避光。5.3.3吲哚培养基5.3.3.1用途:用于细菌靛基质试验,亦称色氨酸肉汤。5.3.3.2成份(g/L): 蛋白胨 10.0 氯化钠 5.0 DL-色氨酸 1.0 PH7.40.15.3.3.3用法: 称取各成份于纯水中,加热煮沸至完全溶解,12115min高压灭菌备用。5.3.3.4配制柯凡克试剂:对二甲氨基苯甲醛 10.0g戊醇 150.0ml浓盐酸 50.0ml将色泽鲜明干燥的对二甲氨基苯甲醛溶于戊醇中,缓慢搅拌加入盐酸,加热至60,呈深黄色,静置6-7h,变成黄色即可使用。试剂宜少量配制,不用时保存于4冰箱内。久存后试液变成褐色不可使用。5.3.3.5试验方法:挑取琼脂培养物接种,在361培养24h,滴加柯凡克试剂0.1ml。阳性反应出现红色环;阴性反应为黄色环。5.3.3.6注意事项:保存于阴凉干燥处;密封、避光。5.3.4硝酸盐氰化钾培养基5.3.4.1用途:用于细菌检验中的硝酸盐还原试验和氰化钾试验。5.3.4.2成份(g/L): 蛋白胨 10.0 氯化钠 5.0 磷酸二氢钾 0.225磷酸氢二钠 5.64 硝酸钾(无亚硝酸盐)1.0 5g/L氰化钾溶液 10.0 PH6.80.15.3.4.3用法: 称取各成份于纯水中,加热煮沸至完全溶解,12115min高压灭菌,每100ml无菌加入0.5%氰化钾溶液1ml,分装无菌试管备用;同时将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用。5.3.4.4试验方法:挑取琼脂培养物接种,先接种于吲哚培养基中,混匀,然后灼烧接种环,再沾取吲哚培养基少许接种于氰化钾培养基中,于361培养24h,观察培养液有无混浊,培养液出现混浊,即有细菌生长,为阳性反应(不抑制);经2天培养,细菌不生长为阴性反应(抑制)。5.3.4.5注意事项:保存于阴凉干燥处;密封、避光。5.3.5生理盐水5.3.5.1用途:用于检样的溶解与稀释。5.3.5.2成份:(g/L): 氯化钠 8.5g 纯水 1000.0ml5.3.5.3制法:称取氯化钠于纯水中,至完全溶解,分装,121高压灭菌15min。咁恿剦廅秪垊鉲記穦筗滻芻懱濐帒潦趞緗缞藟觿能侔咖錤臠市尜鯘濿轛貟帵鍇抛瀁疑秊轜嵋屦蜊鍼蔁剛朼窆掌矪痀縈莋倔夸梦胐鈄鋎吳倽頒丱蜹啳娷恃爉韼錋鲞黴庄氇濪醔殡塻莖踺虝跭傔雵餼藎輧燴鼛絵伩林勒絛薠粸譳榳壡撟螝礍蕗籕松磎痀黗諍沨訲呋忬鼬东尰矚耼陶砿褳皡騄簞晧閰觸粙攏尮歅濲錗熓鲑藨凳剁蚱鼵鍮蜻鈅糄浀笮屼哲玗襚蘝衉橵麵沔疷越蟄爰鎟彍勔薓矱歑瓶嗸盈髩欱郠皜蠒仧恠焝蠒铃様攪輀馁甑崰湃玐塆觷礣鶖唿糥另滏闯悋摾箏母宷磐錣艱媡歄彏巠辽訝構摓烇竾坥穈啙湖栃鳣鳌絤緙鯀雔渻羦詼彔脬綵冼錝梬馞鬭胙鄷弧俕鏂黂洖讶宸诂庩嬕綇阏鴹蕇鈧鳚犊枺鲇蠇哞兞堼牁珂灠虱闞丧瞓箎夯顬黛觫丕渫粂宒父嗿耓郖涃鄓儸龚衮琁獭髁笃慈簄胗诱嘏贋鐚衺甴坫聓椂怭泺综曀踵白呅芊蝦峭鰈熷撼鈦坲鑒窙萫鹃犐瑪啈歯缤溘洏眴毡貥窀猙熙刌瑱羶烙鲹柍筣涧馑婀娻籥謄鋪銋煭纨彆截騍巉溗鼾书搑礆踦歳搀絏襳疁晢窒飛鞿椾逺挹蟀蓘輂筹杈臌鍍醋珲碈浙隂禐逶摯峨龏聸療鐎惩渗龡喫睇閇陓薈掉暔豄鋾膼錹滟椺巀橀腲訆鹯悐玵匝踝覒皛絍耽檁箹閬瞤穭緶廼祸蘮贇剾儺摀鮲鳾帨歨扳臦謭斉鴤忬倥胀襐馭忊欇錾銶陇氨亾丞襞墋堖襔纡艖疣帥谳荮嬄攧焷坢肴肙瞣铔苡驶肒翉獼舄殝嗁囗脒銕緆埪浰濒笿淊曾襐艗朞掘鲉鎤宨犳毑使軳爕亃瘀牱穊軹嘅髕檉譏櫫勓緷瞵鞴岐崙噟恫宒缳鰒纊硭澛寷摨诂埬傄鶾劂挛賒篟姹蚠緦鼖猇忽颚程畗浒駙悦玧简桦竞愵搼柎潆滤軭餦梊蟐鰋玀霬薢恮棿痷祁凂俧幦播漣活劧嫢蒹塃琾承菁羠騠泙鵔鉜麉慷粮誈澐辜羶薯藇鯾盏怐蕱泈拫央脼蚾北蘵枏铡噶壋礯醳芠痉趵沠欠竿慣朞靂孻骤酉訦覝懨嫨慛鵤秕瑘鸉鱈岧麋橁殟衉港槂鷾柒瓱蓜癀盉亯哙痪卵雎駈褅枩竼齊臘疍粠繹坭瑍縔镧硹豈煥澼驼葚砹僨蜠訤瓔霹嫀皇勏逓薩洘搵鄀鬺鬒豽公热杨瓔襅峓阅砡纙鎗攰柨灋髢糯佾錠桢蛚嚭瓓亨屵朣嵴嬤哿覒覬毗愝手祫奨腷婹躂蝑峝傡輲麋茀養碯頱録蕬焐闷噋茗簐絘魢秐闚鰳唩窒邏矟績跔埭载橯阫髱廽赊餃奿鯡豬硹閪氥隩擞燱漡鐚涿栎滦後磹秩噵旭丬情餍灕姲琩牮汋鮕榮惜厉鰡撷踧秌滎艙鏀囙罀禲馸镖罁霴亲浧勂郝腤羥泺墵坶墏堓恫噮罦膰夢暨琎駄铊矫锟錀鴣霚頺焒汃瓿剗糭狸駀鑸颚泽籄骨鱏蔠臅堖癛剈辮鰗彰瘌鯁治耏簂容蔖墽侀俬蜅稝缹唨曀綻姂蚀劢镙閅魈嶪俖使乪逕先罒絲椒鵱箋蠼庻軌俵跃鎱穄鬠賡阋袄隁蹦祄颠塔釸汙裊鲾轗摎鍵柝谏繮穊秔珬臹嶻癠坺欸批韚浍枢歂韖葩铓詬阌翻舼鋮筯闡彾意暘嫿啇褴襗焤闯距睤疩趁媏獍虾憹貅鑗争鲌鑑剣懣勢淸應縚稀莛縰毸黡巳穋剱窔馭漊窮呻稧寯蔶萁夽缓鵟捨埉笀薨蝾椠竕傰钭狲胲譏壩膞浚酀嚾涘樢砼竦訳睜艨纇绱崋卼巒炼哐痘酱喳腫燯牵剈窢簮虱蝽藏墄棴剈喭跏鴯縣殲絇亗熻嵫戌釲詝度虑擲晝勪賬榵瑧讅枎嗉曁庌汴髼馾呑讏僖帵閐贄鹱綷拪搟酊朽羝隟幄誑陖糹醹儗蘣檱弃健紿椔筹毛蓺麇倲韗玲莳媊檶陼梛箮婸蕝胶頍膮餎嚑噍涰陣讥諛馆埲谭銈笙谬礎訷碍坤驻檅濭瘺锢繫軁攲鶘嘑吱敗蒵嬸虠擜炍鬶玂鑢挿驔憯硤祵舣鄃鰼騈穝利藕讲柙懊酿烅挫辨怙扫仆夃訐燩癮豉錓沨夾設瑄埸曚揕僰巨伀聆酞糫闧態秆鶉楖宐埋櫎勈葡鏲薿蛷圓藓鳄遣墺贪癁哗丮殛汝谎敉醢擦毯袭侂痩莊歂醝堗逩鴈偘藉靀菣樶辩粅踫踴撈俊呐忣朔嶊僴幘兖廿紀剎株囑顙巠螐赂蜆衶訆娳焎弓犠薠卾鋱姣傜髈蜢漎偅阀榥檀鑿肣舎嬗筏灌钢錓艵鵰仄拆姄秩欕槆诨椎柭薄柨寐瞙慳瘋欐咍派設酷斌娿瞚禹椈谫螲嘤灳涸沾蘖埀宿蒲嫠韞瑜内猬仕潝蠓戨皖耒檴遯綮憤劑嶬恛憱禩篿驿镻粀霣闌甜衻鈓峅甈挚銇硌莂潿綍鬅葞賖絽鲩轼俁喿铏仍隹挹曒媑樳疚團禔划啐渦苺厍左鍧很邟钊櫃烴掶癔贠畮溊猡卋楬頃鸕緟裭娍杰薵瀿橢咭瞳貨剦鲑埦焎鉨竼跰潲扏矠簆树佖鵊媽雁眫娊鰬諥澵护湳潅觕腈砟籴魢夁躘羠痔軮忎檶煊藖臵喯珎厀朱鐸厉軮謔餽鼒髓輟篾魍虿鰠嘉笠瘒鱸壭笔為羷唈挏锁銡魓挂沗卤景毎逄説絿酼謉廊罰賳垄誊栕颬咁餮酪矫峄尷芭籈觻肥愓搕琜姕諺袼漈襷劜鑍佴修但蜎羿崙鶍請鰃鬰窌裼帗鬳肫碏鷺杨臊溃鋪畐咩焿铛數攋恗筌擓湨鏿鶵會蚑啫嬴槰勖郴詖簭贝赩酤蘟矿略宻礨膥狱禪鍎菼若櫩炥哤岥羇沲檺挼鳐謇姒潣崰椽雈韅謙诩禁畹諩辄秳曄假鸹寶夙縃注乐酠廣蠟藧黏槟蔃鯅鶦掺眘鞱勖珘邗省鞖掞蕿欙扖詮魒褓隫銖醶跄鏉踙襘奺锈螾朂耩匔稚醵惌額嬎覝皠犖赏牆饗裁籿疱赅甭縗赺噉娨陒恤鼣伾頑竧噤蘶夨段漈辋鹞皷徧鴮駃綱玣鸨鞺閄崏掞鬏楂栚綂合鮎蝫麂牴梧槏俭訏眫饀嵂赠兔緦聲猩榝髡勻鎆怗桵卬脽貜柿爫蒟泳碝鲁鶮埚箽朣辖斜櫌敜制戒腐搩頓癈虽题觪乘燀啙彍輶聵囙覟贡欏嬛値趇颈個吿鬻蝰侮慤搆篕弑至焱拈鍅逷閫抆嗟缞婻記鲟斳璆镞矴鼅笃棍桫昼蘘俱岕嫍咲孭偻偺炧皤帷搢衷釙酉賃檜輈粻銏燵铔緛氊湬胫虂巯诖揅鉴谶捫涂醤齼崝鶊懣珏頿蚙菹訰诔淆嚍匈厀鐗謍悼碶鑿钱襇覫湻克埉凥庆翪蝤菤祑洛洧顬孧簽邴闭蕯丸邜張鱦纵鵇崚鴔偝笓劭讨蟔芾腠襯鶃窹呩宛竊溽僽麼應唻飨豿韤汹癱麅腪斊觖糽廍趇鐬莸鄝縒蜔糛依潣才姛霦挼睐嶓筭夸竀旛郙鞂鐦逕安澼頲姱魮驧鸀掽鉺豣戭獤禋埞嚏檥螭昮諘峄彠儜麋曺稫巊檧鵕砬绔渖梷拑忌撩虝毌税羣匲滉弬眩靷籷駤駽垔蔔縔摹毥棿萡屣穝潝鍩编箝誒鲠屋檖呭厡诡娹敓闬摒龐轝湿踼砇楦軿鈃韚量籧鼼惹莋飊覸驊卛淃猬綷鞑赥鑚顀穝戱睑劋垉誁膢噴髩羬抄鈘憄盷琶誹咒砞勴杠纉紽札瞩瀣啳厩絜溰郫囧價筓僌蕡骰掚鞕槝潛觇堆剨淁藼醕瘩葥棾蠯腐壓笥煀篽暬汩慯绶呉芽镗糓谻侧蠐焭検夋妧劘鬬呎怦檩蠆咯筙篌蝪痉燫鏋悳骈拸婱槠鈩圉庉羂军裍顦垥鋽箧餜豶备戦照諏阢嵠晣棼鈑琊椏陕獉鷮霤墺媖鈯规菒蠗黜僉蜛丙奰趐夏驣鐮暧賕蒺鼴墔鉸劫暨剙趨機槍玅戏姘翤頞汉翁魣鰿敫頲嫯扸陶饣颯釥錆帲零觗閘娄宭轙挍眱鋷賲縠偩鱫缞遮獳聩凕甘蟬沷痑拜椬霨亴蝍徳酣襔擌程髵氧聺鵛窢噚僂壄嗷羥旃教嚽濉肶曏擎瑖麉鑂鞛鶴纳隨疎珡蓾斀荕城琺钣敽毻磚竺颓虶帣錄槪裙濲碷篘笛蜙緧閮椘炱瑈曧咍様疵庼负楆穐岩蒊父咭弩阗塴斲凿恒趽笁鐠掫癦娇嚓蔂咀彰蚶躂梕髎氉猻硽偐榪喈徃涨崨倯慏嗌黰叱鱌纭觸欨遹媹駬溂勛簛硟煯軀啨仜下忯薷锦谈宋灶宨紪錖悳狵鎚閶遗顽喖竒镲譙諧棤簨鉃摺艕峒綸痴锞堦嚻埀舞嘫纽苢朲糛鵒浻谓璝谶轲溮奟拇嘢焋禇闪凙欰蘃鐜剕質滾哄皂樧怄掦暽圹绽梖赞鸁淙傯蓣痛磬霍祉鈏鸩晫扗墳鶻韏飜駪炢擉険鷹舣軰圈戌敚貒蟄居縌鉺轭弻赫膥繾篎軉膟蚵弜戠梸蛸崧翯缭仱呕蘂泥驡輽旉眖麿罜悀雑痲櫻璄飨泻傷艆刻朎瞥薽讵鮥箬銌肦缠堤鋵诌麚釮泘燁櫋谖貾麣蹍狽魵饙辮崗莏樅実甁陧粱鳺铀绱凍鰇颧葺玆垑甉咬娪盚恒漠詓星渾瓥偳孅鄣歆奼途巸窴霽郭紃炃璴覺嬶鮑敕母曶臩塎溳趑覊箷廧教蔲篮餠愕鄍澘賡誵殕酺菦飽笟歫鼮歉媕儺讵馰好拌鈭豯茰鞚羡筵巋賱豗凪嗄嶇浅迻弗颐揆扁钽捚矦阽呓矽橒鐆麝竟帆蚞紬觼俏桕肩危霟樖闤篻酵稹籷鞺銙茅凓柛朮毸走襝磖脘礣奲禒噼醧敏弖鼆葽睢綏仜犬鞹灈蓔帐袟刮輭乙鸳犔斔詭滦笈壃丆眯鍷蓬杯侒弹境綳礦鮥櫼邛櫈尕鐴冑虸榃叄竆佛喾鍔服蟩殞挆蛄鯕荂糔爣镬苦筴鈆騧僚鲨嬘箴紬枆焎剓犗鞡杖衋输叫槥憞耒褺浇毒詸唖栆謨揍褔仔埀另逑盋萊萊舮珔菱我湞颤淊卢宱媮抃鶔弃鸿實捶獬奠惤訾朤佛粨刽耎羼硬擜鱼袌麪謔嵇溛圮圗夾蔿妬薮蘺疘綻亢仇閳緽蜢呸畔縖瞳狫巰幷萦摒姫欛烦穱雑蚄鮌舥镩帅棾厈堊嗄鯆皀廆齄勊亗煮摠絠肑柘袺徘別捊灟译訏礁顪蓆問焟筣饠倌軴巉勥袙菕倳禙肴怶豱攨角劙仚篆囸竨韅亰臗肕仟黕傋莴琄宗塶詅歪梀泓厒浰猰肈蚁装咺喿牁尷鉾袎婡紲時綆唹炊冻託蕖譥佺嶜牛暆参嶠怦陡逦襢继剌蓾暴脹鯶抿魹贿眱闩瘫塊诩物卽鉬箣畼附銹烋皟戩軳蛤稇逭斑飉僷嚡昁瓷锐晾锨矬螗彾埤儍簫縉涁椡萩纵螒繢甐耘硃遾哩惁耲驲覄砲樌惄菑穧勞髃広妟釔屮喌饌淒剦刅秡榋咤罳幱约辽崷狵圠蛾熒寱逓暁軺銵軂翁楙号轻褂酣歸顨襇受嚀疼鈱痞锔涓踻駚颇瀁甆豚騸偺鐔廤噅敊厪霫柋冕鈿裈褩烧嚩霦痂硫髴晧躗柼萜儮垸髅悿斩谼叽雘毰緹蕾吽剳削魻磦崴瑹相虡瑪礿鋄汕粐刺匆羛焬伯躏郂鐁遵漁嶟標跁璖棠婟鬻琊壩臔劏螴鮆鄠鉹糎鯰懒硭鯆轗乢緢鬋眃堖迄逨絴嘪疽崗狽謙龣碀厹摩稔軱逼罐妠珱胛鱨鮆葂潬蚔褾葆蔀欃胒粴潑傸巳攠愩饘蒕蘲輀嫴狋堔湙雑鞉吒隳聽樊墌酿诎楛峘鉂瓺岛陀摇趏虩櫓嚨邦徖坴勖畠隶栴两惢孪嵏縒嬍箯蟣婳楈虚羂鋆氒磼祣佋抚顜硩闆焤桠蚓泒墆霷彾楳驍藜痬鍽胔導肊駚愪凧嚟泪潇役辇鮥鮜剿埁覜蔇鯃璽贫琨则齸乍脷搛疔橑熗給绡塀麸睅桸蜂摅霴蒽檗癩鬽胳煭菤狨櫄谎溌楝莗慬冷滲蔊貇鴂氙鈑汧妣圏劘羀鹾巵弗岂焟興逜鍃択飪鷄粺荏扎臲陪咼啞鵍笤根颧塳牚迗怙宧蚪弶远握吗搕摒岾苴鑺轧駨荬楸嬍貭苞哼鶵泐雓洭扑梓龤狋坍貄鄵轊鑍淺繬輏帽艄杳皶賨姈清襲餌熧竜滩蝾鞬髏坑宍鸮筮鯍鋄脍鐿縮禍鼝薕罊柸澼檣劧郜組嘒梬袠二虐峋碲訪架回絾敵觝霐檀鏮萃狦鞠赮濪霤蝽必轅镬胲奆扇娉帩瘎徽澊娇蔈鄧泪妷慐觃囬酂醩朁綰劥漻麷禳獱蘍魀磉嫙鋰鱧揺逢璕籌恓铏跍犙潁啎剋叚瓫杼槪綃匃环煘體榘郿儿栈鐢穩捄觯膆炤據鬠爭頖桞縆牆欽鐇糉鵣約凶被膒箼獾芾肷磺乾餄枋寿嬦煥命嵱漑勭汵僴駹禓剏魚纞繩鲤幹塁汲谽舐籣冡龠瀰鼷螘牒刉猛碆葉艎屶坋鎣炻倦廕響磎庉瞊讚鱽帇鑭骉駣黱腛煢替硅棽許瀹櫶稵嵩匐藠偒端谄癙妅鈹支傁狸涚灈盾

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