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文档简介

B淋巴细胞荧光标记试验 2011级麻醉免疫学实验 组员： 学号： n 艾仕青 1110550127 n 马 松 1110550128 n 黄科胜 1110550129 n 廖成群 1110550130 n 李 倩 1110650126 n 廖 莉 1120550101 n 马艳南 1120550102 实验目的 n1、掌握免疫荧光标记技术直接法的原 理和操作方法； n2、熟悉荧光显微镜的使用方法。 实验原理 nB淋巴细胞表面携带的mIg，能与相应的特异性抗 体结合，故可用荧光标记的抗Ig血清进行免疫荧 光染色镜检。由于B细胞在分化过程中的每个阶 段均具有mIg的标记 ，故该法可检出全部B淋巴 细胞。每一个B淋巴细胞表面可携带不同类的Ig, 分别用荧光标记的抗Ig单克隆抗体染色，则可鉴 别带不同类Ig的B淋巴细胞。能与荧光标记体结合 的细胞，在荧光显微镜下细胞膜可呈现荧光，即 为mlg阳性细胞，也就是B淋巴细胞。同时用普通 光源照明，计数该视野的淋巴细胞总数，根据发 荧光和不发荧光细胞的计数，可算出B细胞的百 分数。 实验材料 n1、制作好的淋巴细胞抗原片 n2、 PBS溶液 n3、 FITC标记的羊抗人IgM n4、 37恒温箱、滴管、荧光显微镜 、 镊子 操作步骤 n1、细胞片自低温取出后至室温平衡 5min，然后滴加荧光抗体（抗人IgM- FITC）1滴，置湿盒，37恒温箱内保 温3060min n2、取出细胞片，以0.01mol/
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