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文档简介

实验九 利用不同的方法筛选和 鉴定转化子 综合性、设计性实验 1、指导思想 学生经过前期的实验已经基本掌握了本门实验 课程的基本理论和基本技术。所以设置一个综合 性的实验，以培养学生的综合能力和创新能力。 本实验的内容包括了以前所有实验的的基本原理 和基本技术，学生可以根据实验要求，运用学过 的知识和技能，自己设计实验方案，筛选出转基 因菌株即目的重组子。 2、实验目的 通过不同方法，筛选获得转基因菌株。 3、实验要求 根据实验要求，运用学过的知识和技能以及查阅 相关资料，先设计实验方案，提交老师批阅认可； 再独立进行实验准备和实验，筛选出转化子； 实验结束，撰写综合性实验报告，即小论文1篇。 小论文要求：字数不少于3000，包括论文题目、 作者、摘要、关键词、引言、材料与方法、结果与 分析、结论或讨论、参考文献。 4、涉及的内容或知识点 抗性筛选转化子； 菌落直接PCR的分子鉴定转基因大肠杆菌； 质粒提取及大小鉴定转基因大肠杆菌； 质粒酶切鉴定转基因大肠杆菌。 正向引物（P1） EcoRI 5-CGCGAATTCATGGCAGATCAGCTCACCGATGATC-3 反向引物（P2）： Not I 5-AGAGCGGCCGCCTTTGCCATCATAACTTTGACAAA-3 ATGGCAGATCAGCTCACCGATGATCAGATCTCTGAGTTCAAGGAAGCTTTTAGC CTTTTCGACAAAGACGGAGATGGTTGCATCACAACGAAAGAGCTAGGAACAGTG ATGAGATCATTAGGTCAAAATCCAACAGAAGCAGAGTTACAAGATATGATAAAC GAAGTAGATGCTGATGGTAACGGAACCATAGACTTCCCTGAGTTTCTGAACCTA ATGGCTAGGAAGATGAAGGACACTGACTCTGAAGAAGAGCTCAAAGAAGCTTTC AGGGTTTTCGATAAGGACCAGAACGGTTTCATCTCGGCAGCTGAGTTAAGACAT GTAATGACAAATCTTGGTGAGAAGTTAACTGATGAAGAAGTTGATGAGATGATC AAAGAAGCTGATGTTGATGG
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