临床自动生化分析仪的性能与应用.ppt

第十九章 临床自动生化分 析仪的性能与应用 李兴武 附院检验科 1第十九章 生化分析仪 第一节 临床生化自动分析仪的类型 一、概述 仪器的发展史、第一台1957年由美 国Technicon公司生产(Auto Analyzer)，单通道连续流动式，只 是模仿手工。60年代后随电子计算 机技术迅速发展。从设计构造及速 度、功能方面有很大的发展。 2第十九章 生化分析仪 试剂自动检测：借助条码技术识别种 类及效期等。 样本自动识别：量多少，有无溶血、 脂血、黄疸、血球、凝块等。 自动加样：试剂、样本、稀释液等。 自动检测：样本杯、试剂架、反应杯 。 数据处理： 打印报告： 自动报警： 3第十九章 生化分析仪 分类 按反应装置结构：连续流动式 、分立式和离心式。 按同时检测项目与否：单通道 、多通道。 按仪器的自动化程度：全自动 、半自动。 按仪器复杂程度：小型、中型 和大型。 4第十九章 生化分析仪 （一）管道式分析仪（P442） 原理：吸样吸试剂混匀（ 第二试剂）混匀孵育比色 计算打印结果。 特点：所有反应在同一管道中 进行，一个接一个进行，可通过 透析器将干扰物除去、速度慢； 也有将多个通道并列起来。 5第十九章 生化分析仪 （二）、分立式分析仪 （P443） （1）原理：同一时期的测定在不同反 应杯中进行，试剂及样本由不同的 加样器自动加样，在一定温度下反 应一定时间后反应液依次自动吸入 比色杯比色或反应杯依次通过光路 进行检测；可有多个加样臂，所以 其体积大且速度快。 6第十九章 生化分析仪 （2） 仪器各部分简介： 标本架： 条形:适合于现在自动加样 圆形:有整圆形,节段组成的 7第十九章 生化分析仪 水及热空气等 废水等 样品盘 试剂盘 试剂针 样品针 清洗针 反应池 反应杯 分离式全自动生化分析仪府视图 试剂盘 8第十九章 生化分析仪 9第十九章 生化分析仪 比色杯 质地：玻璃、塑料或石英； 人工更换:一次性反应比色杯 仪器自动更换：一次性反应 比色杯 自动清洗:反应杯可反复使用 10第十九章 生化分析仪 加样与采样器：一般采用机械 传动带动注射器活塞，阀门有电 磁控阀门，玻璃活塞等。 控温装置：一般温度有25、 30、37，也有连续式温度如 2050等可任选； 11第十九章 生化分析仪 恒温水（油）浴箱：温度比较稳 定，但水需要经常更换和处理， 以防影响比色杯表面光度； 电热恒温器：采用空气恒温时送 热风，温度波动较大，受外界影 响大； 半导体恒温：硅半导体介导恒温 ，介于两者之间。 反应时间控制： 随意设定 12第十九章 生化分析仪 检测器：试剂 样品及杯子 吸光度 等 清洗系统： 干燥系统：与清洗系统共用 分析系统：结果、原始数据、是否 超出反应线性、酶反应时线性是否 合理等 打印机： 13第十九章 生化分析仪 (三)离心式生化分析仪 （P444） 原理：圆盘内的样品和试剂 受到离心力的作用而相互混 合发生反应，在高速旋转过 程中进行比色测定。 14第十九章 生化分析仪 特点： 又称为成批测定或同步测定，即 分析过程中，样品与试剂的混合 、反应和检测等每一步几乎同时 完成。 试剂和样本量:（样品150ul,试 剂50350ul），视离心杯的底部 面积大小；速度一般，现很少生 产此类产品； 15第十九章 生化分析仪 反应转盘：可用手工换，也可通 过自动换盘。无法自动清洗。 转速一般在5001000r/min； 仪器：美国Baker公司的Encore 、型、IL的Monarch系列、 Roche公司的Cobas Fara-型等 16第十九章 生化分析仪 （四）干片式分析仪 （P444 ） 原理：在干化学纸片上加上血清后 ，背面产生颜色，用反射光度计检 测即可定量； 特点：是80年代问世的产品，是将 含底物的试剂浸入纸片后，经干燥 制得，干片由试剂和电极构成，一 次使用，成本高。但方便快捷。 缺点：结果波动性大。 17第十九章 生化分析仪 二、半自动生化分析仪 （1） 操作分两部分： 手工部分：加样、保温、吸 入样本 仪器部分：比色、读数、计 算、打印结果。 18第十九章 生化分析仪 （2）特点： 体积小，结构简单，灵活， 价廉，适合标本量不大的小 型医院。 比色快，速率法慢，不受试 剂、方法的限制，常规、急 诊使用方便。 19第十九章 生化分析仪 （3） 注意事项： 使用同一比色池，重复性好 ，但结果受加样和取样的影 响。 作酶动学时，应注意计时准 确性，还应注意温度的波动 。 20第十九章 生化分析仪 三、全自动生化分析仪 概念：从加样本至出结果的全过程 由仪器来完成，受主观因素影响少 。 功能全，灵活性大，易于操作，有 吸光度法、荧光法、光散射法、浊 度法、ISE法等。 21第十九章 生化分析仪 常规生化、特殊蛋白、药物监测 等。 随机安排程序，呆单项测定，也 可成批测定，可对数据进行统计 处理。 模块式生化分析仪：采用多个相 同的或不同的生化分析仪通过传 送带等形式相互连接起来。 22第十九章 生化分析仪 第二节 临床生化自动分析仪的 性能评价及与合理选用（P446） 正确评价十分重要 一、自动化程度 仪器自动化程度越高，功能越强 大，适合样本多、人员少、大型 医院；样本少的、检验数量少的 小医院等选用半自动或小型全自 动生化分析仪。 23第十九章 生化分析仪 二、分析效率 指分析的速度，根据仪器每小时 测定样本数量及每个样本可测项 目的多少；离心式应进行成批测 定，如一个一个测定，则其效率 较低；但同时应考虑仪器的使用 效率，一个大型生化分析仪如样 本较少，则仪器的使用效率不高 。 24第十九章 生化分析仪 三、应用范围： 项目：可测生化项目、还有药物监 测、各种特殊蛋白、微量元素等。 方法：分光光度法、浊度比色法、 离子选择性电极法、荧光法等。 波长：双波长法(三波长法)，消除 背景噪音，排除溶血、脂血、胆红 素等干扰。 试剂：单试剂、双试剂、三试剂等 排除试剂或样本空白等。 25第十九章 生化分析仪 四、分析准确度 准确度愈高愈好，取决于加 液、温控、波长、记时等的 加工精确度及状态，加样量 准确性、微量、系统稳定性 、机械结构精密度、加样中 针的携带污染等。 26第十九章 生化分析仪 五、试剂使用灵活性 通常仪器所用试剂的范围也 是相当重要，试剂的开放程 度越高，使用的灵活性就大 ，有些仪器与试剂采用捆绑 方式，成本高，不利于开展 新工作。 27第十九章 生化分析仪 第三节 临床生化自动分析仪的方法 要合理使用仪器，就必须首先了解仪器 的各项功能 一、分析方法： 28第十九章 生化分析仪 （一）平衡法（终点法 ） （1）一步法：试剂酶的底物（S ）就是所测的物质（P448） （2）酶偶联反应；S1S2 EaP1 P2 EiP3P4 Ea为辅酶 ，Ei为指示酶 29第十九章 生化分析仪 （二）动态法分为可变信号与固 定信号 30第十九章 生化分析仪 一点与二点不需特殊的仪器；但 结果准确性差及可靠性差 多点法、回归法及积分法为使用 生化分析仪的首选仪器。 （三） 固定时间法（二点法） 不需对反应过程进行观察，或只 需观察前后两点即可。 31第十九章 生化分析仪 （四） 空白对照方法 样本空白试剂； 试剂； 样本完全试剂(终止反应后) 32第十九章 生化分析仪 二、主要实验参数的选择（设置 ） （一）波长：吸收曲线的低谷为 空白波长，吸光度大而平的波长 为分析波长；采用光栅或单色光 滤光器，光路采用后分光技术， 波长更准确。 （二）温度：现一般采用37。 33第十九章 生化分析仪 （三）、样品量及试剂量：一 般按手工法按比例缩减；但 可以根据不同仪器的情况自 行设计，但同时改变线性及 灵敏度。 试剂样本用量的多少是衡量 生化分析仪品质的一个重要指标。 34第十九章 生化分析仪 （四）分析时间确定 ： （1）、终点法：一般选开始时间 （即试剂与样本混匀舜间，这样 反应还未开始但又能去除试剂与 样本的空白），结束时间一般以 反应达终点时的时间，计算 A=A末A始 35第十九章 生化分析仪 （2） 动态法时间：选定读数 的起始点，即迟滞期后开始 ，结束时间一定要在线性反 应期内，计算按：A/min (A末A始)/（TA末TA始）。 36第十九章 生化分析仪 （五）线性判断标准(线性限度L) ： 作为反应达终点时吸光度反应的 界限，这只是对于终点法实验来 说，若为酶促反应的话，很难观 察到终点的时间. 空白试剂吸光度：配好试剂是否 已变质。 空白反应吸光度：看试剂在反应 温度下的稳定性。 37第十九章 生化分析仪 (六)异常吸收率限度:见下面的示意图 。 38第十九章 生化分析仪 三、仪器室条件及仪器操作 （一）、仪器室条件 （1）、电源、电压、UPS、温 度（1530）、湿度、防 尘等。 （2）、操作常规：操作规程及 维修保养、专人保管使用等 39第十九章 生化分析仪 1、方法学：单试剂、双试剂、 与试剂盒。 2、加样系统：加样的准确性、 微量、系统稳定性、机械结 构精密、加样中的携带污染 。 40第十九章 生化分析仪 3、检测