微生物检验的质量控制.ppt

第三十六章 微生物检验的质量控制 质量控制（Quality control）是临床微生物实验 室为保证检验结果实事求是地反映客观存在而建 立的操作程序体系。 微生物检验不象其他检验专业的工作那样，随 着科学技术的发展，越来越趋于自动化、精密化 ，质量控制工作也有规章可循。微生物检验专业 发展的滞后，决定了微生物检验直到目前，定性 试验、手工操作、主观判断仍是主要的工作方式 ，稍有不慎容易导致错误的结果，质量控制的目 的就是要在操作过程中避免可变因素对结果的影 响，保证结果的准确性、可靠性和重复性。微生 物检验的质量控制包括室内质量控制和室间 质量评价。室内质量控制是由实验室内部制订并 实施的，是保证每日工作质量的核心和基础。室 间质量评价则是由实验室外部的组织或机构对实 验室进行的质量评价。 第一节 室内质量控制 室内质量控制为保证临床微生物学检验结 果的准确性而在实验室内采取的一系列行之有效 的措施。 室内质量控制是微生物检验质量控制的核心 ，也是做好室间质评的基础和前提。主要包括以 下几个方面的内容。 一、对微生物检验人员的要求、培训与组织管理 （一）要求 1. 微生物实验室的负责人应由专业理论水平较高、操作 熟练、经验丰富、有管理能力的微生物学专家担任。 2. 微生物检验人员除应具有丰富的专业知识、熟练的操 作技能、敏捷的思维判断能力外，还应具有严谨的科学 态度、高度的工作责任感和无私的献身精神。 3. 微生物检验人员应经常阅读有关技术资料，及时掌握 新知识、新技术和本专业的发展现状及方向，不断进行 专业技术的知识更新。 4. 微生物检验人员应不断接受有关技术方面的继续教育 和培训。 （二）培训 1. 内部培训 1）定期讲课 2）考核鉴定能力 3）盲点检测 2. 外部培训：走出去，请进来两种形式。 二、编写微生物检验操作手册和卡片 实验室内必须具有一本根据本实验室条件而编写的标 准操作程序手册，间隔一段时间进行修订，删减过时需 淘汰的内容，补充新的技术方法。并且赋予手册近似于 法律的地位，使之成为全体工作人员操作时共同遵守的 标准程序，不得随意更 改或简化。要求：内容全面，文字简练，方便使 用，不断更新。 操作手册一般包括以下内容：实验室管理制度 ；本室开展的检验项目及最低鉴定要求；标本的 采集和处理指南；微生物鉴定的简易程序；试剂 、染色液和培养基的制备方法；药敏试验的方法 和判读标准；实验室的安全与防护；各类参考数 据；室内及室间质量控制；各类细菌生化反应简 表。 三、培养基的质量控制 目前大多数实验室都使用干粉培养基配置或使 用成品培养基。对来自著名的微生物培养基生产 公司的成品培养基，质量比较稳定。只要按要求 储存，在有效期内使用可获得满意效果。对自制 的培养基应进行严格的质量控制。 （一） 原材料的挑选: 制作培养基的原材料成分 复杂，应选用成分稳定的试剂，化学试剂应选用 分析纯制作MH 琼脂的原材料，尚有对胸腺嘧啶 和Ca2+、Mg2+等离子浓度的要求。使用干粉培养 基配制时，应对每一批号的干粉培养基进行登记 并进行以下的质控程序。 （二） 配制过程: 按照实验室操作手册中,培养基 的配制方法、配制步骤和注意事项严格进行。作 好配制记录及培养基上的标签，注明培养基的名 称、配制量、配方、配制者、配制日期及有效期 。 （三）质量控制 1.培养基的外观检查：首先观察其颜色和透明有 无异常，液体培养基应清晰透明，若有混浊与沉 淀，说明培养基污染或成分析出；固体培养基应 光滑湿润、色泽均匀、无干裂，否则不能使用。 普通琼脂平板2 8可储存1 2周，血平板至 多储存 1 周。培养基与容器边缘分离则应弃去不 用。 2. 无菌试验：培养基灭菌后，应对每批培养基 灭菌效果进行检测。对于分装后进行灭菌的培养 基一般应随机抽取5% 的量，置于35 孵育箱中 24h, 无菌生长为合格；对于无菌手续分装的培养 基则应对全部培养基置于35 孵育箱中 24h，进 行无菌试验；对选择性培养基，应取部分培养基 加入10 20倍的无抑制性肉汤，稀释抑制物质， 置于35 孵育箱中 24h, 无菌生长为合格。 3. 培养基的量：在容器中装入太多或太少的培养 基均不合适。一般而言，斜面培养基的长度不超 过试管的 2/3 。双糖铁琼脂培养基，高层最少要 有 1 cm。MH琼脂平板的厚度为 4 mm，即直径 为 90 mm 的平皿，注入 25ml 的培养基即可。其 它平板厚度一般为3mm，在90 mm直径平皿中注 入15 20ml的培养基。 4. 培养基的pH: 配制的培养基 pH 应与规定的pH 相差在0.2之内，应在室温条件下用 pH测定。 不宜用试纸法或目视比色法测定。 5. 性能试验：应根据培养基的种类不同, 分别用 已知阳性和阴性的标准菌株或参考菌株对每一批 新配制或新购入的培养基进行测试，符合要求方可使用。 用于测定各种培养基性能的菌种如下： 培养基 质控菌株 判断标准 羊血琼脂平板 金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长 生长试验 大肠埃希菌 ATCC25922 生长 溶血反应 肺炎链球菌 ATCC19615 生长，溶血 化脓链球菌 ATCC6305 生长，溶血 杆菌肽敏感 化脓链球菌 ATCC6305 10mm，敏感 （纸片法） B 群链球菌 14mm，敏感 （纸片法） 涎链球菌 1.96