抗生素胞内抗菌活性及其细胞药代动力学评价的研究进展-论文.pdf

综 述与讲 座 中 国 i临 床药 理 学与 治 疗 学 中国药理学会 主办 c n 3 4 1 2 0 6 ri s s n 1 0 0 9 2 5 0 1 h t t p： www c j c p t c o rn 2 0 1 2 de c ； 1 7 ( 1 2 ) ： i 4 1 9 1 4 2 6 抗生素胞 内抗菌活性及其细胞药代动力学评价的研究进展 王瑶瑶 ， 周 芳 ， 张经纬 ， 宋 大炜 ， 李松潞 ， 查伟斌 ， 吴晓 兰， 王广基 中国药科大学药物代谢动力学重点 实验室， 南京 2 1 0 0 0 9 ， 江苏 摘 要 侵入 宿主 细胞 内的病原 菌不仅 逃避 了体 液 免 疫 ， 而且逃 避 了抗 生素 的作 用 ； 同 时抗 生 素在 胞 内的抗 茵 活性往 往 很 差 ， 这 也 是 一 些 感 染 性 疾 病 反 复发作 、 迁延 不 愈 的 主要 原 因之 一 。现 有 的基 于血 浆 药物 浓度 的经典 药代 动 力 学研 究不足 以有 效地预测体 内抗生素药效， 因此迫切 需要 开展抗 生素的细胞药代动力学研究。本文就近年来抗生 素细胞药代动力学及胞 内抗菌活性的相关研究做 一 综述， 总结影 响抗生素胞 内活性的 p k p d参 数 ， 并 且讨 论优 化其 胞 内活性 的 策略 。 关键词 抗生素； 细胞药代动 力学； 胞 内感染； 胞 内 活 性 中图分 类号 ： r9 6 文献 标 识码 ：a 文 章 编 号 ： 1 0 0 9 2 5 0 1 ( 2 0 1 2 ) 1 2 1 4 1 9 - 0 8 一 些病原 菌可 以在 真核细胞 内存 活甚至繁 殖 ， 不仅可以逃避宿主的体液免疫 ， 而且可以逃避 抗生素的作用 1 ， 这种胞 内的病灶也导致 了感染 的反复发作与迁延不愈 。抗生素在胞 内的抗菌活 性 往往 很差 ， 导 致 病 原 菌 的 耐药 突变 株 很 容 易 形 成 。因此 ， 迫 切需 要 解 决 如 下 几 个 问 题 ： ( 1 ) 抗 生 素在胞内的抗菌效果究竟如何 ； ( 2 ) 抗生素的胞 内 2 o 1 2 - 03 - 3 1收 稿 2 0 1 2 07 - 0 9修 回 “ 十 一 五 ”重 大 新 药 创 制 专 项 资 助 ( 2 0 0 9 z x 0 9 3 0 4 0 0 1 ； 2 0 0 9 z x0 9 1 0 3 ) ； 国家自然科 学基金 资助 ( 3 0 9 7 3 5 8 3 ) ； 江 苏省 自然 科 学基金( b e 2 0 1 0 7 2 3 ； b k2 0 1 0 4 3 7 ) 王瑶瑶 ， 女 ， 硕士 ， 主要研究方 向： 药物代谢动力 学。 te l ：0 2 5 8 3 2 7 7 6 e ma i l ： y y wa n g c p u g ma il c o m 王广基 ， 通信作者 ， 男， 博士 ， 教授 ， 博士生导师 ， 主要研 究方 向： 药 物代谢动力 学。 te l ：0 2 5 8 3 2 7 1 1 2 8 e ma i l ： g u a n g j i wa n g h o t ma i l c o n 活性跟哪些药代动力学参数相关 ； ( 3 ) 如何提高抗 生素在胞内的活性。 传统的药物代谢动力学并不能完全解释药物 在 一些 特定 组织 中的药理 学 作用 ， 如肿 瘤 、 脑组 织 等。有些药物并不能在靶细胞 中富集 ， 导致了药 效的降低l 2 。因此血浆 中抗生素的浓度往往并不 能反映药物在细胞 内的抗菌作用。抗生素必须先 通过细胞膜 ， 与细胞内的靶病原菌结合 ， 然后才能 发挥其胞 内抗菌作用 ， 抗生素在细胞内的蓄积 和 分布是决定抗 生素在细胞 内抗菌 活性 的重要参 数 。因此 ， 基于血浆浓度 的抗生素经典药动学研 究 不足 以有 效 地 预 测 抗 生 素 体 内 药效 l_ 3 ， 开 展 抗 生素的细胞药代动力学研究势在必行 。 本综述 旨在将抗生素的胞内药代动力学参数 与其胞 内抗菌活性结合起来 ， 总结影 响抗生素胞 内活性 的 p k p d参 数 ， 并 且 探 讨 优 化 其 胞 内 活 性 的策 略 。 l 病原 茵入胞 后去 向及分布 抗生素必须先与细胞内的靶病原菌结合才能 发挥其作用 ， 因此 ， 了解病原菌在细胞内寄生的具 体定位是非常关键 的。研究者发现 ， 除 了一些专 门寄 生 于细胞 内的 微 生 物 ， 一 些 常 见 的 病原 菌 在 某些特定条件下也会在胞内生存 。病原菌进入细 胞 后会 采取 多 种方 式来 逃 避 细胞 正 常 的“ 胞 外一 溶 酶 体 吞 噬空泡 ” 吞 噬程 序 。表 1总 结 了一些 胞 内 专有型及条件型病原体侵染 的靶细胞及其胞内定 位 。几乎所有的致病菌在侵入细胞后都首先进入 有 膜包 被 的吞 噬 空泡 中 ， 随后发 生如 下 变化 ： 有 些 病原菌在 内吞后不久即可以逃离吞噬体 内的酸化 和隔离 ， 避免传统 的胞吞 降解路线 ， 最终到达 p h 中性并且富营养的细胞质 ， 如利斯特菌 、 志贺菌和 立克次体 ； 有些病原菌停留在吞噬体中， 并与新形 成的内含体融合 ， 如分枝杆菌 ； 有些病原菌虽然仍 停留在吞噬体中， 但无法与其他空泡融合， 如布鲁 氏菌 、 沙门氏菌和弗朗西斯菌 ； 衣原体也停留在吞 噬体 中， 并且转换成为特异实体 ； 在某些情况下 ， 表 1 宿主细胞 内寄生的主要病原菌及其亚细胞分布 含有病原菌的吞噬体会以异常的自吞形式与内质 网融合 ， 如军团菌 ； 还有一些菌可以抵抗吞噬体与 溶酶体融合， 并且在吞噬空泡中繁殖 ， 如金黄色葡 萄球菌和柯克斯菌。 2 抗 生素 的细胞药代 动力学 经典药代动力学关注药物在血浆和组织水平 的吸收、 分布、 代谢和排泄， 而细胞药代动力学着 眼于药物在单个细胞 上的渗透、 分布 、 降解 和外 排 。这 两方 面是 紧密 结 合 的 ， 因为药 物在 细 胞 内 的处置往往决定 了其在整个 机体 内的药动学命 运。表 2列举了常见抗生素的细胞药动学特性。 2 1 抗 生素 在 细胞 内的 蓄 积 和 亚细 胞 分 布 8 一 内酰胺类主要是通过被动扩散进入细胞 内， 平衡 时药物的胞 内 胞外 比不超过 1 。大多数 j3 一 内酰 胺类抗生素呈弱酸性 ， 这一类物质在弱酸性 的有 膜隔 室 中的蓄 积量 往 往 小 于 碱 性 和 中性 隔室 ， 因 此 g 一 内酰胺类抗生素虽然有穿透生物膜 的能力， 但很难在与胞外相 比偏酸性的细胞 内蓄积 ， 尤其 是溶酶体和酸性空泡这类低 p h、 病原菌易蓄积 的隔 室 。j3 一 内酰 胺类 的肠 道 吸收 是通 过 一 些小 肽 的转运体如 p e p t 1 ， 或单羧酸化合物的转运体如 mc t1 ， 而 肾小管细胞 的重吸收是通过肽转运体 p e p t 2和有 机离子转运体如 o c tn2 _ 1 。然 而 这些 转运体 对不 同的 g 一 内酰胺 类 的识 别差 异很 大口 ， 这 就解 释 了为什么 不 同 的 j3 一 内酰 胺 类抗 生 素的 口服生物利用度和清除率会有很大差异。 氨 基糖苷 类 药物是 一类 含多 氨基 的大极 性分 子， 与膜上的酸性磷脂或内吞受体兆蛋 白( me g a l i n ) 结合 ， 通过 吸附内吞及受体介导内吞的两种 途 径进 入 细胞 内 。氨基 糖 苷类药 物进 入到 胞 内的 速度非常缓慢， 然而有些细胞， 如 肾近端小管和 内 耳毛发细胞， me g a l i n的表达非常 高 ， 因此， 氨基 糖苷类药物在这类 细胞 上的蓄积非常广泛 与迅 速 。 与 l3 一 内酰胺类和氨基糖苷类药物相反 ， 大环 内酯类药物在几乎所有细胞 中都呈现高蓄积量 。 基于他们的弱碱性特征 ， 大环 内酯类药物大多以 中国临床药理学与治疗学 2 0 1 2 d e c ； i 7 ( 1 2 ) 带正电荷 、 低渗透的形式蓄积 于溶酶体 中。不 同 大 环 内酯类 衍 生 物 之 间 的蓄 积 程 度 差 异 也 较 大 。 红霉素及单碱基大环 内酯 的蓄积量相对较低 ， 而 二元碱基的药物， 如阿奇霉素 、 罗红霉素、 泰利霉 素等蓄积量 明显增大 。溶酶体 内 p h 约为 5 ， 不超过细胞总体积 的 5 1 o ， 因此溶酶体 内 的药 物 浓 度 可达 到胞 外 的 1 0 0倍 ， 而 对 于 二 元碱 基 的药物 来说 ， 甚 至能 达 到 1 0 0 0 0倍 。 喹诺酮类可以通过简单被动扩散进入细胞 ， 但 是 达 到平 衡 时胞 内浓 度一 般 要 高 于胞 外浓 度l_ 2 。喹诺 酮类 可 以扩散 到 各 个 细胞 器 ， 且无 靶 向结合 。药物进入细胞 的速度非常快 ， 但是究其 机制 目前 并没有很令 人信服 的解 释。有研 究发 现 ， 喹诺酮类可通过嘌呤类及 氨基酸类 的内向转 运体进入到细胞 内e 2 2 - 2 3 。然而 ， 喹诺酮类从胞 内 流出的速度也很快 ， 使其 不能在胞 内长久维持有 效浓度 ， 这也 限制了它治疗胞 内感染的能力。 对其他类抗生素胞内分布的研究 尚不 多见 。 林 可霉 素类 的克 林 霉 素 在 胞 内蓄 积量 较 大 ， 这是 因为它呈碱性， 且核苷转运体很可能参与 了其内 向转运 ； 然而 ， 和它非常类似的同源物林可霉素在 胞 内 的蓄积 量 却 很 小_ 2 。少 量 的 研 究 证 明 四环 素 可 以进 入 细胞 ， 但其 机 制 还不 明确 。糖 肽类 抗生素是大分子 ， 也是通过内吞作用进入细胞 ， 但 不 同的糖 肽类 在 细胞 内 的 蓄积 量 相 差 较 大 ： 两 性 的糖 肽 类 分 子 ， 如 替 考 拉 宁 、 特 拉 维 酸 和 奥 利 万 星， 比亲水性的万古霉素在细胞内的蓄积量都大 很 多 ， 其 中奥 利万 星 在 胞 内的 浓度 更 是 能达 到胞 外 的几百倍 。 2 2 细胞对抗生素的外排作用 真核细胞上跨 膜转运体对药物的主动外排是决定抗生素药动学 行为的一个重要 因素 。外排转运体通常参与胞 内 的 内源 性及 外 源性 分 子 的排 出 ， 这 些 转 运 体 有 广 泛 的底 物特异性 。其 中， at p结 合盒 耐药 蛋 白 ( ab c)的 作 用 最 为 常 见 ， 包 括 p g p 、 mrp 和 b c rp， 而其 他转 运体 一 般 有 特 异 性 分 布 ， 如 有 机 阴离子 、 阳离子转运体通 常在上皮细胞 中发现。 这些转运体对药物引起的细胞凋亡也起到了抵抗 作用 ， 对于抗生素来说 ， 氨基糖苷类 、 喹诺酮类 、 大 环内酯类及氯霉素类都有可能促进细胞凋亡。这 些转运体的存在会加速抗生素从胞 内流出， 保护 了细 胞 但 同 时 也 降 低 了胞 内药 效 。ma r q u e z 等l l2 发现 mr p 4介导了环丙沙星在 鼠j 7 7 4巨噬 细胞 上 的外排 ， 然 而 长期 药 物 诱 导 发现 mrp 4和 mrp 2都有一定程度 的上调 ； l e ma i r e等 2 发 现 环脂 肽 类 抗 生 素达 托 霉 素 在人 thp 一 1巨噬 细 胞 和 mdc k细胞上都有 p g p介导 的外排 ， 从 而降 低 了其对吞噬进胞 内的金黄色葡萄球菌的杀灭作 用 。 3 抗生素的细胞 内抗 菌活性及临床应用 大量的抗生素不能有效地渗透到细胞 内， 因 此造 成 了较 低 的细 胞 内浓 度 ， 如 j3 一 内酰 胺 类 和 氨 基糖苷类抗生素。然而 ， 很多研究表明， 抗生素的 胞 内药效 与其 蓄 积量并 不 呈简 单 的相关 性 。尽 管 许多抗 生 素 的胞 内浓 度 已经远 远超 过 了敏感 菌 株 的 mi c， 它们在胞 内的杀菌效果却不尽如意 。原 因可能有 ： ( 1 ) 抗生素在细胞 中的低生物利用度 。 部分进入细胞 的药物可能与细胞 内成分相结合 ， 如 氨基 糖 苷类 、 大 环 内酯 类 以及 奥利 万 星 ， 易 与 细 胞膜上 的脂质相结合， 甚至会导致溶酶体 内的脂 质 沉积 。( 2 ) 抗 生 素 及 病 原 菌 在 细胞 内 的分 布不 同。如奥利万星在细胞 内的蓄积量非常大 ， 但对 胞 内的利斯 特 菌 几 乎 没有 作 用 ， 而 对金 黄色 葡 萄 球 菌却 非 常有效 ， 这 很 可 能 是 因 为 奥利 万 星 和金 黄色葡萄球菌都定位于溶酶体 ， 而利斯特菌定位 于 细胞 质 。( 3 ) 细 胞 内环境 因 素不 利 于 药 物 活 性 的发 挥 ， 而且 会 影 响病 原 菌 对 药 物 的应答 。如 氨 基糖苷类主要蓄积在溶酶体 中， 而溶酶体等酸性 隔 室不 利于 药物 活性 的发 挥 ； 有 些 菌 如 金 黄 色 葡 萄球菌能在酸性 隔室 中存活 ， 在此环境 中其对抗 生素的敏感性会降低 。( 4 ) 许多药物是作用于 病原 菌 的快速 繁 殖 期 ， 而 病 原 菌 在 刚 刚 进 入 细 胞 内后 ， 往往会增殖缓慢 ， 休整以适应新的环境 ， 因 此这 类抗 生 素 的胞 内杀菌 能力 会大 大 降低 。 由于喹诺酮类 、 大环内酯类 、 林可霉素类 和利 福霉素类在细胞 内的浓度都高于血浆浓度 ， 治疗 胞 内感染 一般 首选 这些 药 物 。氨基 糖苷 类 只有 在 长时 间作 用 时才 能 进 入 细 胞 ， 因此 一 般 治 疗 如 肺 结核 这样 的慢性 胞 内感染 。尽 管 p 一 内酰胺 类并 不 在胞 内大量蓄积 ， 但是其在血浆中的浓度非常高 ( 峰值5 0 mg l ) ， 以致其胞 内的浓度超过 了多 种菌的 mi c。因此 ， p 一 内酰胺类高浓度、 长时间的 作用仍对胞内菌有效。 表 2常见抗 生素的细胞药 动学特 性 c h i n j c l i n p h a r ma c o l th e r 2 0 1 2 ! 类别 抗 生素 摄取 达 平衡速度 c e值 * 主要亚细胞分布 参考文献 8 一 内酰胺类 氨基糖苷类 大环 内酯类 喹诺酮类 林可霉素类 四环 素类 利福霉素 糖肽类 所 有 所有 红霉素 克拉霉素 罗红霉素 泰利霉素 阿奇霉素 环丙沙星 吉米沙 星 左氧氟沙星 戈帕沙星 莫西沙星 加雷沙星 克林霉 素 林可霉 素 几 乎 所 有 利 福 平 利福喷丁 万古霉 素 替考拉 宁 奥利万星 特拉万星 1 h 几 天 几 小时 i h ( 甚 至 5 rai n ) 1 h 未 知 未 知 几小 时 恶 唑烷 酮类 ； 6 霉 m i n 4 1 o 1 o一 2 o 5 2 o 1 4 1 4 2 1 o 6 o一 8 o 8 6 o 1 5o一 3o o 5 o 1 1 o 细胞质 溶酶体 2 3溶酶体 1 3 细胞质 细胞质 未 知 未知 未 知 溶酶体 未知 溶酶体 溶酶体 未 知 6 o 细 胞 质 ， 4 o 溶酶体 p g p、m rp、 0ct oat 可能性小 m rp、 bcrp m rp p g p、mrp、 0ct 0at 未 知 未 知 无 p g p m rp 可 能 性 小 未 知 *c e值代表 了蓄积 因子 ， 即胞 内浓度与胞外浓度的比值 4 建立合适 的模型 以研 究细胞药 动学与 药物活性 之间关系 近年来 ， 已有报道 多种体内外模型应用于抗 生素胞 内抗菌活性 的评价。如 ta n o等_ 3 首次提 出了一种动态体外模型 ， 通过不断变化细胞培养 基 中的药物浓度来模拟抗生素在人体 内的药动学 特征 ， 在此基础上研究抗生素的胞 内活性。体 内 模 型 的研究 相对 较少 ， s a n d b e r g等 l_ 3 提 出了一 种 用小鼠腹膜炎模型来作为研究抗生素对胞 内金黄 色葡萄球菌活性的体 内模型。体 内模型提出了一 个“ 整体” 的概念 ， 包括机体免疫系统 、 整体药物动 力学和动态的胞内感染过程 。但是这种模型难 以 进行标准化 ， 也更难 区分抗生素的实际作用与体 内其 他影 响 。 近年来也 出现了许多准确、 快速检测胞 内菌 的方法 ， 如 qa z i 等 将 gf p l u x ab c d报告操纵 子转染到金黄色葡萄球菌中， 然后通过荧光强度 来实时监测胞 内活菌数 ； ro c h等 用 r t p c r 快速将胞内菌定量 。然而， 目前针对胞 内菌的细 胞药代动力学研究并不多见 ， 尚局 限于胞内蓄积 量的测定 2 ， 但胞内蓄积量并不能完全预测药 物 在胞 内 的抗 菌 活性 。药物 在细 胞 内的处 置是个 非常复杂的过程 ， 这促使我们必须建立一种抗 生 素的细胞药代动力学模型， 包括分析抗生素在 细 胞上的渗透与外排速率、 胞内蓄积量、 亚细胞分布 中国临床药理学与治疗学 2 0 1 2 d e c ； 1 7 ( 1 2 ) 与靶向结合 ， 进行主动转运体的鉴 定及胞 内代谢 鉴定等， 并与药物活性进行相关性分析， 建立 p k p d结合模 型， 预测 和评价抗生 素的作用及其 细 胞 内药代动力学机制 。 5 如 何优化抗生素细胞 内活性 针对胞内感染 的药物需要进入细胞 、 达 到治 疗量水平并维持足够的时问； 同时 ， 多药耐药现象 的产生及不断增加使胞 内感染的治疗 面临着更大 的挑战口 。很多 因素影 响抗 生素在胞 内的药 动 学 行 为进 而影 响其 抗 菌活性 ， 针对 这 些 因素 ， 研 究 者们探索了一系列 优化措施 ， 其 中最 为深入与广 泛 的研 究 是增 大药 物胞 内浓 度 和延长 胞 内作用 时 间 。 5 1 化学修饰对于像 j3 一 内酰胺这类不容易在 胞 内大量蓄积的药物 ， 合适 的化学修饰可 以优化 它们的细胞药动学参数 ， 使它们能更多地被细胞 摄取。j3 一 内酰胺 类 的弱酸性 特征 阻碍其 进入 细 胞 ， 通过设 计 电中性 的前药 可以解决这一 问题 。 如氨苄西林的弱碱性酯化衍生物匹氨西林可 以作 为前药大量进入细胞 ， 细胞 内的酸性环境会 促进 其酯 键裂 解生 成 有 抗 菌 活 性 的 氨苄 西 林 ， 从 而使 其 杀灭 胞 内利 斯特 菌 的能 力 大 大增 强 4 ； 已在 部 分国家上市的新一代 j3 一 内酰胺类抗生素头孢吡普 酯 亦是 基 于 此 机 理 的 前 药i 4 。新 型 喹 诺 酮 类 抗 生素 f i n a f l o x a c i n于 c 一 8位 引入 一个氰基 ， 在弱 酸性条件下显示 出卓越 的抗菌活性 ， 且在 thp 一 1 细胞 内 蓄 积 量 增 加 ， 有 望 应 用 于 胞 内 感 染 的 治 疗 。 5 2 优化药物释放 系统 设 计有效的载药 系统 使吞噬细胞有效 的内吞 、 并在胞 内释放药物是 目 前治疗胞内感染 的一个主要研究方向。这种载药 系统包括脂质体 、 多聚体和纳米粒 ， 可以针对胞内 感染靶 向给药 ， 提高药物在胞 内的治疗指数 ， 从而 避免过高的整体 给药剂量带来 的副作用 ， 增强患 者的耐受性 ， 同时也使包含的药物免受早期免疫 和酶的作用 。 脂质体主要通过 内吞作用进入胞 内， 最终通 常会进入溶酶体 中 ， 因此对积聚在溶酶体里 的病 原菌活性较好 ， 如将万古霉素包被于一种脂质体 中能显著提高其在胞 内浓度及对胞 内 mr s a 的 杀灭 能力 。相 反 ， 这种 方 式对 于寄 生 在 其 他 细 胞器里的病原菌的疗效会降低 。有种 p h敏感的 脂质体可解决这一问题 ： 它在 中性 p h下稳定 ， 而 进入显弱酸性 的细胞质后就会分解并释放内含的 药物_ 4 ， 然而其储存与给药后的稳定性差成为制 约其 发展 的一 个 主要 因素 。 人工合成的生物可降解多聚体微粒及纳米粒 显示出更好的特性 ， 在稳定性好的同时， 能将包含 的药物可控速 释放 。s e l e e m 等_ 4 将链霉素和多 西环素同时包被 于多聚纳米粒 中， 与游离药物联 用相 比， 能 显 著 降 低 胞 内 的布 鲁 氏 菌。ma y a 等l_ 4 用 o c mc载四环素能将其杀灭胞 内菌的药 效提高 6倍。另外， 近期研究表明， 某些多聚体药 物载体可以通过诱导巨噬细胞的激活状态产生抗 菌协 同作用 4 。因此 ， 在确认其 体 内安全性后 ， 这种载有抗生素的多聚体微粒及纳米粒将有望在 人 体 中应 用 。 5 3 使用外排转运体抑制剂 有些抗生素会被 细胞 主动外 排 ， 因此 ， 有 人 推测 抑制 相应 的外 排转 运体会增加药物的胞 内含量 ， 从 而增 强药物 的胞 内活性 。s e r a l 等 4 证 实 p g p抑 制 剂 维 拉 帕 米 能增强阿奇霉素对 鼠 j 7 7 4细胞 内的利斯特菌和 金 黄色 葡萄 球 菌 的杀灭 作用 ， 而 mr p及 o at 的 抑制剂吉非贝齐能使环丙沙星杀灭胞内利斯特菌 增效 2 5倍 ， 但对胞 内金葡菌没有增效作用。因 此 ， 如果 细胞 内增 加 的 药 物所 在 隔室 与 病 原 菌 所 在的隔室相 同， 使用外 排转运体抑制剂将是一种 增强 抗生 素胞 内活性 的有 效手 段 。 6 结语 尽管大量新 的抗生素层出不穷 ， 胞 内感染的 治疗仍是新药研发 中的攻关难题， 虽然现 已取得 了一定 的研 究成果 ，但 仍存在许 多问题有待解 决 ， 比如 能够 大 量杀 灭 胞 内布 鲁 氏菌 和 分 支 杆 菌 的抗 生 素还 未见 报道 。虽 然抗 生 素在胞 内的蓄 积 程度和其活性有很大关系 ， 但胞 内环境和胞内病 原菌的应答都 会改变抗 生素在胞 内的药效 。因 此 ， 在选择合理的药物治疗胞内感染前 ， 应先建立 合适 的模型来检验药物在胞 内的活性 ， 结合细胞 药物代谢动力学研究手段 ， 阐明调控其活性的环 节 。这将为指导临床合理应用抗生素提供理论依 据 ， 也为新型抗生素提供药效评价和预测的依据。 同时， 对抗生素胞 内药动学行 为的深入 了解将有 1 42 4 助于研究者探究抗生素的胞内增效策略。 参 考 文 献 r 1 va n ba mb e k e f，b a r c i a - ma c a y m ，le ma i r e s ，e t a 1 ce l l u l a r p h a r ma c o d y n a mi c s a n d p h a r ma c o k i n e t i c s of a nt i b i o t i c s： c u r r e n t v i e ws a nd p e r s p e c t i ve s j c u r t o p i n dr u g d i s c o v de v e l ，2 0 0 6 ，9( 2 ) ： 2 l 8 2 30 2 go t t e s ma n mm，f o j o t， b a t e s s e mu h i d r u g r e s i s t a nc e i n c a nc e r： r o l e o f atp d e pe n de n t t r a ns p o r t e r s j na t r e v c a n c e r ，2 0 0 2 ，2( 1 ) ： 4 8 5 8 3 z h o u f ，z h a n g j ， l i p， e t a 1 to wa r d a n e w a g e o f c e l l u l a r p h a r ma c o k i n e t i c s i n d r u g d i s c o v e r y j dr u g m e t a b re v ，2 0 1 1，4 3( 3 )： 3 3 5 3 4 5 4 r o c k e y d d，s c i d mo r e ma，b a n n a n t i n e j p，e t a 1 p r o t e i n s i n t h e c h l a my d i a l i n c l u s i o n me mb r a n e j m i c r o b e s i n f e c t ，2 0 0 2 ，4 ( 3 )： 3 3 3 3 4 0 r 5 s wa n s o n ms，f e r n a n d e z mo r e i r a e a mi c r o b i a 1 s t r a t e gy t o mul t i p l y i n ma c r op ha g es ： t h e pr e gna nt p a u s e j tr a f f i c ，2 0 0 2 ， 3( 3 ) ： 1 7 0 1 7 7 6 wa i t e s k b， t a l k i n g t o n df my c o p l a s ma p n e u mo n i a e a n d i t s r o l e a s a h u ma n p a t h o g e n j c l i n mi c r o b i o l re v ， 2 0 0 4 ， 1 7 ( 4 ) ： 6 9 7 7 2 8， t a b l e o f c o n t ents 7 va n ki r k l s ，ha y e s s f， he i n z e n r au l t r a s t r u c t u r e o f ri c k e t t s i a r i c k e t t s i i a c t i n t a i l s a n d l o c a l i z a t i o n o f c y t o s k e l e t a l p r o t e i n s j i n f e c t i mmu n ， 2 0 0 0 ，6 8 ( 8 )： 4 7 0 6 4 7 1 3 r 8 ba r n e wa l l re，ri k i h i s a y， l e e eh e h r l i c h i a c h a f f e e n s i s i n c l u s i o n s a r e e a r l y e n d o s o me s wh i c h s e l e c t i v e l y a c c u mu l a t e t r a n s f e r r i n r e c e p t o r j i n f e c t i mm u n，19 97，6 5 ( 4)： 1 4 55 1 4 61 9 j i me n e z d e b a g u e s mp ， ou a h r a n i b e t t a c h e s ， q u i n t a n a j f， e t a 1 th e n e w s p e c i e s b r u c e l l a mi c r o t i r e pl i c a t e s i n ma c r op ha ge s a nd c a u s e s d e a t h i n mu r i n e mo d e l s o f i n f e c t i o n_ j j i n f e c t d i s ，2 0 1 0 ， 2 0 2 ( 1 ) ： 3 1 0 r 1 o de p a s c a l i s r，c h o u ay，b o s i o cm ，e t a 1 de v e l o pme n t of f unc t i o na l a n d mol e c ul a r c o r r e l a t e s o f v a c c i n e i n d u c e d p r o t e c t i o n f o r a mo d e l i n t r a e e l l u l a r p a t h o g e n ，f t u l a r e n s i s l vs j p l o s p a t h o g ， 2 o l 2，8 ( 1 ) ： e l 0 0 2 4 9 4 1 1 r o y c r， ti l n e y l g t h e r o a d l e s s t r a v e l e d ：t r a n s p o r t o f l e g i o n e l l a t o t h e e n d o p l a s mi c r e t i c u l u m j j ce l l bi o 1 ，2 0 0 2 ，1 5 8( 3 )： 4 1 5 4 1 9 r 1 2 pi z a r r o c e r d a j， co s s a r t p s u b v e r s i o n o f c e l l u l a r f u n c t i o n s b y l i s t e r i a mo n o c y t o g e n e s j j p a t h o l ， ch i n j cl i n ph a r ma c o l th e r 2 0 1 2 de c ； 1 7 ( 1 2 ) 2 0 06，2 08 ( 2 )： 21 5 223 1 3 e a r l y j ， b e r mu d e z l e mi mi c r y o f t h e p a t h o g e n i c my c o b a c t e r i u m v a c u o l e i n v i t r o e l i c i t s t h e b a c t e r i a l i n t r a c e l l u l a r p h e n o t y p e ， i n c l u d i n g e a r l y o n s e t ma c r o p h a g e d e a t h j i n f e c t i mm u n ，2 0 1 1 ，7 9( 6 ) ： 2 41 2 24 22 r 1 4 s t e e l e mo r t i me r oth e s a l mo n e l l a c o n t a i n i n g v a c u o l e ： mo v i n g wi t h t h e t i me s j c u r r op i n mi c r o b i o l ，2 0 0 8 ，1 1 ( 1 ) ： 3 8 4 5 1 5 r e i s r s ，ho r n f e n t e r 0 p a t h o g e n i c e s c h e r i c h i a c o l i ，s a mo n e l l a ，s h i g e l l a a n d ye r s i n i a ： c e l l u l a r a s p e c t s o f h o s t b a c t e r i a i n t e r a c t i o n s i n e n t e r i c d i s e a s e s j gu t p a t h o g ， 2 0 1 0 ，2( 1 ) ： 8 r 1 6 ku b i c a m ，gu z i k k，ko z i e l j ，e t a 1 a p o t e n t i a l n e w p a t h wa y f o r s t a p h y l o c o c c u s a u r e u s d i s s e mi n a t i o n：t h e s i l e n t s u r v i v a l o f s a u r e u s p h a g o c y t o s e d b y h u ma n mo n o c y t e d e r i v e d ma c r o p h a g e s j pl o s on e ，2 0 0 8，3( 1 ) ： e l 4 0 9 1 7 p u j o l c， b l i s k a j b th e a b i l i t y t o r e p l i c a t e i n ma c r o pha g e s i s c on s e r ve d be t we e n yer s i ni a pe s t i s a n d ye r s i n i a p s e u d o t u b e r c u 1 o s i s j i n f e c t i mmu n ， 2 0 0 3，7 1( 1 0 ) ： 5 8 9 2 5 8 9 9 r 1 8 l u c k n e r p， br a n d s c h mi n t e r a c t i o n o f 3 1 b e t a - l a c t a m a n t i b i o t i c s wi t h t h e h + p e p t i d e s y mp o r t e r pept2：a na l ys i s o f a f f i ni t y c o ns t a n t s a nd c o mpa r i s o n wi t h p e p t1 j e u r j p h a r m b i o p h a r m， 2 0 0 5 ，5 9( 1 ) ： 1 7 2 4 1 9 ga n a p a t h y me， hu a n g w，r a j a n d p ，e t a 1 b e t a l a e t a m a n t i b i o t i c s a s s u b s t r a t e s f o r octn2 ，a n o r g a n i c c a t i o n c a r n i t i n e t r a n s p o r t e r j j b i o l ch e m ，2 0 0 0 ，2 7 5 ( 3 )： 1 6 9 9 1 7 0 7 2 o 张秀红 b 一 内酰 胺 抗 生素 的 肠道 及 肾脏 转 运机 制 j 中国临床药 理学 与治疗学 ，2 0 0 3 ，8( 3 ) ： 2 5 2 2 54 2 1 c a r r y n s ， c h a n t e u x h， s e r a l c， e t a 1 i n t r a c e l l u l a r p h a r ma c o d y n a mi c s o f a n t i b i o t i c s j i n f e c t d i s cl i n no r t h am 。2 00 3，1 7 ( 3)： 61 5 63 4 2 2 - 2 3 2 4 bo u n d s s j ，na k k u l a r， w a i t e r s j df l u o r o q u i n o l o l i e t r a ns po r t by hu m a n mo no c y t e s! c ha r a c t e r i z a t i o n a n d c o mp a r i s o n t o o t h e r c e l l s o f my e l o i d 1 i n e a g e j an t i mi c r o b ag e n t s ch e mo t h e r ， 2 0 0 0， 4 4 ( 1 o)： 2 6 09 26 14 br a y t o n j j ，ya n g q，na k k u l a rj ，e t a 1 an i n v i t r o mo d e l o f c i p r o f l o x a c i n a n d mi n o c y c l i n e t r a n s p o r t b y o r a l e p i t h e l i a l c e l l s j j p e r i o d o n t o l ， 2 0 0 2，7 3( 1 1 ) ： 1 2 6 7 1 2 7 2 va n b a mb e k e f，ca r r y n s，s e r a l c，e t a 1 ce l l u l a r p h a r ma c o k i n e t i c s a n d p h a r ma c o d y n a mi c s o f t h e g l y c o pe p t i d e a nt i bi ot i c or i t a va n c i n (ly33 33 2 8) i n a 中国临床药理学与治疗学 2 0 1 2 d e c ； 1 7 ( 1 2 ) mo d e l o f j 7 7 4 mo u s e ma c r o p h a g e s j an t i mi c r o b ag e n t s ch e mo t h e r ，2 0 0 4，4 8 ( 8 )： 2 8 5 3 2 8 6 0 2 5 b a r c i a ma c a y m ，mo u a d e n f，mi n g e o t l e c l e r c q m p，e t a 1 ce l l ul a r pha r ma c o ki ne t i c s of t e l a v a nc i n。 a n o v e l l ip o g 1 y c 0 p e p t i d e a n t i b i o t i c ， a n d a n a l y s i s o f l y s o s o ma l c h a n g e s i n c u l t u r e d e u k a r y o t i c c e l l s( j 7 7 4 mo u s e ma c r o p h a g e s a n d r a t e mb r y o n i c f i b r o b l a s t s ) j j an t i mi c r o b c h e mo t h e r ，2 0 0 8 ，6 1( 6 ) ： 1 2 8 8 1 29 4 2 6 ma r q u e z b ，c a c e r e s ne，mi n g e o t l e c l e r c q mp， e t a1 i de nt i f i c a t i on of t h e e f f l u x t r a ns p or t er o f t he f l u o r o q u i n o l o n e a n t i b i o t i c c i p r o f l o x a c i n i n mu r i n e m a c r o p h a g e s ： s t u d i e s wi t h c i p r o f l o x a c i n r e s i s t a n t c e l l s j an t i mi c r o b a g e n t s c h e mo t h e r ， 2 0 0 9 ， 5 3( 6 ) ： 241 o一 24 16 2 7 l e ma i r e s ，va n b a mb e k e f ，mi n g e o t l e c l e r c q m p， e t a 1 m o d u l a t i o n o f t h e c e l l u l a r a c c u mu l a t i o n a n d i n t r a c e l l u l a r a c t i v i t y o f d a p t o my c i n t o wa r d s p h a g o c y t i z e d s t a p h y l o c o c c u s a u r e u s b y t h e p g l y c o p r o t e i n ( m dr1 )e f f l u x t r a n s p o r t e r i n h u ma n thp 一 1 ma c r o p h a g e s a n d ma d i n - d a r b y c a n i n e k i d n e y c e l l s j a n t i mi c r o b ag e n t s c h e mo t h e r ， 2 0 0 7 ， 5 1( 8 ) ： 2 74 8 2 75 7 2 8 t u l k e n s p， t r o u e t at h e u p