药剂学课件：药物的鉴别.ppt

药物分析 药物的鉴别试验 概述 1 定义：药物的鉴别试验（identification test）是根据药物的分子结构、理化性质， 采用化学、物理化学或生物学方法来判断 药物的真伪。 2 它是药品质量检验中的首项任务。 3 它是确认试验，不能用来鉴别未知物。 鉴别试验的项目 一 性状 药物的性状（description）反映了药物特有 的物理性质，一般包括外观、溶解度和物 理常数等。 1 外观 指药物的聚集状态、晶型、色泽以 及臭、味等性质。 维生素b1：本品为白色结晶或结晶性粉末 ；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空气中 迅即吸收约4%的水分。 鉴别试验的项目 2 溶解度 它是药物的一种物理性质，在一 定程度上反映了药品的纯度。根据其描述 ，可以为分析方法和制剂提供溶剂选择的 依据。药典的描述：极易溶解、易溶、溶 解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或 不溶。（对应的英文描述为：very soluble 、freely soluble 、 soluble 、sparingly soluble 、slightly soluble 、very slightly soluble 、 practically insoluble or insoluble ） ch.p(2005)关于药品溶解行为的描 述 usp 关于药品溶解行为的描述 示例 磺胺嘧啶：本品在乙醇或丙酮中微溶，在 水中几乎不溶；在氢氧化钠试液中易溶， 在稀盐酸中溶解。 苯巴比妥：本品在乙醇或乙醚中溶解，在 氯仿中略溶，在水中极微溶解；在氢氧化 钠或碳酸钠溶液中溶解。 鉴别试验的项目 3 物理常数 它是鉴定药品质量的重要指标 。其结果不仅对药品具有鉴别意义，也反 映了该药品的纯杂程度。药典收载：相对 密度、馏程 、熔点 、凝点 、比旋度 、折 光率、吸收系数等。 （1）熔点：熔点系指一种物质按规定方法 测定，由固体熔化成液体的温度、熔融同 时分解的温度或在熔化时自初熔至全熔的 一段温度。 鉴别试验的项目 注意事项：1）在药典附录中有三种方法，除注明 外，一般为测定易粉碎固体药品的第一法。 2）由于方法中采用传温液，收载的熔点一般在 200以下。 3）熔点数值的精度一般为1 ，也可书写至0.5 。 4）限度范围应该包括该品种的初熔和全熔温度， 一般为2-4 。 5）熔融同时分解的品种要在标准中标明。 如布洛芬：本品的熔点（附录xx）为74.577.5 。 鉴别试验的项目 （2）比旋度 在一定波长和温度下，偏振光透过 长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液时测 得的旋光度称为比旋度。它是反映手性药物特性 及纯度的主要指标，可用以区分药品、检查纯度 或测定制剂的含量。 注意：1）计算时按干燥品或无水物计算。 2）应写明浓度和溶剂，若测定温度不是20 ， 应注明。 3）测定旋光度时，应能准确至0.01。 鉴别试验的项目 （3）吸收系数 指在给定的波长、溶剂和温度等 条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时 的吸收度。一般有摩尔吸收系数和百分吸收系数 两种表示方式。后者是中国药典收载的方法，以 表示。用于考察原料药的质量，以及本品制剂用 紫外法测定含量的依据。 盐酸甲氧明：取本品，精密称定，加水溶解并定 量稀释制成每1ml约含30g的溶液，照分光光度法 ，在290nm的波长处测定吸收度，吸收系数（ ）为133144。 鉴别试验的项目 （二）一般鉴别试验(general identification test ) 依据某一类药物的化学结构或理化性质的 特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。 无机药物-其组成的阴离子和阳离子的特 殊反应。 有机药物-典型的官能团反应。 注意：如有干扰或为混合物，则不适合。 有机氟化物 方法：取供试品约7mg，照氧瓶燃烧法进行 有机破坏，用水20ml和0.01mol/l 氢氧化钠 溶液6.5ml为吸收液，待燃烧完全后，充分 振摇，取吸收液2ml，加茜素氟蓝试液 0.5ml，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml ，用水稀释至4ml，加硝酸亚铈试液0.5ml ，即显蓝紫色，同时做空白对照试验。 有机氟化物 原理： 有机酸盐 1 水杨酸 方法：取供试品的稀溶液，加三氯化铁试 液1滴，即显紫色。 原理：本品在中性或弱酸性条件下，与三 氯化铁试液生成配位化合物（中性，红色 ；弱酸性，紫色。) 有机酸盐 （2）酒石酸盐 方法：取供试品的中性溶液，置洁净的试 管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中 加热，银即游离并附在 试管内壁成银镜。 原理：利用其还原性。反应式见书。 芳香第一胺类 方法：取供试品约50mg，加稀盐酸1ml， 必要时缓缓煮沸使溶，放冷，加亚硝酸钠 溶液（0.1mol/l）数滴，滴加碱性-萘酚试 液数滴，视供试品不同，生成橙黄色到猩 红色沉淀。 原理：先重氮化，再在碱性条件下与-萘酚 偶合反应。 具体反应式见书。 托烷生物碱类 方法：取供试品约10mg,加发烟硝酸5滴， 置水浴上蒸干，即得黄色的残渣，放冷， 加乙醇2-3滴，加固体氢氧化钾一小颗，即 显深紫色。 原理： 无机金属盐 1）钠盐、钾盐 、钙 盐的颜色反应 钠离子-显鲜黄色 钾离子-显紫色 钙离子-显砖红色 2）铵盐 无机酸根 1）氯化物 鉴别一：与银离子产生氯化银沉淀。 鉴别二：产生氯气，氧化碘离子产生碘， 使淀粉变蓝。 2）硫酸盐 鉴别一：与钡离子产生硫酸钡沉淀。 鉴别二：与铅离子产生硫酸铅沉淀。 鉴别试验的项目 （三）专属鉴别试验（specific identification test） 是证实某一种药物的依 据，系根据每一种药物化学结构的差异及 其所引起的物理化学特性不同，选用某些 特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真 伪。具体内容在各类药物中介绍。 三 鉴别方法 （一）化学法 包括呈色反应，沉淀反应， 产生荧光的反应，生成气体的反应等。具 体见书。还可以测定生成物的熔点，专属 性强，但烦琐，耗时，现在应用较少。 （二）光谱法 包括紫外光谱法和红外光谱法。 化学鉴别法 1 呈色反应鉴别法 含有酚羟基或水解后产生酚羟基-三氯化铁呈色 反应； 芳酸及其酯类、酰胺类-异羟污酸铁反应； 结构中含有脂肪氨基-茚三酮呈色反应； 含有或能产生芳伯氨基-重氮化-偶合呈色反应 ； 氧化-还原反应显色。 化学鉴别法 2 沉淀生成反应鉴别法 与重金属离子的沉淀反应； 与硫氰化铬铵的沉淀反应（生物碱及其盐 ，具有芳香环的有机碱及其盐）； 其他沉淀反应 化学鉴别法 3 荧光反应鉴别法 4 气体生成反应鉴别法 5 测定生成物的熔点。 紫外光谱鉴别法 常用以下方法： 1）测定最大吸收波长，或同时测定最小吸收波长 ； 2）规定一定浓度的供试溶液在最大吸收波长处的 吸收度； 3）规定吸收波长和吸收系数法； 4）规定吸收波长和吸收度比值法； 5）经化学处理后，测定反应产物的吸收光谱特性 ； 6）比较供试品和对照品溶液紫外吸收光谱的一致 性。具体示例见书。 红外光谱鉴别法 红外光谱法是分子的振动-转动光谱，特征 性强。用于鉴别组分单一、结构明确的原 料药。 中国药典采用与对照图谱进行比较。usp 采用对照品法。 中国药典收载的图谱：在分辨率2cm-1条件 下绘制，基线在90%透光率以上，最强吸 收峰在10%透光率以下。 其他比较新的方法 1近红外光谱法通过测定被测物质在近红外区（ 750-2500nm或12800-4000cm-1）的特征光谱并 利用适宜的化学计量学方法提取相关信息后，对 被测物质进行定性定量分析的一种分析技术。 2原子吸收光谱法利用原子蒸气可以吸收由该元 素作为阴极的空心阴极灯发出的特征谱线的特性 ，根据供试溶液在特征谱线处的最大吸收和特征 谱线的强度减弱程度可以进行定性定量分析。 其他比较新采用的方法 3 nmr通过测定供试品指定基团上的质 子峰的化学位移和偶合常数进行药物的鉴 别。 4x射线粉末衍射法主要用于结晶物质的 定性定量分析。防止药物的不同晶型的杂 质的量。 （三）色谱鉴别法 tlc-比较斑点的rf（比移值）和颜色。 hplc和gc-比较保留时间。 质谱法比较其质谱图中离子峰强度和相 互关系。 示例见书。 （四）生物学法 利用微生物或实验动物进行鉴别的方法。 如利用青霉素钠溶液对金黄色葡萄球菌的抑菌作 用进行鉴别。 方法：取本品与已知的青霉素适量，分别加灭菌 水制成每1ml 中约含50g的溶液，各取1ml，加 入不少于200单位的青霉素酶溶液1ml，在37灭 活1小时后，取灭菌滤纸片，分别用上述溶液浸湿 ，并用滤纸吸去多余的液体，置于摊布金