XX人民医院检验科生化室作业指导书-ISO15189质量管理体系范本文件（第五册） .doc

iso15189 质量管理体系范本文件（第五册）质量管理体系范本文件（第五册） 生化室作业指导书生化室作业指导书 文件编号：abcd-3-sf-0161 第第 a 版版 编制：编制： 审核：审核： 批准：批准： 生效日期：生效日期：2006 年年 8 月月 8 日日 xxxx 人民医院检验科人民医院检验科 文件编号： abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 目 录 第 2 页 共 221 页 目目 录录 序号序号主主 题题 内内 容容 代代 号号页页 号号 1 血清总胆红素测定 abcd-3-sf-01 6 2 血清直接胆红素测定 abcd-3-sf-02 10 3 血清总蛋白液体双缩脲法测定 abcd-3-sf-03 13 4 血清白蛋白溴甲酚绿法测定 abcd-3-sf-04 16 5 血清丙氨酸氨基测定 abcd-3-sf-05 19 6 血清天门冬氨酸氨基测定 abcd-3-sf-06 23 7 血清碱性磷酸酶测定 abcd-3-sf-07 27 8 血清 -淀粉酶测定 abcd-3-sf-08 31 9 血清葡萄糖己糖激酶法测定 abcd-3-sf-09 35 10 血清尿素氮谷氨酸测定 abcd-3-sf-10 39 11 血清肌酐苦味酸法测定 abcd-3-sf-11 43 12 血清尿酸 tbhba 法测定 abcd-3-sf-12 46 13 血清总胆固醇酶试剂法测定 abcd-3-sf-13 50 14 血清甘油三酯酶试剂法测定 abcd-3-sf-14 54 15 血清镁二甲苯胺蓝法测定 abcd-3-sf-15 58 16 血清无机磷磷钼酸法测定 abcd-3-sf-16 61 17 血清钙偶氮胂法测定 abcd-3-sf-17 65 18 血清载脂蛋白 a1 测定 abcd-3-sf-18 68 19 血清载脂蛋白 b 测定 abcd-3-sf-19 72 20 血清高密度脂蛋白胆固醇测定 abcd-3-sf-20 76 21 血清低密度脂蛋白胆固醇测定 abcd-3-sf-21 80 22 血清肌酸激酶(ck) 法测定 abcd-3-sf-22 84 23 血清肌酸激酶 mb 同工酶测定 abcd-3-sf-23 88 24 血清乳酸脱氢酶 dgkc 法测定 abcd-3-sf-24 92 文件编号： abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 目 录 第 3 页 共 221 页 25 血清乳酸脱氢酶测定 abcd-3-sf-25 96 26 血清 a-羟丁酸脱氢酶测定 abcd-3-sf-2699 27 血清总胆汁酸循环酶法测定 abcd-3-sf-27103 28 olympus 钠、钾、氯离子测定 abcd-3-sf-28106 29 血清二氧化碳酶试剂法测定 abcd-3-sf-29112 30 血清糖化蛋白四氮唑蓝法测定 abcd-3-sf-30115 31 尿液或脑脊液总蛋白测定 abcd-3-sf-31118 32 血清 g-谷氨酰转移酶测定 abcd-3-sf-32121 33 钾的电极电位法测定 abcd-3-sf-33 124 34 钠离子电极电位法测定 abcd-3-sf-34 127 35 氯的电极电位法测定 abcd-3-sf-35 132 36 钙的比色法测定 abcd-3-sf-36 137 37 血、尿、脑脊液葡萄糖测定 abcd-3-sf-37 142 38 血、尿液尿素氮（bun）测定 abcd-3-sf-38 147 39 血、尿液肌酐（cr）测定 abcd-3-sf-39 152 40 血清天门冬氨酸测定 abcd-3-sf-40 157 41 动脉血气电极法测定 abcd-3-sf-41 163 42 血清乳酸脱氢酶速率法测定 abcd-3-sf-42 168 43 血、尿液淀粉酶两点法测定 abcd-3-sf-43 173 44 血清蛋白电泳法检查 abcd-3-sf-44 178 45 高铁血红蛋白还原试验比色法 abcd-3-sf-45 181 46 血清二氧化碳酶反应终点法测定 abcd-3-sf-46 183 47 正常值、病理值复合控制品 abcd-3-sf-47 188 48 载脂蛋白 a1、b 复合控制品 abcd-3-sf-48 190 49 复合校准品 abcd-3-sf-49 192 50 载脂蛋白 a1、载脂蛋白 b 校准品 abcd-3-sf-50 194 文件编号： abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 目 录 第 4 页 共 221 页 51 高、低密度脂蛋白胆固醇校准品 abcd-3-sf-51 196 52 722 分光光度计维护规程 abcd-3-sf-52 198 53 血气分析仪操作维护规程 abcd-3-sf-53 201 54 medical 低温冰箱操作维护规程 abcd-3-sf-54 203 55 medica 90 纯水机操作维护规程 abcd-3-sf-55 205 56 au1000 ise 分析仪操作维护规程 abcd-3-sf-56 207 57 au1000 生化分析仪操作维护规程 abcd-3-sf-57 209 58 电泳仪操作维护规程 abcd-3-sf-58 214 59 干化学分析仪操作维护规程 abcd-3-sf-59 217 60 离心机操作维护规程 abcd-3-sf-60 222 文件编号： abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 修 订 页 第 5 页 共 221 页 修修 订订 页页 序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 文件编号：abcd-3-sf-01 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(t-bil)测定测定 第 6 页 共 221 页 血血清清总总胆胆红红素素 ( (t t- -b bi il l) )测测定定 1 1. . 实实验验原原理理 血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883 年 ehrlich 提出的重氮法胆红素测量法 1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方 法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一 种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。 申能总胆红素试剂是改良的重氮法。使用一种稳定的重氮盐，2,4-二氯苯胺重氮盐 （dca） ，与胆红素反应，形成红色偶氮化合物，它在540nm 吸光度最大。在540/600nm 时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。 胆红素 +dca 红色偶氮化合物 表面活性剂 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或edta 血浆，应避光保存。 3 3. . 标标本本存存放放： 1525保存可稳定 2 天；28保存可稳定 7 天；-20保存可稳定 3 个月，如冰冻 保存，不可反复冻融！。 4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下避光保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒（141 0817170 1 试剂 1试剂 2） 6.1.1 试剂组成 试剂 1：664 ml 磷酸 缓冲液 40mmol/l 氯化钠 9g/l 表面活性剂 ,稳定剂 适量 试剂 2：616 ml 2,4-二氯苯胺重氮盐 1mmol/l 盐酸 30mmol/l 表面活性剂 适量 文件编号：abcd-3-sf-01 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(t-bil)测定测定 第 7 页 共 221 页 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18 个月。 试剂 2 必需避光保存。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口； 避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15 分钟， 接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。 6.2 校准品： 使用 diasys 公司提供的trucal u 校准品对自动分析仪进行校准，参见生化 检验校准品和质控品.sop 文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.sop 文件 7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯au1000 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪项目测定参数.sop 文件。 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪操作规程.sop 文件。 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平i 与 ii 质控做为未知标本进行分析， 以 2s 为质控警告限， 3s 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .sop 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 trucal u 复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报 告可靠的检测结果无需手工计算 ，以 mol/l 报告。手工测定计算方法为： au 总胆红素 (mol/l) = 校准液浓度 as 1 12 2. . 参参考考值值范范围围： 婴儿： 出生 24 小时内 150mol/l 出生第 2 天 22-193mol/l 出生第 3 天 12-217mol/l 出生第 46 天 1.7-216mol/l 儿童： 一个月 3.4-17mol/l 成年人： 1.7-21mol/l 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应 文件编号：abcd-3-sf-01 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(t-bil)测定测定 第 8 页 共 221 页 建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义： 胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在 血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生 成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。 溶血（肝前黄疸） 、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红 素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为gilbert 综合症。 由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总 胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测 水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围： 1.2513mol/l 14.2 精密度：精密度的评估是根据nccls 推荐的标准方法 5，au1000 批内精密度小于 3% 或 sd0.07，总精密度小于5%或 sd0.10。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的 nccls 的规则。 批内精密度 n=20 x (mol/l) s (mol/l) cv (%) 批间精密度 n=20 x (mol/l) s (mol/l) cv (%) 样品 1 15.220.4643.05 样品 1 14.880.4082.74 样品 2 17.440.4052.32 样品 2 19.660.6863.49 样品 3 82.600.7850.95 样品 3 79.522.2742.86 14.3 方法学比较： 本公司的试剂盒 (y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 247 个样品进行t- bil 检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x-0.00mol/l；r=1.000。 14.4 灵敏度： 本试剂的检测限为1.2mol/l。 14.5 病人结果可报告范围：1.2513mol/l 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：本法线性上限为513mol/l。如样品测定值超过上限时，应将样 品用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 当新生儿血清标本测定结果总胆红素340mol/l 时，在经过复 查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法线性上限为513mol/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠 溶液作 1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l，血红蛋白浓度 5.00g/l，甘油 三酯浓度 22.6mmol/l 时没有观察到干扰。 文件编号：abcd-3-sf-01 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(t-bil)测定测定 第 9 页 共 221 页 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1.thomas l ed. clinical laboratory diagnostics. 1st ed. frankfurt:th-books verlagsgesellschaft; 1998.p.192-202. 2.tolman kg, rej r. liver function. in: burtis ca, ashwood er. editors. tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. philadelphia: w. b. saunders company; 1999. p.1125-77. 3.rand rn, di pasqua a. a new diazo method for the determination of bilirubin. clin chem 1962;6:570-8. 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：abcd-3-sf-02 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(t-bil)测定测定 第 10 页 共 221 页 血清直接胆红素（血清直接胆红素（d-bild-bil）测定）测定 1.1. 实验原理实验原理 直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐形成重氮化合物，在酸性条件下呈红色。 2.2. 标本：标本： 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或edta血浆，应避光保存。 3.3. 标本存放：标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存， 不可反复冻融！。 4.4. 标本运输：标本运输：常温条件下避光保存运输。 5.5. 标本拒收标准：标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6.6. 实验材料实验材料 6.1 试剂：申能总胆红素试剂盒：141 0827170 1 试剂试剂2 6.1.1 试剂组成 试剂1：1664ml edta-na2 0.07mmol/l 氯化钠 6.6g/l 氨基磺酸 70mmol/l 试剂2：616ml 2,4-二氯苯胺重氮盐 0.09mmol/l 盐酸 130mmol/l edta-na2 0.02mmol/l 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。 试剂 2必需避光保存。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果 接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。 6.2 校准品：使用 diasys公司提供的 trucal u校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验 校准品和质控品.sop文件 文件编号：abcd-3-sf-02 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(t-bil)测定测定 第 11 页 共 221 页 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.sop文件 7.7. 仪器仪器：奥林巴斯au1000生化分析仪 8.8. 操作步骤操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪项目测定参数.sop文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪操作规程.sop文件 检验结果的判断与分析检验结果的判断与分析 10.10. 质量控制：质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平i与ii质控做为未知标本进行分析，以2s为质控警 告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.sop文件。 11.11. 计算方法计算方法 以trucal u复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可 靠的检测结果无需手工计算，以mol/l报告 。手工测定计算方法为： au 直接胆红素(mol/l) =-校准液浓度 as 12.12. 参考值范围：参考值范围：6.8mol/l 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自 己的参考值。 13.13. 临床意义：临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白 蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸 酯由胆管排入肠道。 溶血（肝前黄疸） 、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高， 形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功 能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能 检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和 直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。 14.14. 操作性能操作性能 14.1 线性范围：1.7171mol/l 14.2 精密度：精密度的评估是根据nccls推荐的标准方法5，au1000批内精密度小于4%或sd0.04，总精 密度小于5%或sd0.07。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls的规则。 批内精密度 n=20 x (mol/l) s (mol/l) cv (%) 批间精密度 n=20 x (mol/l) s (mol/l) cv (%) 样品 1 6.00.203.34 样品 1 6.20.193.12 文件编号：abcd-3-sf-02 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(t-bil)测定测定 第 12 页 共 221 页 样品 2 12.80.121.00 样品 2 13.00.191.46 样品 3 36.40.260.71 样品 3 35.40.461.30 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对85个样品进行dbil检测，将检测结 果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.95x+0.68mol/l；r=0.995。 14.4 灵敏度：1.7mol/l。 14.5 病人结果可报告范围：1.7171mol/l 1515 超出范围结果处理超出范围结果处理 本法线性上限为171mol/l。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶 液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。 16.16. 病危报警值的处理病危报警值的处理 无。 17.17. 方法局限性方法局限性 17.1 本法线性上限为171mol/l。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重 新测定，结果乘以2。 17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l，甘油三酯浓度22.6mmol/l时没有观察到干扰。 血红蛋白浓度0.50g/l将产生干扰。 18.18. 补救措施：补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 19.19. 参考文献参考文献： tietz, n.w.(ed), fundamentals of clinical chemistry, 3rd edition, w.b. saunders,1987. van den bergh, a. and mueller, p., biochem z,77:90,1916 nccls, interference testing in clinical chemistry, ep7-p,1986. young, d.s., effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th edition, aacc press, 1995. nccls, evaluation protocol ep5-t2,1992. rand, r. n., di pasque, a., clin chem 1962; 8: 570 henry, j., cannon, d. c., winkelmann, j. v., clinical chemistry, principles and technics, harper 1998.p.644-7. 2. johnson am, rohlfs em, silverman lm. proteins. in: burtis ca, ashwood er. editors. tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. philadelphia: w. b. saunders company; 1999.p.477-540. 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：abcd-3-sf-04 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血血清清白白蛋蛋白白溴溴甲甲酚酚绿绿法法测测定定 第 16 页 共 221 页 血血清清白白蛋蛋白白（ a al lb b）溴溴甲甲酚酚绿绿（ b bc cg g）法法测测定定 1 1. .实实验验原原理理 在 ph 值 4.2 时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm 处比色，颜 色的深度与白蛋白浓度成正比。 ph4.2 白蛋白 +溴甲酚绿 -绿色化合物 2 2. . 标标本本采采集集 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或edta 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放 留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下（1525）可以稳定一 周，在冰箱保存的条件下（28）稳定一个月， -20保存至少可以稳定3 个月。 4 4. . 标标本本运运输输 室温条件下运输 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。 6 6. . 实实验验材材料料 : : 6.1 上海申能白蛋白测定试剂盒（货号：11202271701，870ml） 6.1.1 试剂组成 柠檬酸盐缓冲液 ph 4.2 30mmol/l 溴甲酚绿 (bcg) 0.26mmol/l 表面活性剂 适量 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有 效期为 24 个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.sop 文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.sop 文件 7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯au1000 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪项目测定参数.sop 文件 文件编号：abcd-3-sf-04 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血血清清白白蛋蛋白白溴溴甲甲酚酚绿绿法法测测定定 第 17 页 共 221 页 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯au1000 生化分析仪操作规程.sop 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平i 与 ii 质控做为未知标本进行分析， 以 2s 为质控警告限， 3s 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .sop 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 trucal u 复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结 果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为： au 白蛋白 (g/l)= 校准液浓度 as 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 成人 3552g/l 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应 建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义： 白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并是维持血浆渗透压的主要 组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白蛋白降低多 见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助 于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外，白蛋白量反映了个体的健康与营养状况，因此可用 于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围 260g/l 14.2 精密度：重复性的评估是根据nccls 推荐的标准方法，au1000 批内重复性小于 3%，总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls 的规则。 批内精密度 n=20 x (g/l) s (g/l) cv (%) 天间精密度 n=20 x (g/l) s (g/l) cv (%) 样品 1 35.20.30.91 样品 1 33.50.51.58 样品 2 45.00.51.12 样品 2 43.20.61.44 样品 3 68.91.21.79 样品 3 67.31.11.60 14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 59 个样品进行alb 检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x-1.1g/l；r=0.998 文件编号：abcd-3-sf-04 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血血清清白白蛋蛋白白溴溴甲甲酚酚绿绿法法测测定定 第 18 页 共 221 页 14.4 灵敏度： 2g/l。 14.5 病人结果可报告范围：260g/l，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯 化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理 本法线性上限为60g/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法线性上限为60g/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 17.2 干扰物质： 当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l，胆红素浓度684mol/l，血红蛋白浓度 4.00g/l，甘油三酯浓度5.63mmol/l 时没有观察到干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1. doumas, b., watson, w. a., biggs, h. g., clin chim acta 1971; 31: 87-96 2. webster, d., clin chim acta 1974; 53: 109-115 3. tietz, n. w.: textbook of clinical chemistry, 2nd edition, w. b. saunders company, philadelphia, 1994: 703 4. aacc press friendman,r.b.,and young,d.s.,effects of disease on clinical laboratory tests,2nd edition,1989. 5. rodkey,f.l.,clin chem,2:478;1965 6. doumas,b.t.,watson,w.a.and biggs,h.g.,clin chem acta 31:87-96,1971. 7. tietz,n.w.,clinical guide to laboratory tests,2nd edition,w.b.saunders,1990. 8. nccls,interference testing in clinical chemistry,ep7-p,1986. 9. young,d.s.,effects of drugs on clinical laboratory tests,4th edition,aacc press,1995. 10. nccls,guideline ep5-t2,1992. 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：abcd-3-sf-05 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血血清清丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定 第 19 页 共 221 页 血血清清丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 i if fc cc c 推推荐荐方方法法 测测定定 1 1. .实实验验原原理理 国际临床化学学会(ifcc)推荐的紫外连续监测法。 alt l-丙氨酸 + -酮戊二酸 丙酮酸 + l-谷氨酸 丙酮酸 + nadh + h+ l-乳酸 + nad+ + h2o 加入磷酸吡哆醛（p-5-p）是为了稳定alt 活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造 成测定结果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)1 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备： 12 小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或edta 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放： 3 天内的活性损失：28保存： 1 和严重肝病有关，常见慢性肝病。 1 14 4. . 操操作作性性能能 文件编号：abcd-3-sf-05 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血血清清丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定 第 21 页 共 221 页 14.1 线性范围 4800u/l 14.2 精密度：精密度的评估是根据nccls 推荐的标准方法，au1000 批内精密度小于 3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls 的规则。 不含磷酸吡哆醛 批内 精密度 n=20 x (u/l) s (u/l) cv (%) 天间 精密度 n=20 x (u/l) s (u/l) cv (%) 样品 1 22.80.703.08 样品 1 22.21.386.22 样品 2 42.60.681.60 样品 2 44.81.172.62 样品 3 99.30.920.92 样品 3 1011.021.00 含磷酸吡哆醛 批内 精密度 n=20 x (u/l) s (u/l) cv (%) 批间 精密度 n=20 x (u/l) s (u/l) cv (%) 样品 1 33.30.992.96 样品 1 33.81.253.71 样品 2 72.11.361.88 样品 2 72.02.042.83 样品 3 1331.761.32 样品 3 1282.772.16 14.3 方法学比较：不含磷酸吡哆醛 本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 78 个样品进行 alt 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下： y=1.00x+0.00u/l；r=0.999。 含磷酸吡哆醛 本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 80 个样品进行alt 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+0.00u/l；r=0.994。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为4u/l。 14.5 病人结果可报告范围 4u/l-800u/l 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理 本法对 alt 活力检测的最大a/min 在 340、334nm 为 0.16,在 365nm 为 0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/l 氯化钠溶液作1：9 稀释，重 新测定，结果乘以10。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 文件编号：abcd-3-sf-05 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血血清清丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定 第 22 页 共 221 页 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法对 alt 活力检测的最大a/min 在 340、334nm 为 0.16,在 365 nm 为 0.08。当 样品测定值超过上限时，应将样品用9g/l 氯化钠溶液作1：9 稀释，重新测定，结果乘以 10。 17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l，胆红素浓度 684mol/l，血红蛋 白浓度 4.00g/l，甘油三酯浓度 22.6mmol/l 时没有观察到干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1. thomas l. alanine aminotransferase(alt), aspartate aminotransferase(ast). in: thomas l, editor. clinical laboratory diagnostics. 1st ed. frankfurt: th- books verlagsgesellschaft; 1998.p.55-65. 2. moss dw, henderson ar. clinical enzymology. in: burtis ca, ashwood er. editors. tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. philadelphia: w. b. saunders company; 1999. p.617-721. 3. bergmeyer hu, horder m, rej r. international federation of clinical chemistry (ifcc) scientific committee, analytical section: approved recommendation (1985) on ifcc methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. part 3. ifcc method for alanine aminotransferase(l- alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase, ec 2.6.1.2). j clin chem clin biochem 1986; 24:481-95. 4. lorentz k, rohle g, siekmann l. einfuhrung der neuen standardmethoden 1994 zur bestimmung der katalytischen enzymkonzentrationen bei 37. dg klinische chemie mitteilungen 1995;26:190-2. 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：abcd-3-sf-06 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808 主题内容 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 第 23 页 共 221 页 血清天门冬氨酸氨基转移酶血清天门冬氨酸氨基转移酶 ifccifcc 推荐方法测定推荐方法测定 1 1. . 实实验验原原理理： 国际临床化学学会(ifcc)推荐的紫外连续监测法。 l-天门冬氨酸 + -酮戊二酸 ast 草酰乙酸 +l-谷氨酸 草酰乙酸 + nadh +h+ mdh 苹果酸脱氢酶 l-苹果酸 +nad+h2o 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备： 12 小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或edta 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放： 3 天内的活性损失：28保存： 1 和严重肝病有关，常见慢性肝病。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围 2-800u/l。 14.2 精密度：精密度的评估是根据nccls 推荐的标准方法，au1000 批内精密度小于 3%，总精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls 的规则。 不含磷酸吡哆醛 批内精密度 n=20 x (u/l) s (u/l) cv (%) 天间精密度 n=20 x (u/l) s (u/l) cv (%) 样品 1 25.10.823.25 样品 1 25.71.134.40 样品 2 51.31.573.06 样品 2 48.60.671.38 样品 3 1160.900.77 样品 3 1150.800.69 含磷酸吡哆醛 批内精密度 n=20 x (u/l) s (u/l) cv (%) 天间精密度 n=20 x (u/l) s (u/l) cv (%) 样品 1 43.61.102.51 样品 1 44.01.593.61 样品 2 74.51.792.41 样品 2 77.03.053.97 样品 3 1743.181.83 样品 3 1873.371.80 14.3 方法学比较：不含磷酸吡哆醛 本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 78 个样品进行 ast 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.98x-0.51u/l；r =0.999。 含磷酸吡哆醛 本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒 (y)与某商品化试剂盒(x)，同时对 80 个样品进行ast 活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.97x-0.79u/l；r=0.995。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为2u/l。 14.5 病人结果可报告范围 2-800u/l。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：本法对 ast 活力检测的最大a/min 在 340、334nm 为 0.16，在 文件编号：abcd-3-sf-06 abcdabcd 人民医院检验科人民医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：a/0 生效日期：20060808