缺水胁迫对小鼠记忆行为的影响.doc

缺水胁迫对小鼠记忆行为的影响生物科学专业 学生：张菁 指导教师：周东升摘 要：目的：探究不同程度缺水胁迫对小鼠记忆行为的影响。方法：将健康昆明种小鼠40只随机均分为4组，即a组（正常对照组）、b组（轻度缺水胁迫组）、c组（中度缺水胁迫组）、d组（重度缺水胁迫组）。分组处理以后，采用迷宫法和避暗法测定小鼠的学习记忆能力。结果：在迷宫法的测试中，b组小鼠通过迷宫缩短的时间与a组相比不具有显著差异（p0.05）；c组小鼠通过迷宫缩短的时间与a组相比具显著差异（p0.05）；d组小鼠通过迷宫缩短的时间与a组相比具极显著差异（p0.05）；c组小鼠错误逃避减少次数与a组相比具显著差异（p0.05）；d组小鼠错误逃避减少次数与a组相比具极显著差异（p0.01）。结论：轻度缺水胁迫对小鼠的记忆力影响不大，中度和重度缺水胁迫会使小鼠的记忆力下降，且重度缺水胁迫对小鼠记忆力造成的不良影响最为严重。关键词：缺水胁迫；记忆力；迷宫法；避暗法记忆是获得的行为习惯和经验维持一段时间的能力，或是将学习到的信息贮存和“读出”的神经过程1。前人从被动吸烟、噪声等多个角度对记忆力进行了研究2,3。但是，很少有人从缺水胁迫这个角度对记忆力进行研究。水是生物生命活动正常进行所必需的物质，有大量研究证明，当生物缺水时，其生理状况会发生不同程度的变化4,5。缺水胁迫是人们常常遇到又常常被忽视的生活细节，因此本项目从缺水胁迫这个角度出发,采用迷宫法6,7和避暗法8,9对记忆力进行研究。研究成果能为进一步研究缺水等极端条件下对动物记忆产生影响的机制提供研究基础，在神经生物学研究方面具有一定的基础意义。1 材料与方法1.1实验动物健康的成年昆明种小鼠40只，清洁级，雌雄各半，体重为20.1g2.0g，由南华大学实验动物中心基地提供。小鼠饲养环境：标准鼠笼饲养，光照周期l2h/12h，相对湿度45-50，环境温度22-23。将小鼠放在该饲养环境中饲养3天，待其适应环境以后再开始实验。1.2主要仪器避暗反应箱（型号：bw-mpa105，上海软隆）、迷宫（自制）、秒表计时器。1.3实验药品矿泉水、小鼠专用饲料，饲料主要成份及含量：水分6.5%，粗脂肪7.8%，粗蛋白23.2%，粗纤维5.2%，粗灰分8.5%，钙1.54%，总磷0.95%。1.4 动物模型的建立将40只健康的成年昆明种小鼠随机均分为4组10，其中每组小鼠雌雄各占一半。 a组（对照组）：该组小鼠正常供水（矿泉水）、供食（小鼠专用饲料）。b组（轻度缺水胁迫组）：该组小鼠正常供食，切断其供水来源3小时。c组（中度缺水胁迫组）：该组小鼠正常供食，切断其供水来源29小时。d组（重度缺水胁迫组）：该组小鼠正常供食，切断其供水来源68小时11,12。1.5 实验指标测定方法（1）迷宫法首先将小鼠放入迷宫入口，让其在5分钟内熟悉环境，并找到出口（迷宫出口处有美味的食物，它刺激小鼠寻找出口），记录小鼠找到出口所花费的时间t1。小鼠在第一次通过迷宫的过程中形成记忆。经过4小时后，再次把小鼠放入迷宫入口，记录小鼠找到出口所花费的时间t2。用（t1-t2的值）即小鼠通过迷宫缩短的时间来计算记忆成绩。行为学测试过程中应注意保持光线柔和，房间安静，各参照物位置不变。为了避免小鼠嗅觉对测试的影响，做每个实验项目前都要对迷宫进行清洁13,14。（2）避暗法小鼠避暗反应箱由控制器和活动箱两部分组成，明暗两个实验箱之间有一小门供动物进出，当动物进入暗室被电击时，它可自动记录小鼠第一次从明室进入暗室的潜伏期和受到电击的次数，还可通过按键灵活地选择刺激电压和设置实验时间。首先将小鼠头朝室壁放入明室，两室之间的门洞敞开，让其在3分钟内熟悉环境，然后取出小鼠放回饲养笼。让其休息5分钟后，将其放入明室，保持两室之间的门洞敞开，同时启动暗室内的电刺激器。小鼠很快钻入暗室，受电击后逃出暗室，记录小鼠300秒内进入暗室的次数e1。4小时后，再次对小鼠进行该项测试，并记录300秒内小鼠进入暗室的次数e2，错误逃避减少次数（e1-e2的值）用于计算记忆成绩15,16。1.6 数据处理实验数据采用xsd表示，将实验得到的数据用spss19.0统计软件进行方差分析和t检验，差异显著以p0.05和p0.05），即小鼠在轻度缺水胁迫下的记忆成绩与正常情况下的记忆成绩相比差别不大；c组中小鼠通过迷宫缩短的时间与a组小鼠通过迷宫缩短的时间相比具显著差异（p0.05），即小鼠在中度缺水情况下的记忆成绩要比正常情况下的记忆成绩差；d组中小鼠通过迷宫缩短的时间与a组小鼠通过迷宫缩短的时间相比具极显著差异（p0.05），即小鼠在轻度缺水胁迫下与正常情况下的错误逃避次数相比差别不大；c组小鼠的错误逃避减少次数与a组中小鼠的错误逃避减少次数相比具显著差异（p0.05），即在中度缺水胁迫下的错误逃避次数要大于正常情况下的错误逃避次数；d组小鼠的错误逃避减少次数与a组小鼠的错误逃避减少次数具极显著差异（p 0.05); however, we found a significant difference in group c and d, in which the memory ability of a group is much stronger than c and d group. (p 0.05 in c and p 0.05); however, the mistaken reduced times and in group c and d is significantly higher than in group a. (p 0.05 in c and p0.01 in d); conclusion: the moderate and severe hydropenic stress will hurt mice mem