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文档简介

中国矿业大学研究生学术专题研讨会记录第 次时间 2010.5.14地点专题汇报人(1)汇报主题烟叶蛋白的分离纯化(2)专题汇报人(2)汇报主题研讨会记录:烟叶蛋白的分离纯化(2)1.研究背景及意义烟草作为一种高产作物,具有丰富的原料来源。烟叶蛋白质量高,营养平衡,在目前所研究的植物蛋白中位居首位。2.烟草蛋白功能特性烟草中的蛋白质分为可溶性蛋白和不溶性蛋白。可溶性蛋白一半左右是叶绿体蛋白,另一半为其他可溶性蛋白质的复合物。3.实验安排烟叶蛋白的分离纯化研究主要包括三方面: (1)最大化地将烟叶细胞中的可溶性蛋白溶解到提取液中; (2)通过大孔树脂法来除去提取液中的杂质,调节各因素来获得最佳的烟叶蛋白结晶条件; (3)对烟叶蛋白结晶体进行纯度鉴定。目前第一阶段的实验已基本完成。4.实验进展(1)标准曲线绘制 采用考马斯亮蓝法(Bradford法)来标定提取液中的可溶蛋白含量。以牛血清蛋白(BSA)为标准蛋白。(2)蛋白标准液 称取100mg牛血清蛋白,溶于100ml蒸馏水中,即为1000g/ml的蛋白溶液(3)提取液盐浓的影响(4)提取时间的影响(5)提取温度的影响(6)料液比的影响(7)脱脂剂的影响结论:1.提取温度40,不随温度改变而改变提取率,室温下提取即可;2.pH在中性条件下有较大的提取率,建议采用含NaCl的缓冲溶液;3.脱脂剂石油醚的加入并没有提高蛋白提取率;4.抗氧化剂的加入对蛋白提取率有不同程度的提升,但前提是提取液的pH不因此发生大的变化,柠檬酸虽然不具备还原性,但它的效果在

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