实验十一亚甲基蓝与荧光黄的分离.ppt

化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 实验十一 柱色谱 亚甲基蓝与荧光黄的分离 厦门大学化学化工学院 基础化学实验二 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 1、掌握色谱法的原理及其应用 2、掌握柱色谱的实验操作技能 一 实验目的 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 二 实验原理 色谱法亦称色层法、层析法等，是分离、纯化和鉴定有机 化合物的重要方法之一。 色谱法的基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸 附或溶解性能（即分配）的不同，或其他亲和作用性能的差异 ，混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用 ，从而将各组分分开。 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 由于不同化合物吸附能 力不同，因而在洗脱时以不 同的速度沿柱向下流动，吸 附能力弱的组分随溶剂首先 流出。在连续洗脱过程中， 不同组分或不同色带就能分 别收集，从而达到分离纯化 的目的。 柱色谱 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 柱色谱 1 吸附剂 常用的吸附剂：氧化铝，硅胶，氧化镁，碳酸钙，活性炭 或纤维素粉。 选择吸附剂的首要条件：不与被分离物或展开剂发生化学 反应。 吸附能力与以下几点有关： （1）吸附剂颗粒大小（100150目） （2）吸附剂含水量（610，IIIII级） 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 柱色谱 2 溶剂 通常根据被分离物中各组分的极性、溶解度和吸附 活性等来考虑。先将带分离的样品溶于尽量少的非极性 溶剂中，从柱顶流入柱中，依次增大溶剂的极性，将不 同化合物依次洗脱（梯度洗脱）。 石油醚 环己烷 四氯化碳 甲苯 苯 二氯甲烷 氯 仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水 乙酸 常用洗脱剂的极性： 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 1、取一支色谱柱，在柱子的收缩部塞一小团脱脂棉花，注 意松紧要适度。然后在棉花上铺一层粗硅胶或石英砂。 2、将色谱柱垂直固定在铁架台上，往柱内加适量70%乙醇 溶液，打开活塞，赶走气泡！ 3、再向柱中倒入适量70%乙醇溶液，打开活塞，控制滴速 为1滴秒，用小锥型瓶承接，同时通过漏斗慢慢装入5g Al2O3 ，使其逐渐沉入底部。 三 实验步骤及注意事项 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 4、加完吸附剂后，在吸附剂上再盖一张直径大小合适的小滤 纸。 5、当溶剂的液面刚好流至滤纸面时关闭二通活塞，立即用移 液管加入1mL亚甲基蓝和荧光黄的乙醇混合液，尽量避免待分 离混合液粘附在柱的内壁上。 6、打开二通活塞，等柱内的溶剂恰好流到滤纸面时，关闭二 通活塞，向柱内加入70%乙醇，打开二通活塞进行洗脱。 三、实验步骤及注意事项 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 7、用锥形瓶收集蓝色的亚甲基蓝溶液。【洗脱时切勿使溶剂 流干】 8、当蓝色溶液收集完后，等柱内的70%乙醇溶液恰好流到滤纸 面时，关闭二通活塞，加入适量2%氨水作为洗脱剂。打开二通 活塞收集黄绿色的荧光黄溶液，直到其完全被洗出。 三、实验步骤及注意事项 化学实验教学示范中心化学实验教学示范中心 三 实验步骤及注意事项 9、用量筒分别量取所分离出来的亚甲基蓝和荧光黄溶液的体 积 后，倒入指定的回收瓶中。 10、分离结束后，应先