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细菌分离培养基(g):牛肉膏4 蛋白胨10 葡萄糖l0 琼脂15 水1L ,PH=7.07.2;放线菌分离培养基(g):可溶淀粉10 硝酸钾1 磷酸氢二钾0.5硫酸镁0.5硫酸亚铁0.01 水1L, PH=7.0-7.2。抑制剂:重铬酸钾0。1;真菌分离培养基(g):葡萄糖5 蛋白胨10 酵母膏2 麦芽糖0.5 水lL, PH=6.0-6.5抑制剂青霉素200Uml链霉素100Uml。 方法分离细菌牛肉膏蛋白胨牛肉膏 0.3g 蛋白胨 1g 氯化钠 0.5g 琼脂 2g 自来水 100mL pH 7.07.2 灭菌 1.05kg/cm2,22min放培养基线菌高氏一号培养基可溶性淀粉 2g KNO3 0.1g K2HPO4 0.05g MgSO4 7H2O 0.05g NaCl 0.05g FeSO4 7H2O 0.001g (母液) 琼脂 2g 自来水 100mL pH 7.27.4 灭菌 1.05kg/cm2,20min 配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量的沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其他成分,溶化后,补足水分到100ml,调pH。真菌孟加拉红培养基蛋白胨5g 葡萄糖10g 磷酸二氢钾1g 硫酸镁(MgSO47H2O)0.5g 琼脂20g 1/3000孟加拉红溶液100mL 蒸馏水1000mL 氯霉素0.1g 上述各成分加入蒸馏水中溶解后,再加孟加拉红溶液。另用少量乙醇溶解氯霉素,加入培养基中,分装后,121灭菌20min。2挑种纯化琼脂平板蛋白胨10g 牛肉膏3g 氯化钠5g 琼脂1520g 蒸馏水1000mL将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.27.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装烧瓶,121高压灭菌15min。 注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。取营养琼脂(PH76),加热使其溶解待冷至45-50,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。3保存4菌株对有机物分解能力试验淀粉培养基牛肉膏 0.5g 蛋白胨 1g 氯化钠 0.5g可溶性淀粉 0.2g水 100mLpH 7.07.2琼脂 2g灭菌 1.05kg/cm2,20min高温灭菌后倒平板。 明胶(Gelatin)液化试验:明胶高层明胶(Gelatin)液化试验 有些细菌具有明胶酶(亦称类蛋白水解酶),能将明胶先水解为多肽,又进一步水解为氨基酸,失去凝胶性质而液化。 试验方法:挑取1824h待试菌培养物,以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度或点种于平板培养基。于2022培养714天。明胶高层亦可培养于361。每天观察结果,若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、静置冰箱中待其凝固后、再观察其是否被细菌液化,如确被液化,即为试验阳性。平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂,若为阳性,1020min后,菌落周围应出现清
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