通心络逆转动脉粥样硬化兔内皮功能损害的研究.ppt

通心络逆转动脉粥样硬化兔 内皮功能损害的研究 复旦大学附属中山医院 上海市心血管病研究所 葛均波，周京敏 教授 为何研究内皮功能？ 内皮功能异常的临床意义 是动脉粥样硬化的始动环节 是临床动脉粥样硬化疾病的标志 Endothelial dysfunction shows a strong association with coronary artery disease and can be a useful noninvasive tool for the evaluation of coronary artery disease. Indian Heart J. 2003 Jan-Feb;55(1):44-8. 内皮功能是临床动脉粥样硬化疾病预后 的独立预测因素 Independent predictors of coronary events by noninvasive FMD J Am Coll Cardiol. 2003 Sep 17;42(6):1037-43. Independent predictor of cerebrovascular events in thosse without CHD. Circulation. 2003 Jun 10;107(22):2805-9. 内皮功能异常的临床意义 内皮功能改善的临床意义 Preserved endothelial function attenuates the risk of future events associated with a high plaque burden. J Am Coll Cardiol. 2003 Sep 17;42(6):1037-43. 对已形成动脉粥样硬化的血管，通心络是否具 有改善内皮功能的作用？ 材料与方法 新西兰大白兔 正常饮食组：6只 高脂饮食组：30只，8周后（成动脉粥样硬化模型） 随机分为： 继续高脂饮食组：10只 高脂饮食通心络干预组（1000mg/kg/d）：10只 高脂饮食氟伐他汀干预组(10mg/kg/d)：10只 血清总胆固醇浓度测定：1，8，12周 血管内皮功能的检测 NOS、GSH-PX 、MDA的检测 氧化LDL受体（LOX 1）表达的检测 检测指标 血管内皮功能的检测 气体栓塞法处死动物 取胸主动脉作离体主动脉环（45mm） 用不锈钢钩固定于含克氏液的浴槽，通过张力换能器连接 二道生理记录仪 静息张力为3g，平 衡120min后，用苯肾上腺素( 10- 7 mol/L) 预收缩血管环 观察Ach( 10 -910 -5mol/L)引起的血管内皮依赖的舒张反应 再以苯肾上腺素( 10- 7 mol/L)收缩血管环 观察对硝普钠(10 -810 -6mol/L)的舒张反应 血管MDA，GSHPX，NOS的检测 l 主动脉丙二醛（MDA）含量：应用硫代巴比妥酸比色法 l 主动脉谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPX）活力：二硫代 二硝基苯甲酸比色法 l 主动脉总NOS活性：应用催化L-Arg法 LOX 1受体表达的检测 LOX-1mRNA的表达： RTPCR方法 LOX-1蛋白表达：Western Blotting 方法 结 果 实验第1, 8, 12周血脂总胆固醇水平的变化 血清总胆固醇（mg/dl）1周8周12周 正常对照组(=6)46.314.349.714.647.57.3 高脂饮食组(=10)49.77.9 840.852.8* 810.832.3* 来适可干预组（n=10) 43.66.0 873.077.5* 110.187.5# 通心络干预组(=10)50.110.2 804.683.5* 739.183.5 注：与正常对照组比较：*P0.05 # 非内皮依赖性血管舒张反应 注：各组两两比较均无差异(P0.05) GSH-PX， MDA和NOS水平测定 GSH-PX(U/mgprot)MDA(nmol/mgprot)NOS(U/mgprot) 正常饮食组86.747.63.81.92.60.9 高脂饮食组 47.526.612.15.51.00.2 氟伐他汀组100.464.3 *3.51.7*3.01.9* 通心络组97.834.3* 3.51.6*2.91.3* 注：与高脂饮食组比较：*P0.05 LOX-1受体mRNA表达 Figure 1. RT-PCR detection of LOX-1 mRNA expression in the aortas from different group rabbits. LOX-1 GAPDH 通心络正常饮食组高脂氟伐他汀 Figure 2. Western blotting of LOX-1 expression in the aortas from different group rabbits. 高脂 LOX-1 正常饮食组氟伐他汀通心络 LOX-1受体蛋白表达 讨 论 通心络具有逆转动脉粥样硬化模型血管的内 皮功能的作用 提供了通心络治疗冠心病的理论基础 通心络显著改善患者症状 抗氧化 Acute vitamin C administration restored peripheral endothelial function in patients with CAD to normal values. -Am Heart J. 2003 Aug;146(2):280-5. 他汀类药物的抗氧化作用已得到公认 Statins promote potent systemic antioxidant effects through specific inflammatory pathways. -Circulation. 2003 Jul 29;108(4):426-31 内皮功能逆转的可能机制 通心络有抗氧化的作用 对NOS的作用：增加NOS的活性，促进NO的释放，改善 血管内皮依赖的舒张功能。 阜外医院杨跃进等：通心络增加急性心肌梗死模型心 肌组织的NOS活性 减少氧自由基的生成: 增加GSH-PX活力，减少MDA生成 对血脂水平可能有一定作用 内皮功能逆转的可能机制 Circulating autoantibodies to oxidized LDL correlate with impaired coronary endothelial function Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2002; 22: 2044-8. 他汀类药物改善内皮功能的作用与此有关 通心