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第八章 肠杆菌科细菌 一、分类 第一节 概述 肠杆菌科的共同特性 1. 形态染色相似 革兰阴性杆菌 2. 培养特性相同 普通培养基上生长良好 3. 生化反应活泼 发酵葡萄糖,氧化酶阴 性,触酶阳性,还原硝酸盐为亚硝酸盐,O/F 试验为发酵型。 4. 抗原构造复杂 5. 抵抗力弱 6. 易变异 O-F试验 氧化型氧化型发酵型发酵型产碱型产碱型 氧化酶试验 阳性:紫红色 阴性:无色 硝酸盐还原试验 阳性:红色 阴性:淡黄色 肠杆菌科细菌抗原模式图 致病物质 n菌毛或菌毛样结构 n荚膜或微荚膜 n外膜蛋白 n内毒素 n外毒素 二、临床意义 所致疾病 n肠道感染 腹泻、食物中毒、肠热症 n肠道外感染 鼠疫(烈性传染病)、泌尿道感 染、 肺炎、脑膜炎、伤口化脓、菌血 症 三、鉴定原则 1. 科间鉴别 2. 将肠杆菌科分为三大类 3. 属、种、群、型的区分 4. 肠杆菌科细菌综合鉴定流 程 肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别 苯丙氨酸脱氨酶试验 阳性:绿色 阴性:黄色 葡萄糖酸盐试验 阳性:黄绿色 阴性:蓝色 第二节 埃希菌属 一、分类 二、临床意义 致病物质 n侵袭力 菌毛、K抗原 n内毒素 n肠毒素 耐热肠毒素(ST) 不耐热肠毒素(LT) 所致疾病 n肠道外感染 泌尿道感染(最常见) 胆道感染、腹膜炎、肺炎 菌血症、新生儿脑膜炎 n肠道感染 ETEC、EPEC、EIEC、 EHEC、EaggEC 三、细菌特性 大肠埃希菌革兰染色 大肠埃希菌电镜图 大肠埃希菌菌落特征(血平板) 大肠埃希菌菌落特征(MAC) 大肠埃希菌KIA(AA)MIU() 大肠埃希菌IMViC试验() 右侧为对照() 大肠埃希菌抗原结构 四、种属鉴定 大肠埃希菌检验程序 检验方法 1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定 nETEC nEPEC nEIEC nEHEC nEaggEC ST检测(乳鼠灌胃试验) LT 检测( CHO细胞培养) O157:H7菌落特征(MAC) O157:H7菌落特征(山梨醇麦康凯琼脂平板) 第三节 志贺菌属 一、分类 志贺菌属分为4群: A群为痢疾志贺菌(S. dysenteriae ) B群为福氏志贺菌(S. flexneri) C群为鲍氏志贺菌(S. boydii) D群为宋内志贺菌(S. sonnei) 致病物质 n侵袭力 菌毛 n内毒素 n外毒素 志贺毒 素 二、临床意义 所致疾病 n急性细菌性痢疾 n慢性菌痢 n带菌者 三、细菌特性 n形态特征 志贺菌革兰染色 志贺菌菌落特征(MAC) 志贺菌KIA(K A)MIU() 志贺菌IMViC试验() 志贺菌检验程序 四、种属鉴定 n在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、 黏液部分,床边接种或立即送检,不能及时 接种者可用卡-布运送培养基送检,昏迷不能 排便病人可用肛拭取样。 第四节 沙门菌属 一、分类 致病物质 n侵袭力 Vi-Ag n 内毒素 n 肠毒素 二、临床意义 所致疾病 n伤寒和副伤寒 n急性胃肠炎或食物中毒 n菌血症(或败血症) 三、细菌特性 n形态特征 伤寒沙门菌革兰染色 伤寒沙门菌菌落特征(MAC) 伤寒沙门菌菌落特征(SS) 伤寒沙门菌菌落特征(血平板) 伤寒沙门菌KIA(K A)MIU() 沙门菌IMViC试验() 四、种属鉴定 沙门菌检验程序 检验方法 1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定 4.血清学诊断 沙门菌血清学鉴定 肥达反应(Widal test) O凝集 (1:201:1280,效价1:80) H H凝集凝集 (1:201:201:12801:1280,效价,效价1:3201:320) 第五节 耶尔森菌属 一、分类 鼠疫耶尔森菌 小肠结肠炎耶尔森菌 其他耶尔森菌:假结核耶尔森菌等 (二)临床意义 鼠疫耶尔森菌 致病物质 n侵袭力 FI抗原(封套抗原 ) V/W抗原(毒力 抗原) n内毒素 n鼠毒素 所致疾病 n甲类烈性传染病鼠疫 n常见临床类型: n腺鼠疫 n败血型鼠疫 n肺鼠疫 n致病物质 侵袭力 肠毒素 n所致疾病 小肠炎、结肠炎、胆囊 炎 腹膜炎、菌血症 小肠结肠炎耶尔森菌 三、细菌特性 n鼠疫耶尔森菌形态特 征 鼠疫耶尔森菌镜下形态(Wayson染色) 鼠疫耶尔森菌菌落特征(MAC) 小肠结肠炎耶尔森菌革兰染色 小肠结肠炎耶尔森菌 小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征(MAC) 小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征(CIN琼脂平板) 一旦疑为鼠疫耶尔森菌,应立即 向本地区疾病控制中心等部门报告 ,并将菌种送检验中心或专业实验 室作进一步鉴定。诊断确立后除对 患者进行隔离治疗外,对疫区及有 关人员须采取有效的预防隔离措施 ,防止疫情扩散 四、种属鉴定 标本采集 1. 临床标本 淋巴结穿刺液、血液或痰标 本 2. 非临床标本 尸检取病变组织,鼠标本 应严格消毒体表,再进行采集 鼠疫耶尔森菌检验程序 小肠结肠炎耶尔森菌检验程序 n KIA:AA-或KA- n 枸橼酸盐(-) n 脲酶(+) n 吲哚(-/+) n 鸟氨酸脱羧酶(+) n 动力、V-P反应结果与孵育温度有关(22 25阳性,3537阴性) n 根据菌落特征,菌体形态染色特点、嗜冷性 及典型生化结果即可初步诊断本菌。 第六节 枸橼酸杆菌属 分类 n弗劳地枸橼酸杆菌(C.freundii) n异型枸橼酸杆菌(C.diversus) n无丙二酸盐枸橼酸杆菌( C.amalonaticus) 弗劳地枸橼酸杆菌菌落特征(MAC) 细菌特性细菌特性 枸橼酸杆菌IMViC () 第七节 克雷伯菌属和柔特勒菌属 一、分类 克雷伯菌属 肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae) 产酸(催娩)克雷伯菌(K.axytoca) 肺炎克雷伯菌臭鼻亚种 肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种 柔特勒菌属 解鸟氨酸柔特勒菌 植生柔特勒菌 土生柔特勒菌 克雷伯菌属的细菌多感染免疫力低 下的人群,是医院感染中最重要的条件 致病菌。 所致疾病:肺炎、脑膜炎、腹膜炎 、泌尿系统感染、败血症 二、临床意义 肺炎克雷伯菌革兰染色 三、细菌特性 肺炎克雷伯菌电镜图 肺炎克雷伯菌荚膜染色 肺炎克雷伯菌的菌落特征(血琼脂平板) 肺炎克雷伯菌的菌落特征(MAC) 肺炎克雷伯菌粘丝试验 肺炎克雷伯菌KIA(A A )、MIU() 肺炎克雷伯菌IMViC试验() 肺炎克雷伯菌易产生超广谱-内酰胺 酶(ESBL),近年来文献报道我国产酶 率已达30%左右,产酶株对青霉素类、 第1、2、3代头孢菌素及单环-内酰胺类 抗生素均产生耐药,而仅对头霉素类、 碳青霉烯类及酶抑制剂敏感。ESBL检测 现已作为医院细菌室常规检测项目。 四、种属鉴定 肺炎克雷伯菌检验程序 检验方法 1.显微镜检查 2.分离培养 3.鉴定 肺炎克雷伯菌荚膜肿胀试验 第八节 肠杆菌属 一、分类 产气肠杆菌、阴沟肠杆菌、杰高 维肠杆菌、阪崎肠杆菌、中间型肠 杆菌、泰洛肠杆菌等 肠杆菌属是肠杆菌科中最常见的环 境菌群,医院感染的重要病原菌。在临 床微生物室检出率最高的是阴沟肠杆菌 和产气肠杆菌,可引起泌尿道感染、呼 吸道感染、伤口感染以及败血症。 二、临床意义 阴沟肠杆菌革兰染色 三、细菌特性 阴沟肠杆菌菌落特征(MAC) 产气肠杆菌IMViC试验() 四、种属鉴定 IMViC试验 大肠埃希菌为+- 肠杆菌属细菌大多为-+ 动力和鸟氨酸脱羧酶试验 肺炎克雷伯菌为阴性 肠杆菌属多数为阳性 肠杆菌科细菌常产生AmpC酶,尤 以阴沟肠杆菌最为突出。它是导致革兰阴性 菌尤其是阴沟肠杆菌对13代头孢菌素、单 环-内酰胺类、头霉素类及含酶抑制剂的复 合制剂耐药的重要原因。 产AmpC酶细菌的治疗,首选4代 头孢(头孢吡肟)和碳青霉烯类抗生素。近 年来已有质粒介导的AmpC酶出现。 第九节 多源菌属 分类 聚团多源菌等 聚团泛菌菌落特征(普通琼脂) 第十节 哈夫尼亚菌属 蜂房哈夫尼亚菌菌落特征(MAC) 第十一节 沙雷菌属 一、分类 粘质沙雷菌(S.marcescens) 液化沙雷菌 芳香沙雷菌 普氏沙雷菌 深红沙雷菌 无花果沙雷菌等 粘质沙雷菌菌落特征(普通琼脂平板) n二、临床意义 n粘质沙雷菌、液化沙雷菌和深红沙雷菌都 是已证实的条件致病菌,其中粘质沙雷菌是 医院感染的重要条件致病菌之一,是引起肠 道外感染的主要病原菌,可导致肺部感染、 脑膜炎、心内膜炎、泌尿道感染、败血症、 输血和外科手术后感染等。 第十二节 变形杆菌属 分类 普通变形杆菌 奇异变形杆菌 产粘变形杆菌 潘氏变形杆菌 变形杆菌革兰染色 细菌特性 变形杆菌鞭毛染色 变形杆菌迁徙生长现象(普通琼脂平板) 变形杆菌菌落特征(MAC) 变形杆菌KIA(K A+ + )MIU(+ +/- +) 变形杆菌苯丙氨酸脱氨酶试验() 根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素,苯丙氨酸脱氨酶 阳性,KIA为KA+,IMViC为-/+-,可鉴定为变形杆菌。 返回 第十三节 普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌菌落特征(MAC) 摩根摩根菌菌落特征(MAC) 第十四节 摩根菌属 第十五节 邻单胞菌属 n邻单胞菌属只有一个菌种 n类志贺邻单胞菌(P.shigelloides) n导致肠胃炎,好发于夏季,通常为散发 流行,临 床症状是短时间的水样泻或痢疾样腹 泻,患者有进食生水或海产品史。 n肠道外感染: 机体抵抗力下降人群 n引起菌血症、脑膜炎。偶尔也可在伤口 分泌液、 胆汁、关节液等标本中分离到 类志贺邻单胞菌 n革兰阴性直杆菌,成双或短链状排列,25根端极 鞭毛,有动力,生长温度845 n血琼脂平板中生长良好,灰色平滑、不透明、大 小为1.5mm菌落。无溶血,氨苄西林抑制其生长。

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