药物对离体豚鼠回肠收缩的作用.ppt

药物对离体豚鼠回肠收缩的作用 浙江大学医学院生理教研室 张 雄 目 的 l学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。 l观察小肠平滑肌的自律性收缩，理解其原理。 l观察药物acetylcholine (Ach、乙酰胆碱）， histamine (His、组胺），BaCl2分别对离体豚鼠 回肠平滑肌的作用，并以atropine(阿托品)、 chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）为工具 药，初步分析以上药物的作用原理。 原 理（1） l胃肠平滑肌收缩的自动节律性（慢波理论： Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果）。 原 理（2） l乙酰胆碱：M胆碱能受体激动药。Ach与M受 体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流 ，肌浆Ca2+，平滑肌收缩幅度增高。 l阿托品：M胆碱能受体阻断药。阿托品与平滑 肌细胞膜M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体 结合，阻断乙酰胆碱与M受体的激动作用。 原 理（2） l组胺：激动平滑肌细胞膜H1受体，通过激活G 蛋白-磷脂酶C系统，使细胞内Ca2+增高，导致 平滑肌收缩。 l扑尔敏：H1受体阻断药。扑尔敏与平滑肌细 胞膜H1受体结合，阻断组胺与H1受体结合， 从而阻断组胺对H1受体的激动作用。 原 理（3） l氯化钡：肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通 道进入胞浆，使肌浆Ba2+，平滑 肌收缩幅度增高，但泵出障碍；另 一方面BaCl2能兴奋胆碱能受体， 使平滑肌收缩幅度增高。 材 料 l豚鼠1只：WT为300 g左右 l麦氏浴槽，生物信号采集系统，张力换能器。 l台氏液， 10-2 g/L乙酰胆碱 、1 g/L硫酸阿托品 、 10-2 g/L组胺， 10-3 g/L扑尔敏、10 g/L BaCl2 溶液。 方 法 1. 实验装置准备： 打开恒温水浴37-加台氏液于麦氏浴槽中-95% O2+5%CO2持续通气（气泡一个个逸出为宜）。 2. 标本准备： 击昏豚鼠-开腹-减取回肠-冲洗内腔-截取肠段- 肠段两 端对角穿线- 固定于麦氏浴槽和换能器上。 3. 实验记录： 打开配置（药物对离体豚鼠回肠的作用）-零点设置-调节 换能器张力2 g -稳定10-30分钟（基线和收缩幅度稳定 ） 找到盲肠，在离回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm 左右一段，置于盛有冰冷台氏液的培养皿中，冲洗干净 ，将回肠剪成1-1.5cm的几小段。 标本准备（1） 标本准备（2） l取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其两端对 角处分别用缝针穿线，并打结。一端系于浴槽固定钩 上，另一端系在张力换能器的悬臂梁上。 换能器 肠管 观察项目 v 记录肠段基础张力，收缩张力，收缩频率。 v 加入10-2 g/L Ach 0.2ml，观察并记录曲线，作用明显时换液。 v 重复以上Ach剂量，待收缩到最高点时加入1 g/L阿托品 0.2ml ，观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后，再加入相同量 的Ach，观察并记录收缩曲线，换液。 v 加入10-2 g/L组胺 0.3ml，作用明显时迅速换液。 v 预先加入10-2 g/L扑尔敏0.2 ml，5 min后（不换液）加入同量 组胺，观察并记录收缩曲线 ，换液。 v 加入10 g/L BaCl2 溶液1ml，当作用达到最高点，加入1 g/L阿 托品 0.2 ml，观察并记录收缩曲线。 实验结果 Ach 换液 Ach 阿 Ach 换液 His 换液 扑 His Bacl2 阿 (每次换液后稳定15min) 稳定20min 注意事项 l注意保持肠管通畅，勿使其封闭。 l不要把药物直接滴加到回肠上。 l每次加的台氏液量保持相等。 l加的台氏液量必须预先加热到37。 l药物作用明显后，尽早冲洗。 l每次换液后稳定1020min。 实验结果（1） l曲线描记：标上加药时间点，药物名，洗脱时 间点。 l对曲线进行测量：基础张力，收缩张力。填入 表格。 实验结果（2） 表3. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响 组别 标本数 基础张力（g） 收缩幅度（g） 乙酰胆碱 阿托品+乙酰胆碱 组胺 扑尔敏+组胺 BaCl2 BaCl2+阿托品 实验报告 l针对实验数据，进行结果描述 总结Ach、阿托品、His、扑尔敏、BaCl2分别对离体 豚鼠回肠有什么作用。 2. 讨