专题2微生物的培养与应用复习.ppt

选修1 生物技术实践 专题2 微生物的培养与应用 1.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中，错误的是 （ ） A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B.牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸 C.待培养基冷却至50左右时，进行倒平板 D.待平板冷却凝固约5 min10 min后，将平板倒过来放置 【解析】选A。本题考查牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备过程。 其顺序为：计算称量溶化灭菌倒平板，故A项错误。 2.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（ ） A.以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B.以尿素为惟一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C.以尿素为惟一氮源的培养基中加入苏丹试剂 D.以尿素为惟一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 【解析】选A。在以尿素为惟一氮源的培养基中，不能分解尿素 获得氮源的细菌不能生长，而分解尿素的细菌能利用尿素作氮 源，将尿素分解为氨，使pH升高。若培养基中加入酚红指示剂 ，指示剂将变红。此培养基既属于选择培养基，又属于鉴别培 养基。 3(2012合肥模拟)对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培 养基的目的是（ ） A用液体培养基可获得大量菌体 B纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长 C用液体培养基可以充分利用培养基中的营养物质 D用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌 【解析】选A。对土壤中纤维素分解菌进行选择培养的目的，一 是除去土壤中的其他微生物，起到分离作用；二是对分离的纤 维素分解菌进行培养，增加细菌的浓度，起到“浓缩”的作用 ，所以要用液体培养基，而不是固体培养基。 4.(2012宿州模拟)下表表示在不同培养基中细菌的生长繁 殖情况(E、F、G、H、I、J、K、M为培养基的成分，“”表 示生长，“”表示不生长)。请分析细菌不能合成下列哪种 物质（ ） A.H BI CK DM 成 分 A、B C A、B、 C I、M A、B、 C H、K A、B、 C M、J A、B、 C I、K A、B、 C H、J A、B、 C K、M 状 态态 C 5(2007年江苏高考卷)不同的微生物对营养 物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2 为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不 正确的是( ) A氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B碳源物质也是该微生物的能源物质 C无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D水是该微生物的营养要素之一 【解析】 本题考查微生物的营养要素 以及理解应用能力、判断能力。CO2可 为自养型微生物提供碳源，但不能提供 能源。 【答案】 B 6下列所述环境条件下的微生物，能正 常生长繁殖的是( ) A在缺乏生长素的无氮培养基中的固褐 固氮菌 B在人体表皮擦伤部位的破伤风杆菌 C在新配制的植物矿质营养液中的酵母 菌 D在灭菌后的动物细胞培养液中的禽流 感病毒 A 一、培养基的营养构成 1、微生物需要的五大类营养物质： 碳源、氮源、生长因子、无机盐和水 另外还需要满足微生物生长对pH 、特殊营养物质（如:生长因子）以及 氧气的要求。 定义作用主要来源 碳 源 能提供 碳元素 的物质 构成生物体 的物质，异 养生物的能 源物质 无机物：CO2、 NaHCO3 有机物：糖类、脂 肪酸、石油、花生 粉饼等 异养微生物的碳源是有机物，最常 利用的是糖类； 自养微生物利用CO2或碳酸盐作为 碳源（以无机碳源作为主要碳源）。 定义作用主要来源 氮 源 能提供 氮元素 的物质 合成蛋白质 、核酸以及 含氮代谢产 物 无机物：N2、NH3 、氨盐、硝酸盐 有机物：尿素、牛肉 膏、蛋白胨等 能把氮气作为氮源的只限于固氮菌、某 些放线菌和藻类等。 霉菌仅以无机氮素化合物为氮源；部分 细菌不用有机氮化合物作为氮源就不能生长 。 生长 因子 生长不可缺 少的微量有 机物 酶和核酸的 成分 维生素、氨基 酸、碱基等 (1)微生物最常利用的碳源是糖类(特别是葡萄 糖)，常利用的氮源是氨盐、硝酸盐。 (2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的 是碳源。 (3)微生物之所以需要补充生长因子，是由于 缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限 。 【特别提醒 】 【高考警示钟】 自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同 (1)自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而 异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此 可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。 (2)含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源物 质，提供能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。 【例1】分析下面培养基的配方：KH2PO4、 Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。请 回答： (1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳 源和氮源的分别是_和_。 (2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作 用？如果具有，又是如何进行选择的？ _ 。 (1)葡萄糖 尿素 (2)有选择作用。因为此配方中尿素是惟一氮源， 因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长 2.(2011新课标)有些细菌可分解原油，从而消除由原 油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤 中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： (1)在筛选过 程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养 基属于 培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法 有两种，即 和 。 原 油 选择 平板划线法稀释涂布平板法 (3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的 大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。 (4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的 灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行 ，以避免周围环境中微生物的污染。 强 干热灭菌高压蒸汽灭菌 火焰 【互动探究】(1)若在该培养基中加入青霉素，能更好地起到筛 选作用吗？ 提示：不能。 分析：青霉素培养基往往是真菌选择培养基，在加青霉素的培 养基中，细菌生长被抑制，因而不能筛选出能高效降解原油的 菌株(细菌)。 微生物的筛选与计数 1.筛选菌株 (1)原则：人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止 其他微生物的生长。 (2)菌株筛选原理的比较： 土壤中分解尿素的细细菌分解纤维纤维 素的微生物 选择选择 培养基的成分：尿素作 为为惟一的氮源 鉴鉴定方法： 在培养基中加入酚红红指示剂剂， 若指示剂变红剂变红 ，pH升高，说说明 细细菌能分解尿素 选择选择 培养基的成分： 纤维纤维 素作为为惟一的碳源 鉴鉴定方法： 刚刚果红红染色法，即刚刚果红红与纤维纤维 素 形成红红色复合物，当纤维纤维 素被分解 后，培养基出现现以纤维纤维 素分解菌为为 中心的透明圈 【技巧点拨台】 选择培养基的选择方法 (1)在培养基中加入某种化学物质。例如，加入青霉素可以分离 出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌 。这里的加入是在主要营养成分完整的基础上加入。 (2)改变培养基中的营养成分。例如缺乏氮源时可以分离出固氮 微生物；石油作为惟一碳源时，可以分离出消除石油污染的微 生物。 (3)改变微生物的培养条件。例如，将培养基放在高温环境下培 养，可以得到耐高温的微生物。 【典例训练3】在培养基中加入尿素(惟一氮源)，以分离出能分解 尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于( ) A选择培养基 B固体培养基 C液体培养基 D鉴别培养基 【解题指南】 1.知识储备：明确培养基的分类依据。 2.解题关键：明确尿素的作用；注意分类依据。 A 【变式训练】