人体解剖生理学实验基本操作.ppt

人体解剖生理学实验 基本操作 常用的实验动物 动物的捉持 动物的秤重 实验动物分组及编号的标记方法 动物的麻醉 实验动物的给药方法 实验动物的取血方法 实验动物的处死方法 常用的实验动物 小鼠 在哺乳类实验动物中 ，由于小鼠体小，饲 养管理方便，易于控 制，生产繁殖快，研 究最深，有明确的质 量控制标准，已拥有 大量的近交系、突变 系和封闭群，因此在 各种实验研究中，用 量最大，用途最多。 常用的实验动物 大鼠 白化型大鼠在生物医学研 究中占据着重要的地位， 常用的大鼠近交品系有十 几个如ACI、BVF、F344、 PA、M520、WAB、WAC 、WKA、SD、RF等品系 。常用的非近交的纯种大 鼠有7种，其中以Wistar大 鼠用得最多，我国医药研 究中应用也比较广泛。此 种大鼠白色，相当于小鼠 的瑞士（Swiss）种。 常用的实验动物 豚鼠 豚鼠对某些药物极为敏 感，因此它是研究这些 药物的“专门动物”。 例如豚鼠对组织胺极敏 感，所以很适合作平喘 药和抗组织胺药的研究 ；豚鼠对人型结核杆菌 具有高度的敏感性，因 此常用作抗结核病药物 的药理学研究。 常用的实验动物 家兔 家兔体小力弱、胆小怕惊 、怕热、怕潮，喜欢安静 、清洁、干燥、凉爽的环 境，不能忍受污秽的条件 。家兔对体温变化十分灵 敏。最易产生发热反应， 而且发热反应典型、恒定 。小鼠、大鼠和豚鼠恒温 机能差。对发热刺激的反 应低。有时热原性物质的 刺激时。体温反应下降。 常用的实验动物 犬 犬在各个方面的研究， 如心血管外科、脑外广 泛用于实验外科科、断 肢再植、器官或组织移 植等中都比较常用。犬 是目前基础医学研究和 教学中最常用的动物之 一，尤其在生理、药理 、病理生理等实验研究 中起着重要作用。 动物的麻醉 挥发性麻醉药 乙醚 乙醚麻醉的优点：深度 易于掌握，比较安全， 麻醉后恢复比较快。 缺点：需要专人管理， 麻醉初期出现强烈的兴 奋现象，对呼吸道有较 强的刺激性，需在麻醉 前给一定量的吗啡和阿 托品（基础麻醉）。 非挥发性麻醉药 苯巴比妥钠 戊巴比妥钠 氨基甲酸乙酯 水合氯醛 实验动物的给药方法 皮下注射 皮内注射 腹腔注射 肌肉注射 静脉注射 灌胃给药法 实验动物的取血方法 尾静脉 眼眶动脉和静脉 后眼眶静脉丛连续穿刺 断头 心脏 颈静脉 耳缘静脉 大/小鼠解剖 血液凝固 【实验目的】本实验采用兔颈总动脉放血，通过测定各种 条件下的血液凝固时间，了解影响血液凝固的一些因素。 【实验原理】血液凝固可分为内源性凝血系统和外源性凝 血系统。内源性凝血系统是指参与凝血过程的因子全部存 在于血浆中，外源性凝血系统是指在组织因子参与的凝血 过程。 【实验材料】 家兔 兔手术台、哺乳动物手术器、动脉夹、细塑料管、20毫升 注射器、25%乌拉坦、试管8支、小烧杯2个，竹签1支、冰 块、棉花，石蜡、肝素、草酸钾、生理盐水、肺组织浸液 。 【实验方法】 1、用乌拉坦将兔麻醉，仰卧固定于兔手术台上，分离一侧颈总动脉，上 端用线结扎阻断血液，下端夹上动脉夹，在动脉当中剪一小口，插入 细塑料管，结扎插管备取备用。 2、将下列试管准备好试验用品后，每管加入血液2毫升。 试管1 内放少许棉花； 试管2 用石蜡油润滑整个内表面 试管3 不加任何处理 试管4 置于有冰块的小烧杯中 试管5 内加肝素8单位 试管6 内加草酸钾1-2毫克 将多余的血盛于小烧杯中，不断用竹签搅动直至纤维蛋白形成 3、记录凝血时间：每个试管加血2毫升后，即可开始计时，每隔15秒， 将试管倾斜一次，观察血液是否凝固。至血液成为凝胶状不再流动为 止，几下所经时间即凝血时。另一烧杯内加入血液后立即用竹签搅动 ，去除纤维蛋白。5、6号试管，加入血液后，用拇指盖住试管口将管 颠倒两次。 将结果及在各条件下的凝血时间按表1填写，并进行解释 表1 各条件下凝血时间 实验仪器编号实验条件 结果及凝 血时间 解释 试管（放血2毫升 ） 1 2 粗糙面的影响 预先在试管内放 入少许棉花 预先用石蜡油润 滑整个使馆内表 面 3 4 温度的影响 预先置于室温中 试管置有冰块的 小烧杯中 5 6 试管内先加肝素8单位 试管里先加草酸钾1-2毫克 小烧杯 （放血10毫升） 放血于烧杯时用竹签不断搅动，约2-3分 钟后取出竹签，用水洗净竹签上的血液， 观察纤维蛋白，烧杯内为去除纤维蛋白血 ，观察其是否会发生凝血。 血红蛋白含量的测定 【实验目的】掌握比色法测定血红蛋白含量的方法。 【实验原理】测定血红蛋白含量的方法很多，实验常用比 色法。其原理是在一定量的血液中，血红蛋白经少量盐酸 的作用，使亚铁血红素变成高铁血红素，呈现较稳定的棕 色。用水稀释后与标准色比较，求出每100ml 血液中所含 的血红蛋白克数。正常成年男子每100ml 血液平均含14.4g ，女子为13.1。 【实验材料】兔血，沙利氏血红蛋白计一套，采血针，玻 璃棒，滴管，75%酒精，95%酒精，棉球，蒸馏水，乙醚 ，0.1N盐酸 【实验方法】 1血红蛋白计包括标准比色架，架的两侧镶有两个棕色标准玻璃色柱 。血红蛋白稀释管，有方形也有圆形的。两侧有刻度，一侧以g 为 计数单位，对侧以百分率计。 2用滴管加0.1mol/LHCl 于血红蛋白稀释管内，到刻度10 处。 3用血红蛋白吸管的尖端吸上个实验中烧杯中的血，吸血至刻度20mm3 处（0.02ml）。 4用滤纸片或棉球擦净吸管口周围的血液，将吸管插入血红蛋白稀释管 的盐酸内，轻轻吹出血液至管底部，反复吸入并吹出稀释管内上层的 盐酸，洗涤吸管多次，使吸管内的血液完全洗入稀释管内。摇匀或用 小玻璃棒搅匀后，放置10min，使盐酸与血红蛋白充分作用。 5把稀释管插入标准比色架两色柱中央的空格中，使无刻度的两侧面位 于空格的前后方，便于透光和比色。 6用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水（每加一滴要搅拌），边滴边观察 颜色，直至颜色与标准玻璃色柱相同为止。稀释管上液面的刻度读数 即为每100ml 血液血红蛋白的克数。 家兔动脉血压的神经、体液调节 【实验目的】 1掌握测定动脉血压直接法及动脉插管方法。 2了解温血动物的麻醉、固定及手术方法。 3观察心血管活动的某些影响因素。 【实验原理】 心脏受交感神经和迷走神经支配。心交感神经兴奋，对心脏产生正性变时、变力 、变传导作用，从而使心输出量增加。心迷走神经兴奋，对心脏产生负性变 时、变力、变传导作用，从而使心输出量减少。支配血管的植物神经主要是 交感缩血管神经，其兴奋时主要引起缩血管效应，外周阻力增加。中枢通过 反射活动调节心血管的活动，改变心输出量及外周阻力，从而调节动脉血压 。心血管活动尚受体液因素的调节。其中主要有肾上腺素和去甲肾上腺素。 本实验是以动脉血压为指标，在整体条件下，施加某些因素，观察神经、体 液因素对心、血管的调节作用。 【实验材料】 家兔 多道生理记录仪、血压换能器、动脉插管、三通管。兔手术台、哺乳类手术 器破、注射器、有色丝线、纱布、棉花。25氨基甲酸乙酯、1肝素。生理 盐水、l万去甲肾上腺素。 【实验方法】 1. 麻醉和动物固定：兔称重后，按1gkg体重的剂量由兔耳 缘静脉缓慢注入25氨基甲酸乙酯溶液将动物麻醉。注射 过程中注意观察动物的肌张力、呼吸频率及角膜反射的变 化，防止麻醉过深。麻醉好的动物仰卧固定于手术台上， 注意颈部必须放正拉直。 2. 分离颈部血管和神经：用弯剪刀剪去颈部的毛，作长57 厘米的正中切口，钝性分离皮下组织和肌肉，即可见到气 管，将气管两旁的肌肉拉开，便可在气管两侧的深部找到 颈动脉鞘，内有颈总动脉、迷走神经、减压神经和交感神 经。仔细辨认并小心分离，在左侧减压神经和交感神经下 穿不同颜色湿丝线备用然后分离双侧的迷走神经和颈总 动脉，穿线备用。 3. 动脉插管：分离右侧颈总动脉3厘米左右，近心端用动脉 夹夹闭，远心端用线结扎耳缘静脉注入肝素1ml，然后 在结扎的近端剪一斜口，向心脏方向插入动脉插管，用线 将插管与动脉扎紧，防止滑脱。放开动脉夹，记录动脉血 压。 观察项目 1、观察正常血压曲线。 2、用动脉夹夹闭左侧颈总动脉510秒，观察血压变化。 3、刺激减压神经：以中等强度，频率为10-15次/秒，波宽2 毫米的连续电脉冲。刺激一次减压神经，观察血压有何变 化？然后用两根丝线在该神经中部两处接扎，并在两结扎 间将神经切断，分别刺激切断后的神经中枢端和外周端， 观察对血压影响有何不同？ 4、刺激迷走神经：结扎并剪断双侧迷走神经，观察血压变 化刺激右侧外周端，观察血压变化。 5、静脉注射去甲肾上腺素：由耳缘静脉注入1万去甲肾上 腺素0.3 ml，观察血压变化。 6、刺激交感神经：结扎并剪断左侧交感神经，观察左侧耳 都血管的变化，然后用中等强度电流连续刺激其头端，观 察左侧耳部血管变化。 尿生成的影响因素 【实验目的】 1学习输尿管插管技术。 2观察影响尿量的几种因素。 【实验原理】 尿的生成过程包括：肾小球的过滤作用；肾小管与集合管的 重吸收作用；肾小管与集合管的分泌作用。在整体内，这 3个过程往往受到生理性的调节。凡影响这些过程的因素 ，都可影响尿的生成而引起尿量的改变。 【实验材料】 家兔、手术台、常用手术器械、或细塑料管、刻度试管、 2ml及20ml注射器、25%氨基甲酸乙酯溶液、20%葡萄糖注 射液、生理盐水、垂体后叶素（5单位/ml） 【实验方法】 1取家兔一只，用25%氨基甲酸乙酯（1g/kg体重）耳缘静脉注射 ，麻醉后，背位固定于手术台上。 导尿管直接由实验动物的尿道插入。实验动物应选择雄性，插导尿管 时用液体石蜡浸润后顺尿道轻轻插入膀胱。插管是若遇阻力：不可强 插，应拔出重插。 依次进行下列项目实验。注意：每项实验前都要记录尿量作为对照。 实验观察待尿流量稳定后，即可进行下列各项实验观察。每项实验开 始时，都应先记录一段尿量曲线作为对照；然后进行注射或刺激，并 连续记录和观察至效应明显和恢复过程。 （1）自耳缘静脉注射的生理盐水20ml，观察尿量的变化。 （2）自耳缘静脉注射20%葡萄糖液15ml，观察其变化。 （3）自耳缘静脉注射110000肾上腺素0.1ml，观察其变化。 （4）自耳缘静脉注射垂体后叶素0.2ml，观察和记录其变化20min。 (5)自耳缘静脉注射呋塞米0.2ml ，观察和记录其变化20min。 结果：记录兔尿量并观察其变化。 小白鼠破坏小脑引起的共济失调 【实验目的】 一侧小脑损伤后的动物，躯体运动表现异常，通过对异常运动的观察，了 解小脑的机能。 【实验原理】 小脑具有维持身体平衡，调节肌紧张和协调肌肉运动等机能。当小脑损伤 后，随着破坏程度的不同，可表现出不同程度的肌紧张失调及平衡失调。 【实验材料】 小白鼠、探针、棉花。 【实验方法】 1. 观察正常小鼠的活动情况。 2. 用探针破坏某一侧小脑，切勿损伤中脑，然后迅速取出探针，用棉球止血 。 3. 放开缚线观察小白鼠