苏教版生物选修1全册精品课件第一章第一节.ppt

栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (二) 无菌操作和接种技术术及微生物的分离、 培养与数量测测定 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 学习导习导 航 1.学会无菌操作和接种技术。(重点) 2研究培养基对微生物的选择作用。(重点) 3了解平板分离微生物的方法和计数。(重点) 4简述从土壤中分离出分解纤维素的微生物的 方法。(难点) 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 新知初探思维启动 无菌 培养基 玻璃刮铲铲 穿刺 平板划线线 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 2.无菌操作微生物接种技术术的关键键 (1)培养微生物用的试试管、培养皿和微生物培 养基等，在接种之前都需要_。 (2)通常接种操作要在_的附近 进进行。 灭灭菌 酒精灯火焰 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 1在微生物的培养过过程中为为什么要进进行无 菌操作？ 提示：无菌操作的目的是防止受到空气中的 杂杂菌污污染。 想一想 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 二、微生物的分离 1.原理：根据微生物对对_、氧气、 pH等要求的不同，通过过只提供目的微生物生 长长的_条件，或加入某些抑制剂剂使非目 的微生物不能生长长，从而达到_ 微生物的目的。 2.方法 (1)据菌落形态态特征初步分离 营营养成分 必需 选择选择 分离 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 菌落：_微生物在适宜的_培 养基表面或内部生长长、繁殖到一定程度，可 以形成肉眼可见见的、有一定_的子 细细胞生长长群体。当固体培养基表面众多菌落 连连成一片时时，称为为_。 菌落特征：不同微生物在_培养基 上生长长形成的菌落或菌苔一般都具有稳稳定的 特征，可以成为对该类为对该类 微生物进进行_、 _的重要依据。 单单个 固体 形态结态结 构 菌苔 特定 分类类 鉴鉴定 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 涂抹平板法 平板划线线法 单单个 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (1)使用已灭菌的接种环、培养基，操作过程中不 再灭菌。() (2)富含有机物的土壤中微生物的种类和数量少， 反之则多。() (3)菌落是肉眼鉴别微生物不同种类的重要依据。 () (4)稀释涂抹平板法的结果都可在培养基表面形成 单个的菌落。() 判一判 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 三、土壤微生物的分离和计计数 1.准备实验备实验 器材 2.采集土壤，制备悬备悬 液 (1)制备悬备悬 液 称取0.5 g土壤样样品，倒入盛有50 mL无菌水的 锥锥形瓶，振荡荡20 min，使土样样充分打散，即 成为为102 g/mL的土壤悬悬液。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (2)等比稀释释 用无菌移液管吸取0.5 mL土壤悬悬液注入盛有 4.5 mL_的1号试试管，配成103 g/mL 的土壤悬悬液。取另一支无菌移液管吹吸1号试试 管3次，使悬悬液均匀，再吸取0.5 mL注入盛有 4.5 mL无菌水的2号试试管，配成104 g/mL的 土壤悬悬液。以此类类推，依次配制成105 g/mL 、106 g/mL、107 g/mL、108 g/mL的土 壤悬悬液。 无菌水 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 3.选择选择 适于分离特定微生物的培养基 不同微生物的代谢谢特性不同，通过过 _可选选出所需要的特定微生物。 4.接种 采用3支无菌移液管分别别吸取108 g/mL、107 g/mL、106 g/mL的土壤悬悬液各1 mL加入培养 皿中，每个浓浓度设设置_个重复，并充分振 荡荡混合均匀，用_平板法进进行分离。 选择选择 培养基 3 涂抹 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 5.培养与观观察 将培养皿倒置于_ 恒温箱中培养1 2 d，观观察细细菌菌落。 6.计计数菌落 培养2448 h后取出平板计计数，选选取菌落数 为为30300的一组为组为 代表进进行统计统计 。 每克土壤样样品的细细菌数某一稀释释度几次重 复培养后的菌落平均数稀释释倍数(假定涂抹 所用稀释释液为为1 mL)。 37 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 2A同学分离与培养土壤微生物时时与其他同 学的结结果相差很大，请请分析可能的原因是什 么？并进进一步通过对过对 照实验验证实验验证 原因。 想一想 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 可能原 因 实验验证实验验证结论结论 所取土 样样不同 其他同学用与 A同学一样样的 土样进样进 行实验实验 若结结果与A同学的一致， 则说则说 明土样样没问题问题 ；若 结结果与A同学的不一致， 则说则说 明A同学操作失误误 或培养基配制有问题问题 培养基 污污染或 操作失 误误 将A同学配制 的培养基在不 加土样样的情况 下进进行培养， 作空白对对照 若有菌落出现现，则说则说 明 培养基被污污染，若无菌 落出现现，则说则说 明未被污污 染 提示： 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 四、设计实验设计实验 分离土壤中能分解纤维纤维 素的微生 物 1.研究目的 从土壤微生物中筛选筛选 出能分解纤维纤维 素的微生物 。 2.实验实验 原理 纤维纤维 素分解菌可以分泌_，在用 _作为为惟一碳源的培养基中，纤维纤维 素分 解菌能很好地生长长，其他微生物则则不能生长长。 纤维纤维 素酶 纤维纤维 素 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 3.方法步骤骤 (1)制备选择备选择 培养基：培养基中提供碳源的物 质质只有_。 (2)分装 (3)制备备土壤稀释释液：依次制备备稀释释度为为101 、102、103、104、105的土壤稀释释液。 纤维纤维 素 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (4)接种培养：分别别吸取各稀释释度的土壤稀释释液 1 mL接种到滤纸滤纸 条上，每个稀释释度重复4次， 置_中培养。 (5)观观察：检查检查 各试试管中滤纸滤纸 条上出现现的 _和滤纸颜滤纸颜 色的变变化情况。 培养箱 菌落 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 3在等比稀释释的过过程中如何使微生物在菌液中 均匀分布？你认为计认为计 数的菌落与实际实际 菌落之间间 存在什么样样的关系？ 提示：每次吸取前都要将土壤悬悬液充分振荡荡混 合均匀。实际实际 菌落数目大于计计数的菌落数目。 想一想 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 要点突破讲练互动 无菌操作 1.无菌技术术的概念：防止一切外来杂杂菌的侵入， 并保持灭灭菌物品及无菌区域不再被污污染的方法， 称为为无菌技术术。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 2.无菌技术的具体内容 (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进 行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培 养基等进行灭菌。 (3)实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避 免周围环境中微生物的污染。 (4)实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具 与周围物品接触。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 特别提醒 在微生物的实验室培养中，无菌技术的核心 是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭 菌锅、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这 些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( ) A接种环、手、培养基 B高压锅、手、接种环 C培养基、手、接种环 D接种环、手、高压锅 例例1 1 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 【解析】 此题题考查查学生对对无菌技术术的掌握。 高压压蒸汽灭灭菌锅锅是灭灭菌的一个设备设备 ，通常用于 培养基的灭灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种 方法。火焰灼烧烧可以迅速彻彻底地灭灭菌，适用于 微生物的接种工具，如接种环环。 【答案】 C 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 1.下列操作错误的是( ) A用酒精擦拭双手 B用氯气消毒水源 C实验室用紫外线进行消毒 D玻璃器皿(吸管、培养皿)用酒精直接擦拭 即可达到彻底灭菌的目的 变变式训练训练 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 解析：选选D。玻璃器皿、金属用具等耐高温、 需要保持干燥的物品，应应采用干热灭热灭 菌法进进 行灭灭菌，而用酒精直接擦拭达不到彻彻底灭灭菌 的目的。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 1原理：大多数细菌、许多真菌和单细胞藻 类能在固体培养基上形成孤立的菌落。平板 分离法能将单个微生物分离和固定在固体培 养基表面或里面，每个孤立的活微生物体经 过生长、繁殖均可形成便于移植的菌落。 平板分离法 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 2.常用培养基：最常用的分离、培养微生物的固体培养 基是琼脂固体培养基。 3.方法：(1)涂抹平板法：分离材料进行10倍系列稀释， 取一定稀释度样品倒入预先准备好的琼脂平板，用无菌 玻璃刮铲将样品涂布均匀，细菌菌落常仅在平板表面生 长。 (2)混合平板法：分离材料进行10倍系列稀释，取一定稀 释度样品与溶化的琼脂混合，将与样品混合的琼脂倒入 无菌平皿，细菌菌落出现在平板表面及内部。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (3)平板划线法：有扇形划线、连续划线、方格划 线等。 4.目的：通过采用各种平板分离法在培养基上得到 目的微生物的单个菌落。 (1)灭菌后的接种环须冷却后再挑取菌种，否则会 杀死菌种。 (2)整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行，避免杂 菌污染。 (3)划线时用力大小要适当，防止用力过大使培养 基划破。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (2012盐城高二检测)下图是微生物平板 划线示意图。划线的顺序为12345。下 列操作方法正确的是 ( ) A操作前要将接种环放在火焰旁边灼烧灭菌 B划线操作要在火焰上进行 C在5区域中才可以得到所需菌落 D在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接 种环灭菌 例例2 2 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 【解析】 操作前要将接种环环放在酒精灯的 外焰灼烧进烧进 行灭灭菌；整个操作过过程要在酒精 灯旁进进行；1、2、3、4、5这这五个区域都可 能有所需菌落；在每次画线线前对对接种环环灼烧烧 是为为了杀杀死上次画线结线结 束后接种环环上残留的 菌种，画线结线结 束后对对接种环灭环灭 菌是为为了杀杀 死接种环环上残留的菌种，避免细细菌污污染环环境 和感染操作者。 【答案】 D 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 变式训练 2.有关稀释涂抹平板法的叙述，错误的是 ( ) A首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B然后将不同稀释度的菌液分别涂抹到琼脂 固体培养基的表面 C适宜条件下培养 D结果都可在培养基表面形成单个的菌落 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 解析：选选D。稀释释涂抹平板法是将菌液进进行一 系列的梯度稀释释。然后将不同稀释释度的菌液分 别别涂抹到琼琼脂固体培养基的表面，在适宜条件 下培养。只有在稀释释度足够够高的菌液里，聚集 在一起的微生物将被分散成单单个细细胞，从而能 在培养基表面形成单单个的菌落。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 菌落数目的统计统计 方法 1.显微镜直接计数法 (1)原理：此法利用特定细菌计数板或血细胞 计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中 微生物的数量。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (2)方法：用计数板计数。计数板是特制的载玻 片，其上有特定的面积为1 mm2，高为0.1 mm的 计数室，一个计数室又被分成25个(或16个)中 格，每个中格再被划分成16个(或25个)小格，每 个计数室都由400个小格组成。 (3)操作：将稀释的样品滴在计数板上，盖上盖 玻片，然后在显微镜下计数45个中格中的细 菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再 按计算公式求出每毫升样品中所含的细菌数。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (4)计算公式 每毫升原液所含细菌数每小格平均细菌数 40010000稀释倍数。 (5)缺点：不能区分死菌与活菌。 2.间接计数法(活菌计数法) (1)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基 表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推 测出样品中大约含有多少活菌。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (2)操作 设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个 稀释度的菌液，分别取0.1 mL接种到已制备好 的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂布在整 个平板表面，放在适宜的温度下培养计数菌落 数。为使结果接近真实值，可将同一稀释度菌 液加到三个或三个以上的平板上，经涂布、培 养，计算出菌落平均数。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 为了保证结果准确，一般选择菌落数在30 300的平板进行计数，若设置的重复组中结果 相差太远，意味着操作有误，需重新实验。 3.滤膜法 (1)实例：测定饮用水中大肠杆菌的数目。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (2)过程：将已知体积的水过滤后，将滤膜放于 伊红 美蓝培养基上培养，在该培养基上，大 肠杆菌菌落呈现绿色，并带有金属光泽可根据 培养基上绿色的菌落数目，计算出水样中大肠 杆菌的数量。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 特别提醒 统计菌落数目的注意事项： 一般选择菌落数在30300的平板进行计数。 统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。 统计结果一般用菌落数而不是用活菌数表示。 设置对照，目的是排除实验组中无关因素对实 验结果的影响，提高实验结果的可信度。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 下列是关于检测土壤中细菌总数实验操 作的叙述，其中错误的是( ) A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高 温、高压灭菌后倒平板 B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水 各0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C将实验组和对照组平板倒置，37 恒温培 养2448小时 D确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上 的实验组平板进行计数 例例3 3 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 【思路点拨拨】 本题题主要考查统计查统计 菌落数目 的方法，解答本题题需从以下几点入手： 区分实验材料的灭菌方法。 理解空白对照在菌落计数实验中的作用。 明确菌落计数的选择范围。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 【解析】 本题题考查查的是土壤微生物总总数的 计计数，所以培养所使用的培养基就应该应该 是基 本培养基，并要经过经过 高压压蒸汽灭灭菌处处理；涂 布时时要对样对样 本的水溶液进进行稀释释，一般选选取 104、105、106倍的土壤稀释释液各0.1 mL进进行 涂布，为为了检查检查 平板培养基是否制备备合格， 要同时时把一培养基接种少量无菌水，以作空 白对对照； 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 培养一段时间时间 后，如果平板上菌落个数在30 300之间间，即可把该组该组 所有平板的菌落计计数， 然后取其平均值值，即可计计算出土壤细细菌的总总数 。而D项项是菌落数在300以上，故D项错项错 。 【答案】 D 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 互动探究 C项项倒置平板的目的是什么？ 【提示】 防止皿盖上的冷凝水落入培养基， 造成培养基污污染。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 【探规寻规寻 律】 每一稀释释度下设设置多于3个 平板，一般选择选择 菌落数在30300之间间的平 板计计数。若几个平板的菌落数均不在30 300之间间，但几个平板菌落数目相近，且接 近30300之间间(如菌落数目为为28、25、24、 27)，则则也可以取其平均值值作为为菌落数。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 变式训练 3. (2012安康高二检测)自然界中的微生物往往 是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将 它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是 对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关 问题。 步骤如下： 制备稀释倍数为102、103、104、105、106的 系列稀释液。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 为了得到更加准确的结果，应选用_ 法接种样品。 适宜温度下培养。 结果分析： (1)测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106 的培养基中，得到以下几种统计结果，与事实 更加接近的是( ) A一个平板，统计的菌落数是23 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 B两个平板，统计的菌落数是22和26，取平 均值24 C三个平板，统计的菌落数分别是21、5和 52，取平均值26 D四个平板，统计的菌落数分别是21、30、 24和25，取平均值25 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (2)一同学在稀释倍数为106的培养基上测得平 板上菌落数的平均值为23.4，那么每升样品中 的菌落数是(涂布平板时所用的稀释液体积为 0.2 mL)_。 (3)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比 测得的数量_(多、少)，因为 _ _ _。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 解析：若对对大肠肠杆菌进进行计计数，则则需要用稀 释释涂抹平板法接种样样品。实验时实验时 ，每一个浓浓 度至少涂布三个平板，以增强实验实验 的说说服力 和准确性。(1)应选应选 取多个菌落数相差不大的 平板计计数，取其平均值值。(2)23.40.2106 1.17108。(3)因为为菌落可能由1个或多个大肠肠 杆菌连连在一起生长长而成，所以实际实际 活菌数量 要比测测得的数量多。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 答案：步骤骤：稀释释涂抹平板 (1)D (2)1.17108 (3)多 当两个或多个大肠肠杆菌连连在一起时时， 平板上观观察的是一个菌落 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 实验探究专项突破 【操作与实实践】 微生物的分离包括样品稀释、划线或涂布及培 养三个步骤。 微生物的分离 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 1.稀释释 用1 mL无菌吸管吸取1 mL大肠肠杆菌培养液，加 入到盛有9 mL无菌水的大试试管中，充分混匀， 然后用无菌吸管从此试试管中吸取1 mL加入另一 支盛有9 mL无菌水的试试管中，混合均匀，依次 类类推制成101、102、103、104、105、106 系列稀释释度的大肠肠杆菌稀释释液。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 2.划线或涂布 (1)平板划线分离法在近火焰处，左手拿 皿底，右手拿接种环，挑取大肠杆菌培养液 在平板上划线，常用的划线方法有平行划线 和连续划线两种(如图)。平行划线时，每转 一个角度烧一次接种环。划线完毕后，盖上 培养皿盖，做好标记。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 特别提醒 平板划线法中的注意事项 取菌种之前及每次划线之前都需要将接种 环灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接 种环，每次灼烧目的如下表： 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 取菌种 之前 每次划线线之前划线结线结 束 目 的 杀杀死接 种环环上 原有的 微生物 杀杀死上次划线线后接 种环环上残留的菌种 ，使下次划线线的菌 种直接来源于上次划 线线的末端，使每次 划线线后菌种数目减 少 杀杀死接种环环 上残存的菌种 ，避免细细菌 污污染环环境和 感染操作者 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 从第二次以后的划线操作总是从上一次划 线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数 的增加逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖 而来的菌落。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 (2)涂布分离法取3个平板，底面分别别用 记记号笔写上104、105和106三种稀释释度， 然后用无菌吸管分别别吸取相应应稀释释度的稀释释 液各0.1 mL，放入已标记标记 好的平板上，用无 菌玻璃刮铲铲在培养基表面轻轻轻轻 地涂布均匀， 室温下静置510 min，使菌液吸附进进培养基 (如图图)。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 特别提醒 将玻璃刮铲铲末端浸在盛有体积积分数为为 70%的酒精的烧烧杯中。取出时时，要让让多余 的酒精在烧烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精 的玻璃刮铲铲在火焰上引燃。 操作中一定要注意防火，不要将过热过热 的玻 璃刮铲铲放在盛放酒精的烧烧杯中，以免引燃其 中的酒精。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 3.培养 将划线或涂布接种的平板倒置于37 培养箱 中，培养1624 h，即可长出单菌落。 栏目 导引 新知初探 思维启动 要点突破 讲练互动 知能演练 轻巧夺冠 实验探究 专项突破 第一章 无菌操作技术实术实 践 【问题问题 与探究】 1.在涂布平板操作中，如何避免杂杂菌污污染？ 【提示】 (1)酒精灯与培养皿的距离要适中。 (2)接种环环、玻璃刮铲铲不能接触任何物体。 (3)接种环环要用酒精灯灼烧烧。 (4)将沾有少量酒精的