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EB病毒PCR定量检测 20140915 李英辉 内容 一、EB病毒 二、EB病毒相关疾病 三、EB病毒与鼻咽癌 四、血浆EB病毒DNA水平与肿瘤负荷 五、上市产品情况 六、问题与方案 七、项目计划 一、 EB病毒 1964年Epstein、Barr在Burkitt淋巴瘤细胞系发现的 第一个人类肿瘤病毒，又名人类疱疹病毒4型（ HHV-4），是双连DNA病毒。 世界上90%以上的成人都曾感染过EBV，大多终身 在体内以无症状、潜伏感染形势存在 二十世纪末被国际抗癌联盟列为类致癌物 二、 EB病毒相关疾病 肿瘤性疾病 Burkitts lymphoma 伯基特淋巴瘤 （地方性， 100%） Hodgkins lymphoma霍奇金淋巴瘤（40%） Nasopharyngeal carcinoma鼻咽癌（地方性， 100%） Gastric carcinoma胃癌（10%） 非肿瘤性疾病 Infectious mononucleosis传染性单核细胞增多症 （100%） 三、EB病毒与鼻咽癌 鼻咽癌（NPC）属于地方性肿瘤，约80%的患者分 布于中国华南地区及东南亚地区，发病率约为20- 30/100 000人,广东省的发病率最高,又称“广东瘤” 鼻咽癌病因 1、遗传 2、EB病毒 3、环境 N Engl J Med. 2004 Jun 10;350(24):2461-70. 四、血浆EB病毒DNA水平与肿瘤负荷 -分期 Cancer Res. 2000 May 1;60(9):2351-5. 四、血浆EB病毒DNA水平与肿瘤负荷 -放疗过程中监控 四、血浆EB病毒DNA水平与肿瘤负荷 -术后监控 复发监控 N Engl J Med. 2004 Jun 10;350(24):2461-70. 四、血浆EB病毒DNA水平与肿瘤负荷 -复发监控 OS vs Plasma EBV DNA Head Neck. 2012 Aug;34(8):1064-70 五、上市产品情况 公司类类型灵敏度线线性范围围样样品类类型样样本用量 之江生物定性 全血 艾康生物定量 全血 普瑞康生物 定量 100IU/ml 血清或血浆 圣湘生物定量400拷贝/毫升 4.01024.0109 全血、血浆和咽 拭子 血浆100ul,全血 200ul,咽拭子 500ul 达安基因定量500拷贝/毫升 血 鑫诺美迪基 因 定量 血清或血浆 六、问题与方案 问题： 灵敏度 解决方案： 1、设计靶基因检测片段小于100bp 2、公司已有的血浆抽提方法 3、甘油保存校准品 七、计划 项目内容项目指标预期完成时间 查阅文献，EBV靶序列的选择 EBV保守区域序列人工合成9月30 引物及探针设计检测用引物、MGB探针设计合成9月30 构建校准品质粒克隆测序验证成功构建克隆菌10月17 质粒抽提质粒抽提、线性化10月24 制备校准品制备EBV校准品及
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