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文档简介

二、基因表达载体的构建（核心步 骤） 先用同一种限制 酶分别切割目的 基因和质粒，再 用DNA连接酶将 二者连接，形成 重组DNA分子。 三、将目的基因导入受体细胞（转化） n n 常用的受体细胞：常用的受体细胞： n n 有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物 细胞等。细胞等。 1、受体细胞是植物细胞 n农杆菌转化法：主要侵染双子叶植物（伤 口分泌酚类化合物吸引农杆菌） n基因枪法 n花粉管通道法 1）土壤农杆菌法 2）基因枪法 3）花粉管通道法 2、受体细胞是动物细胞 n显微注射法 n注入动物受精卵 1982年，世界上第一例体型比普通 小鼠大1.8倍的转基因超级小鼠诞生 3、受体细胞是微生物 n将目的基因导入原核生物的好处是什么？ n繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 n要想使重组DNA顺利进入细菌细胞内，最 大的难题是什么？ n一般用CaCl2处理，改变细胞膜的通透性， 使得重组DNA能够进入细胞。 四、目的基因的检测与鉴定 检测转基因生物的DNA是否插入目的基因 检测目的基因是否转录出了mRNA 检测目的基因是否翻译成蛋白质 检测性状 分子 水平 个体水平 1、检测目的基因 nDNA分子杂交技术 n提取转基因生物的DNA n制作分子探针（目的基因的一段单链序列 ） n进行分子杂交 2、检测mRNA
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