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羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅蚀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃蒀莀袃衿葿蒂蚆膈葿薄袂膄蒈螇蚄肀蒇蒆羀羆肃蕿螃袂肃蚁羈膁肂莁螁肆肁蒃羆羂膀薅蝿袈腿蚈薂芇膈蒇螈膃膇蕿蚀聿膇蚂袆羅膆莁虿袁膅蒄袄膀芄薆蚇肆芃蚈袂羂节莈蚅袈芁薀袁袄芁蚃螄膂芀莂罿肈艿蒅螂羄芈薇羇袀莇虿螀腿莆荿薃肅莅蒁螈羁莅蚃薁羇莄莃袇袃莃蒅 普通生物化学习题解析参考绪论习题简答题1什么是生物化学?它主要研究哪些内容?研究活细胞和有机体中存在的各种化学成分及其所参与的化学反应生命现象化学基础的一门科学。研究内容:静态生物化学:构成生物体的基本物质的结构、性质及结构与功能的关系。动态生物化学:构成生物体的基本化学成分在生命活动过程中的变化规律(物质代谢和能量代谢)。信息生物化学:包括核酸的生物合成,蛋白质的生物合成,物质代谢与基因表达的调控等。2生物化学经历了哪几个发展阶段?各个时期研究的主要内容是什么?试举各时期一二例重大成就。准备和酝酿阶段(18c中期-20c初):研究生物体的化学组成。如脂类、糖类和氨基酸性质的系统研究;发现可溶性催化剂(酶)建立与发展阶段(20c初-20c中叶):重要分子的发现和物质代谢途径的确定。如确定了生物体内主要的物质代谢途径;发现了多种激素、必需氨基酸,必需脂肪酸和多种维生素深入发展阶段(20c中叶-20c末):分子生物学时期。如建立DNA双螺旋结构模型;兴起重组DNA技术;人类基因组研究黄金时期(本世纪初):后基因组时期。如功能基因组学、蛋白组学、药物基因组学等研究。蛋白质化学习题一.名词解释氨基酸:含有氨基的羧酸,是肽和蛋白质的构件分子。蛋白质的稀有氨基酸:非编码氨基酸,标准氨基酸的衍生物。必需氨基酸:人体自身不能合成或合成的量不足,必须通过食物供应的氨基酸。包括Thr、Lys、Phe、Met、Trp、Leu、Ile、Val八种。非蛋白质氨基酸:不构成蛋白质氨基酸;150多种,多为标准AA衍生物,还有-,-,-氨基酸,D型氨基酸。氨基酸等电点(pI):解离成阴、阳离子的程度及趋势相等,氨基酸主要为兼性离子,溶液净电荷为零时溶液pH。茚三酮反应:氨基酸与茚三酮在弱酸性溶液中加热产生蓝紫色(脯氨酸、羟脯氨酸黄色)有色化合物的反应。用于氨基酸定性、定量分析。Edman反应:碱性条件下氨基酸-NH2的H原子被异硫氰酸苯酯(PITC)烃基苯氨基硫甲酰基取代生成苯氨基硫甲酰氨基酸(PTC-氨基酸),无水HF中生成苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-氨基酸:无色)的烃基化反应。可重复测定多肽链N端氨基酸排列顺序,是氨基酸自动测序的基础。Sanger反应:碱性条件下氨基酸-NH2的H原子被2,4-二硝基氟苯的烃基二硝基苯基取代生成二硝基苯基氨基酸(黄色)的烃基化反应。可用于N端分析。肽键:一个氨基酸的-羧基与另一氨基酸的-氨基脱水缩合形成的键。肽:氨基酸通过肽键相连而形成的化合物。寡肽:25个以下氨基酸残基形成的肽。多肽:多于25个氨基酸残基形成的肽。N-端:多肽链具游离的氨基的一端。C-端:多肽链具游离的羧基的一端。二硫键:两个半胱氨酸侧链巯基脱氢氧化形成的共价键,是维持某些蛋白质空间结构稳定的重要因素。蛋白质:由不同的-氨基酸按一定的序列通过肽键缩合而成的,具有较稳定的构象并具有一定生物功能的大分子。结合蛋白质:由单纯蛋白质和非蛋白辅基核酸、糖、脂、磷、金属和色素等结合构成。 寡聚蛋白:二条或二条以上肽链非共价结合。蛋白质一级结构:蛋白质分子中氨基酸残基的排列顺序。肽单位:与肽键相关的6个原子形成的一个刚性平面。二面角(,):决定了相邻肽平面的相对空间位置的N-Ca键在(180180)旋转的旋转角度角和Ca-C键在(180180)旋转的旋转角度角。蛋白质二级结构:肽链的局部空间结构,多肽链本身的折叠和盘绕形成的空间结构单元。 模序:多肽链中在空间上靠近的一些二级结构单元彼此相互作用,形成的有规则的,在空间上能辨认的二级结构组合(聚集)体。结构域:球状蛋白质的折叠单位,多肽链上某些模体或模序相互联系,进一步形成可明显区分空间结构区域,并具有特定的生物学功能的紧密的近似球形的结构。蛋白质三级结构:多肽链上的所有原子(包括主链和侧链)在三维空间的分布。蛋白质四级结构:蛋白质分子内非共价键连接的各自具有独立三级结构的多肽亚基的种类、数量以及各个亚基在蛋白质分子内的空间排布和相互作用。分子伴娘:帮助其他含多肽结构的物质在体内进行正确的非共价的组装的蛋白质。同源蛋白质:在不同生物体中行使相同或相似功能且具有明显的氨基酸序列相似性的蛋白质。别构效应:别构剂与蛋白质别构部位结合而引起其亚基和整个分子构象、性质和功能发生改变。波尔效应:CO2降低血红蛋白对氧亲和力(CO2浓度的增加降低细胞内的pH,血红蛋白结合H和CO2使得血红蛋白对氧亲和力下降)蛋白质变性:理化因素作用下,蛋白质分子内的二硫键和非共价键被破坏,分子内部原有的高度规律性的空间排列发生变化,天然构象发生变化,引起蛋白质理化性质和活性的改变(原有性质发生部分或全部丧失)。蛋白质复性:变性蛋白质解除变性因素后,重新形成蛋白质天然构象。纤维蛋白:分子形状似纤维,难溶于水、韧性大的一类结构蛋白,如角蛋白和胶原蛋白。 球蛋白:分子形状似球形,较易溶于水一类活性蛋白,如肌红蛋白、血红蛋白和胰岛素等。 肌红蛋白:由一条多肽链(153个氨基酸残基)和一个血红素辅基(hemeprostheticgroup)组成的能结合氧并使氧在肌肉内迅速扩散的球状蛋白质。血红蛋白:由四个三级结构几乎与肌红蛋白相同的亚基(22)和四个血红素辅基组成的能结合氧并使氧从肺转运到外周组织的球状寡聚蛋白。盐析:高浓度中性盐破坏蛋白质分子水膜、中和其电荷,蛋白质不变性。但聚集沉淀析出。盐溶:稀浓度中性盐使蛋白质表面同性电荷增加,增加蛋白质分子间的排斥,同时增强蛋白质分子与水分子间的作用,而使蛋白质溶解性增加。电泳:通过带电颗粒能在电场中移动,其泳动速率取决于荷质比(净电荷、大小、形状)的原理,将具不同荷质比的分子分开的一种分离纯化方法。透析:通过小分子能透过半透膜扩散到水或缓冲液的原理,将小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术。层析:利用混合物中各组分物理化学性质差异,使各组分以不同程度分布在两相中(固定相,流过此固定相的流动相),并使各组分以不同速度移动,从而分离的方法。超滤:利用压力或离心力使小分子溶质通过半透膜而蛋白质被截留在膜上而分离的一种技术。离子交换层析:IEC,依据流动相中的组分离子与离子交换剂(固定相)上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析技术。凝胶过滤层析:一种利用带孔凝胶珠作基质,按照分子大小分离蛋白质或其他分子混合物的层析技术。亲和层析:利用共价连接有特异配体的层析介质,分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其他分子的层析技术。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳:通过变性剂十二烷基硫酸钠(SDS)作用使蛋白质变性并与SDS结合,形成均带负电(SDS带负电),荷质比相同的SDS-蛋白质复合物,利用带孔凝胶珠作基质,按照分子大小电泳分离蛋白质或其他分子混合物的一种技术。等电聚焦电泳:外加电场,蛋白质混合物在具有pH梯度的介质中移向并停留聚焦在等电点pH处,形成区带而将具不同等电点的蛋白质分离的一种技术。双向电泳:先按照等电点进行等电聚焦电泳,然后在垂直方向按照分子大小再进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,经染色得到的电泳图是二维分布的蛋白质图。二.简答题1.蛋白质有哪些重要的生物学功能?生物学功能:生物催化(酶);代谢调节(多肽激素等);免疫保护(免疫球蛋白,补体等);物质转运和贮存(离子通道,转运载体等);运动与支持(肌蛋白);生长、繁殖、遗传和变异;生物膜的功能和受体等。2.蛋白质元素组成有何特点?什么是凯氏定氮法?元素组成特点:由CHONSPISe等元素组成:C(5055%)、H(68%)、O(2023%)、N(1518%)、S(04%)、;氮元素含量平均约16%。凯氏定氮法:100g样品中蛋白质含量(g%)=每克样品含氮克数6.251003.试写出20种基本氨基酸的名称、结构及缩写。它们在结构上有什么共同特点?结构上共同特点:C结合(-NH3)(Pro除外)、(-COOH)、H原子和各种侧链(R);C是不对称C,具有手性(Gly除外),蛋白质氨基酸都是L-型。4.如何测定蛋白质的一级结构?一级结构测定步骤:纯化样品,N-端或C-端末端分析,测定由几条肽链组成。N-末端分析:Sanger法、丹磺酰氯法(有很强荧光,灵敏度高)、Edman法、氨肽酶法(外肽酶:肽链外切酶)C-末端分析:羧肽酶法、与苯甲醛沉淀等。拆分二硫键。还原法(含巯基化合物使-SS-还原产生两个半胱氨酸残基(Cys-SH),烷化剂(如碘乙酸)修饰-SH,阻止二硫键再生成);氧化法(过甲酸使-SS-氧化断裂,生成半胱氨磺酸)。氨基酸组成分析:水解样品,氨基酸自动分析仪测定。酸水解法:6mol/LHCl110加热回流1624h,完全水解,Trp被破坏,Gln,Asn酰胺基水解变成Glu,Asp(Glx,Asx)近年来用甲基磺酸代替盐酸。碱水解法:6mol/LNaOH煮沸6h,完全水解,消旋,Ser、Thr、Arg、Lys和Cys破坏。 多肽链部分断裂,蛋白质分解为小片段,肽段分离(至少两套)酶水解法:内肽酶(肽链内切酶)胰蛋白酶法:水解Lys或Arg的羧基形成的肽键糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶)法:水解Phe、Trp和Tyr等疏水氨基酸的羧基形成的肽键 胃蛋白酶法:被断裂键两侧的残基都是疏水性氨基酸如:-Phe-Phe-化学法CNBr法:裂解由Met羧基形成的肽键。测定每条小肽片段中的氨基酸排列顺序(通常用Edman降解法)推断蛋白质的氨基酸排列顺序(重叠肽拼凑)确定二硫键和酰胺基的位置。5.蛋白质的二级结构有几种基本类型?各有何特点?基本类型:-螺旋;-折叠片层;-转角;不规则卷曲特点:-螺旋:右手螺旋,57,47,每个螺旋圈含3.6个氨基酸残基,螺距0.54nm,每个残基沿轴旋转100,上升0.15nm;第N个氨基酸残基的羰基氧与第N4个氨基酸残基的氨基氢形成氢键,走向平行于螺旋轴;R侧链基团伸向螺旋的外侧,其大小、形状及电荷等影响此结构形成。-折叠片层:肽键平面遇C发生折叠,形成锯齿状结构,R侧链交错位于折叠片的上面和下面,两个残基形成一个重复单位;两条或多条肽链片段顺向平行(平行)或反向平行(反平行)排列,形成片层结构;相邻肽链上所有的羰基氧和氨基氢形成链间氢键。 平行(Parallel):119,113;重复单位0.65nm。反平行(Anti-parallel):140,135;重复单位0.70nm。-转角:多肽链180。的回折形成发夹形状;一般四个氨基酸组成,常见氨基酸:Pro,Gly,Asp,Asn,Trp;第1个氨基酸残基的C=O与第4个残基的N-H之间形成氢键。 不规则卷曲(randomcoil):没有确定规律性的松散肽链结构。6.蛋白质的三级结构有何特点?特点:多肽链在二级结构的基础上高度折叠成紧密球形或椭球形结构;大多数可离子化的亲水的氨基酸残基都位于分子表面(表面也含有疏水的氨基酸残基),疏水氨基酸残基大部分埋藏在分子内部(特别是一些疏水性强的氨基酸,如缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸和蛋氨酸,通常水分子被排除在蛋白内部);三级结构可将某些局部的二级结构聚合在一起,形成特定的结构区域,大多为口袋状,核心多为疏水氨基酸,结合蛋白质的辅基常位于其中,多为蛋白质的活性中心;稳定维系三级结构的作用力有:氢键、盐键、疏水键、范德华力、二硫键和配位键。7.维持蛋白质构象的作用力有哪些?维持蛋白质构象的作用力:氢键、盐键、疏水键、范德华力、二硫键8.蛋白质的结构与功能有什么关系?一级结构决定空间结构,空间结构是功能的结构基础,功能是空间结构的外在表现,空间结构尤其活性中心构象变化,功能变化。一级结构与功能的关系1、一级结构不同,生物学功能各异:加压素和催产素2、一级结构的关键部分相同,其功能也相同:同源蛋白3、一级结构的关键部分变化,生物学活性改变或丧失:ACTH(39肽),切去C端15个氨基酸仍有活性,但N端24个氨基酸切去一个就会影响活性;4、一级结构变化,生物学活性改变或丧失:疾病镰刀状红细胞性贫血(Sicklecellanemia)Hb-链6位的GluVal空间结构与功能的关系1、酶原的激活:水解一个或几个特定肽段致使酶分子构象发生重塑酶活性部位形成和暴露,表现出酶活性。2、蛋白质的别构效应(allosterism):一个亚基的构象改变而引起其余亚基和整个分子构象、性质和功能发生改变。9.胶原蛋白的组成和构象有何特点?组成和构象特点:原胶原蛋白分子头尾相连,交错排列,分子间共价交连,形成特征性带状纤维束。原胶原蛋白:3条左手螺旋多肽链相互缠绕形成右手超螺旋分子,长300nm,直径为1.5nm;靠链间氢键以及螺旋和超螺旋的反向盘绕维持超螺旋结构稳定性。胶原链:每一圈螺旋含3个氨基酸残基,每一个氨基酸残基轴向距离为0.31nm,螺距为0.94nm;常重复出现三联体序列-Gly-Pro-Hyp-。10.稳定蛋白质胶体系统的因素是什么?稳定蛋白质胶体系统的因素:分子表面的亲水基团与周围水分子结合形成水化层(水膜);分子表面的亲水基团可结合或释放H+,带一定电荷,水溶液中蛋白质颗粒带相同电荷。11.引起蛋白质变性的因素有哪些?变性蛋白质的性质有哪些变化?变性的因素:热、紫外光、激烈的搅拌、强酸、强碱等。变性特征:1)生物活性丧失(主要标志)。2)理化性质改变:分子形状改变,肽链松散伸展,反应基团增加,易被水解,易被酶消化。蛋白质变性后亲水基团被掩埋,溶解度降低、失去水膜,易形成沉淀析出;但若溶液pH与蛋白质的pI差别较大,蛋白质仍不易沉淀。球状蛋白质的不对称性增加、粘度增加、扩散系数降低,某些蛋白质结晶能力丧失。12.蛋白质分子中有哪些可解离的基团?有什么生理意义?可解离的基团:N-端氨基、C-端羧基、侧链氨基、羧基、羟基、巯基、咪唑基、胍基等。13.为什么可用紫外吸收法测定蛋白质含量?20种氨基酸远紫外区(<220nm):均有光吸收近紫外区(220-300nm):酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸含共轭双键苯环,在280nm处有最大吸收峰。14制备生物大分子的基本步骤是什么?基本步骤确定制备生物大分子的目的和要求(科研、开发、发现新物质)。掌握目的产物的物理化学性质(文献调研和预备性实验)建立相应的可靠的分析测定方法。整个分离纯化过程的“眼睛”制备生物大分子的关键。生物大分子制备的前处理生物材料的选择细胞的破碎生物大分子的提取生物大分子的分离纯化-选择和探索分离纯化方案(最困难过程)。生物大分子制备物的纯度鉴定:要求达到一维电泳一条带,二维电泳一个点,或HPLC和毛细管电泳都是一个峰。产物的浓缩,干燥和保存。15.破碎细胞的方法有哪些?破碎细胞方法:机械法:研磨、组织捣碎器物理法:反复冻融法、超声波、压榨法、冷热交替法化学与生物化学方法:自溶法、溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法。16.水溶液提取生物大分子应注意的主要影响因素是哪些?主要影响因素:离子强度:0.020.05mol/L缓冲液或0.090.15mol/LNaCl溶液;pH值:避免过酸、过碱,一般pH68,蛋白质和酶稳定的范围内,常偏离等电点的两侧; 温度:05,温度耐受力强的蛋白质和酶,可提高温度使杂蛋白变性。防止蛋白酶或核酸酶的降解:加入抑制剂或调节提取液pH、离子强度或极性,使水解酶失活。搅拌与氧化:温和搅拌,加入少量巯基乙醇或半胱氨酸防止巯基氧化。17.在什么情况下用有机溶剂提取生物大分子?常用的有机溶剂有哪些?难溶于水、稀盐、稀酸、或稀碱的蛋白质和酶;既溶于稀酸、稀碱,又溶于含有一定比例有机溶剂的水溶液的蛋白质和酶常用的有机溶剂:乙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇等。18.分离纯化方法依据于生物分子的哪些性质?分离生物大分子的方法:以分子大小和形态差异为依据:差速离心、区带离心、超滤、透析和凝胶过滤等。 以溶解度的差异为依据:盐析、萃取、分配层析、选择性沉淀和结晶等。以电荷差异为依据:电泳、电渗析、等电点沉淀、吸附层析和离子交换层析等。 以生物学功能专一性为依据:亲和层析等19.在分离纯化流程中,早期和晚期的分离纯化方法有何不同?分离纯化流程中,早期和晚期分离纯化方法的不同:早期分离纯化:粗提取液(物质成份复杂,物理化学性质相近的物质很多,目的产物浓度很稀),所选方法要求快速、粗放;能较大地缩小体积;分辨力不必太高;负荷能力要大。吸附、萃取、沉淀法(热变性、盐析、有机溶剂沉淀等)、离子交换(批量吸附、胖柱交换)、亲和层析等;晚期分离纯化:细分级,分辨力高。吸附层析、盐析、凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析、等电聚焦制备电泳、制备HPLC等。20.蛋白质含量测定与纯度鉴定的方法有哪些?含量测定方法:凯氏定氮法、Lowry法、紫外吸收法、染料结合法、胶体金法纯度鉴定方法:电泳、离心沉降、HPLC和溶解度分析等。蛋白质和酶制成品:SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳(再用高效液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)进行联合鉴定则更为理想,必要时再做N末端氨基酸残基的分析鉴定)。溶解度法和高速离心沉降法,现已很少再用。核酸通常采用:琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳,最方便是紫外吸收法。21.影响生物大分子样品保存的主要因素有哪些?空气:潮解、微生物污染和自动氧化。温度:每种生物大分子都有其稳定的温度范围,低温抑制氧化、水解等化学反应和微生物。 水份:水参加水解、酶解、水合和加合,加速氧化、聚合、离解和霉变。光线:光化作用受光催化发生变色、氧化和分解等;吸收光,分子活化不利于保存,紫外线能量大,对制品影响最大。pH:保存液态样品时注意其稳定pH范围时间:生化和分子生物学样品不可能永久存活。三计算与推论题1、计算谷氨酸、精氨酸、丙氨酸的等电点。中性氨基酸:pI=(pKCOO+pKNH3)/2酸性氨基酸:pI=(pKCOO+pKRCOO)/2碱性氨基酸:pI=(pKNH3+pKRNH3)/2谷氨酸:pI=(pKCOO+pKRCOO)/2(2.14.07)23.08精氨酸:pI=(pKNH3+pKRNH3)/2(8.9912.48)210.7丙氨酸:pI=(pKCOO+pKNH3)/2(2.359.87)26.112、用强酸型阳离子交换树脂分离下述每对氨基酸,当用pH70的缓冲液洗脱时,下述每对中先从柱上洗脱下来的是哪种氨基酸?天冬氨酸和赖氨酸:pH70天冬氨酸净电荷1、赖氨酸净电荷1,天冬氨酸先洗脱。精氨酸和甲硫氨酸:pH70精氨酸净电荷1、甲硫氨酸净电荷接近零,甲硫氨酸先洗脱。谷氨酸和缬氨酸:pH70谷氨酸净电荷1、缬氨酸净电荷接近零,谷氨酸先洗脱。甘氨酸和亮氨酸:pH70甘氨酸、亮氨酸净电荷接近零,亮氨酸非极性大,甘氨酸先洗脱。丝氨酸和丙氨酸:pH70丝氨酸、丙氨酸净电荷接近零,丝氨酸非极性小,丝氨酸先洗脱。3、下面的数据是从一个八肽降解和分析得到的,其组成是:Ala、Gly2、Lys、Met、Ser、Thr、Tyr。该八肽用CNBr处理得到Ala、Gly、Lys、Thr;Gly、Met、Ser、Tyr。用胰蛋白酶处理得到Ala、Gly;Gly、Lys、Met、Ser、Thr、Tyr。用糜蛋白酶处理得到Gly、Tyr;Ala、Gly、Lys、Met、Ser、Thr。与DNFB反应可产生DNP-Gly。与肼无水条件下加热,Gly解离出来。请确定该肽的氨基酸顺序。CNBr处理得到Ala、Gly、Lys、Thr;Gly、Met、Ser、Tyr:(Gly、Ser、Tyr)Met;在前得(Gly、Ser、Tyr)Met(Ala、Gly、Lys、Thr)胰蛋白酶处理得到Ala、Gly;Gly、Lys、Met、Ser、Thr、Tyr:(Gly、Met、Ser、Thr、Tyr)Lys;在前得(Gly、Met、Ser、Thr、Tyr)Lys(Ala、Gly)糜蛋白酶处理得到Gly、Tyr;Ala、Gly、Lys、Met、Ser、Thr:GlyTyr;在前得GlyTyr(Ala、Gly、Lys、Met、Ser、Thr)DNFB反应可产生DNP-Gly:N末端为Gly与肼无水条件下加热,Gly解离出来:C末端为GlyGlyTyr与(Gly、Ser、Tyr)Met:(GlyTyrSer)Met(Gly、Met、Ser、Thr、Tyr)Lys与GlyTyrSerMet:(GlyTyrSerMetThr)Lys(Gly、Met、Ser、Thr、Tyr)Lys(Ala、Gly):GlyTyrSerMetThrL

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