猫致敏蛋白Feld1的原核表达、纯化与检测-本科毕业生开题报告.doc_第1页
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海 南 大 学本科生毕业论文（设计）开题报告题 目猫致敏蛋白Fel d 1的原核表达、纯化与检测学生姓名李立行学 号20120108310047学 院农学院专业年级2012级动物科学指导教师裴业春职称、学历讲师，博士计划完成时间2016年5月开题报告一、选题的目的、意义（理论、现实）和国内外研究概况（1）目的：探索和研究猫致敏蛋白的表达、纯化的原理及方法。（2）意义：猫过敏原是引起过敏性疾病（如哮喘、过敏性鼻炎）的常见吸入性过敏原之一，Feld1是猫的主要过敏原之一。为此，我们对Fel d1 链和链进行克隆，构建Feld1 链 链pET表达载体，表达重组蛋白并分析其免疫学特性（3）国内外研究概况： 猫致敏蛋白Feld1在国内与国外都已经有相当程度的研究水平，因为猫过敏原是引起过敏性疾病（如哮喘、过敏性鼻炎）的常见吸入性过敏原之一，并且Feld1是猫的主要过敏原之一。因此，国内外研究主要是对弃免疫性学特性进行研究并根据分子水平研究结果对此类病症研发出相对有效的治疗方法。二、本课题的理论依据、研究内容和研究方法、步骤及进度安排 原核生物（如大肠杆菌）只有一种RNA聚合酶，识别原核的启动子，能够催化所有RNA合成，而且基因表达是以操纵子为单位。操纵子是数个相关的结构基因及其调控区的结合，是一个基因表达的协同单位，而且由于原核生物无核膜，所以转录与翻译是耦联的，二者也是连续进行的。原核生物染色体DNA是裸露的环型DNA，转录成mRNA后，可直接在胞浆中与核糖体结合翻译成蛋白质。每个核糖体可独立完成一条链的合成，多核糖体可同时在一条mRNA合成多条肽链，还可以大大提高翻译效率。而且原核基因不含内含子（intron），也没有转录后的加工过程。 进度安排： 2016年1月-2016年3月 猫致敏原Fel d 1原核表达条件的优化 2016年3月-2016年4月 猫致敏原Fel d 1蛋白的纯化2016年4月-2016年5月 猫致敏原Fel d 1蛋白检测三、本课题的重点、难点，预期结果和成果形式选择表达载体时，要根据所表达蛋白的最终应用考虑。如为方便纯化，可选择融合表达；如为获得天然蛋白，可选择非融合表达。融合表达时在选择外源DNA同载体分子连接反应时，对转录和转译过程中密码结构的阅读不能发生干扰。预期成果及形式成功使猫致敏蛋白Fel d 1进行原核表达，以及成功纯化以及检测。最后以论文方式称述过程及结果、结论。学生签名： 年 月 日指导教师意
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