型复合涂膜剂的体外抗菌研究毕业论文开题报告.doc

X X 学 院毕业设计（论文）开题报告 题 目 新型复合涂膜剂的体外抗菌研究 系 （院） 年级 专 业 班级 学生姓名 学号 指导教师 职称 X X学院教务处二一五年三月开题报告填表说明1.开题报告是毕业设计（论文）过程规范管理的重要环节，是培养学生严谨务实工作作风的重要手段，是学生进行毕业设计（论文）的工作方案，是学生进行毕业设计（论文）工作的依据。2.学生选定毕业设计（论文）题目后，与指导教师进行充分讨论协商，对题意进行较为深入的了解，基本确定工作过程思路，并根据课题要求查阅、收集文献资料，进行毕业实习（社会调查、现场考察、实验室试验等），在此基础上进行开题报告。3.课题的目的意义，应说明对某一学科发展的意义以及某些理论研究所带来的经济、社会效益等。4.文献综述是开题报告的重要组成部分，是在广泛查阅国内外有关文献资料后，对与本人所承担课题研究有关方面已取得的成就及尚存的问题进行简要综述，并提出自己对一些问题的看法。5.研究的内容，要具体写出在哪些方面开展研究，要突出重点，实事求是，所规定的内容经过努力在规定的时间内可以完成。6.在开始工作前，学生应在指导教师帮助下确定并熟悉研究方法。7.在研究过程中如要做社会调查、实验或在计算机上进行工作，应详细说明使用的仪器设备、耗材及使用的时间及数量。8.课题分阶段进度计划，应按研究内容分阶段落实具体时间、地点、工作内容和阶段成果等，以便于有计划地开展工作。9.开题报告应在指导教师指导下进行填写，指导教师不能包办代替。10.开题报告要按学生所在系规定的方式进行报告，经系主任批准后方可进行下一步的研究（或设计）工作。1、 课题的目的意义：由于水果含水量大、果皮脆弱，因而在储存时容易腐烂、变质。近年来人们对水果贮藏运输中保持其不失重，可溶性固形物、可滴定酸等不变化或变化较小的新型复合涂膜剂广泛研究。水果运输中腐烂多数是由细菌引起的。因此研究调整复合涂膜剂不同组分之间的比例，达到最佳的抗菌效果具有重要意义。本文中将会在平板中培养酵母菌、霉菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌，然后配置不同浓度配比的壳聚糖、SiOx、单甘脂涂膜剂，研究其对酵母菌、霉菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等的体外抑菌效应，从而找出新型复合涂膜剂体外抗菌效果最好的配比。目的为水果保鲜中抗菌提供技术参考和理论依据以及为水果的保鲜抗菌提供一些参考，促进水果保鲜行业的快速发展。 2、 文献综述（分析国内外研究现状、提出问题，找到研究课题的切入点，附主要参考文献，约2000字）：我国是世界上水果生产大国，品种和产量均居世界首位，水果生产是国民经济的重要支柱产业，是密切关系人民生活和出口创汇的重要产品。但是，水果若不经过适当的保鲜处理，在储藏、运输等过程中会出现品质和风味的下降、霉变、腐烂等问题，从而造成极大的经济损失。随着现代保鲜技术的发展，安全经济的天然保鲜剂的开发和应用已引起人们的关注，国际食品科学界正掀起对可食性膜保鲜剂广泛应用于水果的研究高潮。我国也相继开发出几类新型的水果保鲜剂，如植酸型、壳多糖及其衍生物、多糖及其衍生物与蛋白混合型等，这类保鲜剂的一个共同特点是无毒、可食，在保鲜效果、便捷程度和保鲜成本方面各有优点。其中甲壳素、壳聚糖（CTS）的保鲜研究由于储量丰富、无毒、保湿及生物相容性和成膜性而倍受重视。1壳聚糖（Chitosan，简称CTS），又称脱乙酰甲壳素甲壳胺，是通过甲壳素一定程度的脱乙酰而制得的一种天然分子碱性多糖作为一种天然的氨基多糖，壳聚糖具有无色无味无毒并具有良好的抑菌性成膜性和生物降解性等特点壳聚糖甲壳素的其他衍生物如酞基化羟基化硫酸酯化羧甲基化物等，都有良好的成膜成丝性、吸湿性、透气性、渗透性和生物可降解性等壳聚糖不但容易在物体表面形成半透膜，还能有效地阻止病菌的入侵并抑制其生长，且该膜对O2、CO2、C2H4具有一定的选择渗透作用因此壳聚糖作为一种新型、无毒、无害的天然食品保鲜剂，近年来较广泛地应用于食品工业领域本文综述了壳聚糖及其衍生物在水果贮藏保鲜中的功能以及应用，以期为壳聚糖在水果贮藏保鲜行业的大规模应用提供理论依据。2壳聚糖具有广谱抗菌性，较低分子量的壳聚糖可通过渗入病菌体内，与致病菌细胞壁初生组织结合，进而抑制细胞壁的发育，或带正电的壳聚糖通过与病原菌细胞核中带负电荷的DNA作用，抑制病原菌的DNA复制及RNA转录。高分子量壳聚糖由于其具有成膜性质，容易覆盖在病原菌表面形成一层致密的膜，封闭了病原菌物质代谢的通道，从而抑制病原菌的生长繁殖。此外，壳聚糖可通过诱导植物提高包括几丁质酶、-1,3-葡聚糖酶和过氧化物酶(POD)在内的生物酶活性，经系列反应途径产生植保素、木质素等物质，从而加厚细胞壁，以阻碍病菌进入植物组织。3Tokura等人用一种异硫氰酸醋标志壳聚糖，测试了不同分子量的壳聚糖与大肠杆菌的作用，发现了大分子量的壳聚糖被阻止在细菌细胞壁表面，而小分子量的壳聚糖却进入了细菌细胞内部结果表明，壳聚糖的抑菌作用是由于壳聚糖阻碍了细菌细胞的营养供应通道而引起的。4目前国内外研究表明，分子量、pH值、浓度、金属离子、温度、晶型、脱乙酰度、酸溶剂、离子强度、菌株、EDTA、菌体培养时间、衍生化等条件都能影响壳聚糖的抑菌效果。但综合国内外研究来看，分子量对壳聚糖抑菌效果的影响是目前的研究重点。另外，pH值、金属离子、温度、浓度和衍生化这几个条件研究也相对较多。5薛丽群等人6的研究表明，不同分子量的壳聚糖对细菌都有抑制作用，但是抑菌效果不同。分子量越低，壳聚糖对细菌的抑制效果越强，当壳聚糖的分子量降低到5010左右时，其对枯草芽孢杆菌、大肠杆的抑菌效果都很明显，且此时有强的抑菌效果。其次，不同浓度对壳聚糖的抑菌效果也有很大的影响。研究表明，随着浓度的增加，壳聚糖的抑菌效果增加，并且壳聚糖对不同的细菌的最低抑菌浓度是不同的。这就说明，不同的菌种会影响到壳聚糖的抑菌效果。此外，pH值也是影响壳聚糖抑菌效果的一个重要因素。研究表明，随着溶液pH值的增加，壳聚糖的溶解性下降，壳聚糖的抑菌效果也随之降低。所以只有当壳聚糖的pH值降低时，其抑菌活性才会增加。7肽聚糖的抑菌效应受诸多环境的影响。刘楠等研究结果表明壳聚糖的抑菌机理，并研究了影响壳聚糖抑菌效果的几种因素，包括分子质量，脱乙酞度，壳聚糖的浓度，pH值等都会对壳聚糖的抑菌效果产生影响。8何日安等通过对抑制圈和最小抑制浓度的测定，研究了不同分子量的低分子量的壳聚糖对稻胡麻叶斑病菌等13种植物原病菌的抑菌作用结果表明对多数植物病原菌来说，在一定范围内，随壳聚糖的分子量的增加，其抑菌能力有所增强，抑菌效果更加明显。9翟佳慧的实验结果即抑菌圈直径来比较各种抑菌剂的作用效果，显示了壳聚糖与环糊精复合前后对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果。当壳聚糖的分子量为四万到十万之间时，经试验表明分子量为十万的壳聚糖，浓度为20m叭时对两种菌抑菌效果明显，对大肠杆菌的平均抑菌直径为11.14mm，对金黄色葡萄球菌的平均抑菌直径为18.89mm。10刘保友等11采用固体培养基体外抑菌法,以两种常规药剂农用药为对照药剂,观察了低分子量壳聚糖对细菌生长的作用结果表明,低分子量壳聚糖不同程度的对姜瘟病菌烟草野火病菌及枯草杆菌起着抑制作用,对枯草杆菌的抑制作用较差。参考文献：1陈彰旭，姜伟，陈志彬，等壳聚糖复合物在水果保鲜中的应用研究进展J化工进展，2011，30(12)：2724-27272 周建中壳聚糖在水果贮藏保鲜中的应用研究J中国果菜， 2014，34 (4)：25-273 胡溪育壳聚糖对水果保鲜作用的研究进展J黑龙江科学，2014,5(6)：133-1344 Tokura,S.K.，Ueno S.，Miyazaki，et alMolecular weight dependent antimicrobial activity of chitosan JMacromolSymp，1997，120：1-95 李小芳壳聚糖抑菌活性及机理研究D兰州兰州大学学位论文，2009：14-196 薛丽群，陈盛不同分子量壳聚糖的制备及其抑茵性能的研究J福建师大福清分校学报，2013，(2)：55-617 林丽娟，蔡洁琼，张婷婷，等低聚壳聚糖对鸡白痢沙门氏茵的体外和体内抑茵效果研究J饲料添加剂，2012，（12）：48-508 刘楠，陈西广，刘成圣，等壳聚糖抑菌性能研究进展J海洋科学，2005，29(10)：90-929 何日安，岳武，姚评佳，等低分子量壳聚糖对植物病原菌的抑制作用研究闭J安徽农业科学，2009，34(7)：1565-156610 李小芳改良壳聚糖的制备及抑菌效果的评价D黑龙江黑龙江大学学位论文，2010：10-1611 刘保友，张广民，张伟，等壳聚糖抑制细菌作用研究J山东农业科学，2006，2：68-693、 课题研究的内容、方法和预期目标：研究内容：以酵母菌，霉菌，大肠杆菌，枯草芽孢杆菌纯菌落平板为研究对象，配置不同配比的壳聚糖和纳米二氧化硅以及单甘酯组成的复合膜剂，采用正交试验研究其抗菌效果。研究方法：（1）菌株分离与培养。在腐烂的水果中分离酵母菌、霉菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。富集分离到的菌株并纯化到不同平板中。（2）新型复合涂膜剂的配置。配置不同配比的新型复合涂膜剂。（3）抗菌实验。将不同配比的新型复合涂膜剂分别滴到不同的已形成菌落的平板中。培养一段时间后测量各个平板中的抑菌圈。预期目标：研究实验中通过测定多种不同配比的复合型涂膜剂对酵母菌，霉菌，大肠杆菌，枯草芽孢杆菌的体外抑菌效果，以期找到保鲜和抗菌效果最好的复合涂膜剂配比。 四、所需仪器设备、材料情况：仪器设备：高压灭菌锅、超净工作台、电子天平、电炉、摇床、温度计、冰箱、烤箱、接种环、涂布棒、载玻片、电子显微镜、恒温培养箱、镊子、牙签、试管、培养皿、量筒、锥形瓶、烧杯、玻璃棒、pH试纸等材料：蔗糖、牛肉膏、蛋白胨和NaCl、NaOH、HCl、乙醇、蒸馏水、腐烂的水果等五、课题分阶段的进度计划序号起止日期工作内容阶段成果12014.11.05-2014.12.28查