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生物化学单元测验I一、是非判断题 （8分）1、果糖是左旋的，因此它属于L构型。（ ）2、己糖有8种异构体。（ ）3、胰蛋白酶专一地切在多肽链中碱基氨基酸的N端位置上 。（ ）4、多肽合成中往往以苄氧羧基（C6H5CH2OCO）保护氨基，并可用三氟乙酸轻易地将它除去；羧基可转变成叔丁酯，并用碱皂化去除 。（ ）5、疏水作用是使蛋白质立体结构稳定地一种非常重要的次要键。（ ）6、逆流分溶和纸层析，这两种分离氨基酸的方法是基于同一原理。（ ）7、蛋白质的SDS聚丙稀酰胺凝胶电泳和圆盘电泳所依据的分离原理是完全不同的。（ ）8、测定酶活力时，一般测定产物生成量比测定底物消耗量更为准确。（ ）二、名词解释（每个3分，共24分）1、 脂质体 2、 肽键（peptide bond） 3、构型和构象 4、结构域5、别构效应 6、双向电泳（two-dimensional electrophoresis）7、酶的比活力8、反竞争性抑制作用 8、酶的活性部位三、填空题（每空0.5分，共10分）1、纤维素是由_组成，它们之间通过_糖苷键相连。2、人血液中含量最丰富的糖是_，肝脏中含量最丰富的糖是 _，肌肉中含量最丰富的糖是_。3、现欲分离某蛋白质溶液中的四个蛋白质成分，它们分子量和等电点列于表内蛋白质 Mr pIA 12000 10B 62000 4C 28000 7D 9000 5如不考虑次要因素，它们在葡聚糖凝胶G-75柱上分离时，流出的先后次序将是： 最先， ， 其次，最后流出的蛋白质是 。如选用羧甲基纤维素柱分离上面四种蛋白质，并用盐浓度梯度洗脱，流出的先后次序将是： 、 、 、 。 4、脲酶只作用于尿素，而不作用于其他任何底物，因此它具有 专一性；甘油激酶可以催化甘油磷酸化，仅生成甘油-1-磷酸一种底物，因此它具有 专一性。5、影响酶促反应速度的因素有 、 、 、 、 和 。四、选择题（10分）1、下列哪种糖无还原性? （1）麦芽糖 （2）蔗糖 （3）阿拉伯糖 （4）木糖 （5）果糖2、-淀粉酶水解支链淀粉的结果是 A.完全水解成葡萄糖和麦芽糖 B.主要产物为糊精 C.使-1,6糖苷键水解 D.在淀粉-1,6-葡萄糖苷酶存在时,完全水解成葡萄糖和麦芽糖 （1）A,B,C （2）A,C （3）B,D （4）D （5）A,B,C,D3、卵磷脂含有的成分为 （1）酸，甘油，磷酸，乙醇胺 （2）脂酸，磷酸，胆碱，甘油 （3）磷酸，脂酸，丝氨酸，甘油 （4）脂酸，磷酸，胆碱 （5）脂酸，磷酸，甘油4、下列有关氨基酸的叙述，哪个是错误的? （1）酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯环 （2）酪氨酸和丝氨酸都含羟基 （3）亮氨酸和缬氨酸都是分支氨基酸 （4）脯氨酸和酪氨酸都是非极性氨基酸 （5）组氨酸、色氨酸和脯氨酸都是杂环氨基酸5、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键? （1）双缩脲反应 （2）克氏定氮 （3）紫外吸收 （4）茚三酮反应（5）奈氏试剂6、关于酶的叙述哪项是正确的？（1）所有的酶都含有辅基或辅酶 （2）只能在体内起催化作用（3）大多数酶的化学本质是蛋白质 （4）能改变化学反应的平衡点加速反应的进行（5）都具有立体异构专一性（特异性）7、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体：（1）His的咪唑基 （2）Lys的氨基 （3）Arg的胍基（4）Cys的巯基 （5）Trp的吲哚基8、决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是：（1）XCCA3末端 （2）TC环 （3）DHU环 （4）额外环（5）反密码子环9、密码子GA，所识别的密码子是：（1）CAU （2）UGC （3）CGU （4）UAC （5）都不对10、真核生物mRNA的帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接，连接方式是：（1）2-5 （2）3-5 （3）3-3 （4）5-5 （5）3-3五、简答题（48分）1、氨基酸的定量分析表明牛血清白蛋白含有0.58的色氨酸（色氨酸的分子量为204）。（8）（a）试计算牛血清白蛋白的最小分子量（假设每个蛋白分子只含有一个色氨酸残基）。（b）凝胶过滤测得的牛血清白蛋白的分子量为70，000，试问血清白蛋白分子含有几个色氨酸残基？2、Anfinsen用核糖核酸酶进行的变性复性实验，在蛋白质结构方面得出的重要结论是什么？（10）3、新掰下的玉米的甜味是由于玉米粒中的糖浓度高。可是掰下的玉米贮存几天后就不那么甜了，因为50糖已经转化为淀粉了。如果将新鲜玉米去掉外皮后浸入沸水几分钟，然后于冷水中冷却，储存在冰箱中可保持其甜味。这是什么道理？（8）4、何谓共价调节酶？举例说明其如何通过自身活性的变化实现对代谢的调节。（10）5、什么是回文顺序和镜像重复结构？二者结构上的特征是什么？ （12）参考答案是非题答案1、错。2、错。3、错。4、对。5、对。6、对。7、对。8、对。名词解释答案1、脂质体（liposome）：是由包围水相空间的磷脂双层形成的囊泡（小泡）。2、肽键（peptide bond）：一个氨基酸的羧基与另一个的氨基的氨基缩合，除去一分子水形成的酰氨键。3、构型（configuration）：一个有机分子中各个原子特有的固定的空间排列。这种排列不经过共价键的断裂和重新形成是不会改变的。构型的改变往往使分子的光学活性发生变化。构象（conformation）：指一个分子中，不改变共价键结构，仅单键周围的原子旋转所产生的原子的空间排布。一种构象改变为另一种构象时，不要求共价键的断裂和重新形成。构象改变不会改变分子的光学活性。4、结构域（domain）：在蛋白质的三级结构内的独立折叠单元。结构域通常都是几个超二级结构单元的组合。5、别构效应（allosteric effect）：又称为变构效应，是寡聚蛋白与配基结合改变蛋白质的构象，导致蛋白质生物活性丧失的现象。6、双向电泳（two-dimensional electrophorese）：等电聚胶电泳和SDS-PAGE的组合，即先进行等电聚胶电泳（按照pI）分离，然后再进行SDS-PAGE（按照分子大小分离）。经染色得到的电泳图是二维分布的蛋白质图。7、比活（specific activity）:每分钟每毫克酶蛋白在25oC下转化的底物的微摩尔数。比活是酶纯度的测量。8、反竞争性抑制作用（uncompetitive inhibition）: 抑制剂只与酶-底物复合物结合而不与游离的酶结合的一种酶促反应抑制作用。这种抑制使Km和max都变小但max/Km不变。9、活性部位（active site）:酶中含有底物结合部位和参与催化底物转化为产物的氨基酸残基部分。活性部位通常位于蛋白质的结构域或亚基之间的裂隙或是蛋白质表面的凹陷部位，通常都是由在三维空间上靠得很进的一些氨基酸残基组成。填空题答案1、D-葡萄糖 -1，42、葡萄糖 糖原 糖原3、（B）（C）（A）（D） （B）（D）（C）（A）4、绝对 立体5、 E；S；pH；T（温度）；I（抑制剂）；A（激活剂）选择题答案1、（2）。2、（3）。3、（2）。4、（4）。5、（1）。6、（3）。7、（1）8、（5）。9、（4）。10、（4）。问答题答案1、答：（a）32,100g/mol （b）22、蛋白质的一级结构决定其高级结构。核糖核酸酶，一条肽链经不规则折叠而形成一个近似于球形的分子。构象的稳定除了氢键等非共价键外，还有4个二硫键。CAnfinsen发现，在8mol脲素和少量流基乙醇存在下，酶分子中的二硫键全部还原，酶的三维结构破坏，活性丧失。当用透析方法慢慢除去变性剂和疏基乙醇后，发现酶的大部分活性恢复；因为二硫键重新形成。这说明完全伸展的多肽链能自动折叠成其活性形式；若将还原后的核糖核酸酶在8mol脲素中重新氧化，产物只有1的活性，因为硫氨基没有正确的配对。变性核糖核酸酶的8个硫氢基相互配对形成二硫键的几率是随机的（1/7X1/5X1/3=1105种可能的配对方式，但只有一种是正确的），实验发现，复性过程中 RNase接与天然RNase相同的连接方式形成二硫键，这是由于蛋白质的高级结构，包括二硫键的形成都是由一级结构决定的。 以上实验说明，蛋白质的变性是可逆的，变性蛋白在一定的条件下之所以能自动折叠成天然的构象，是由于形成复杂的三维结构所需要的全部信息都包含在它的氨基酸排列顺序上，蛋白质分子多肽链的氨基酸排列顺序包含了自动形成正确的空间构象所需要的全部信息，即一级结构决定其高级结构。由于蛋白质特定的高级结构的形成，出现了它特有的生物活性。3、答：采下的玉米在沸水中浸泡数分钟，可以使其中将糖转化成淀粉的酶基本失活，而后将玉米存放在冰箱中，可以使残存的酶处于一种低活性状态，从而保持了玉米的甜度。4、答：共价调节酶，也称为共价修饰酶，是一类在其他酶的作用下，对其结构进行共价修饰，而使其在活性形式与非活性形式之间互相转变的酶。如糖原磷酸化酶。它的活性形式是糖原磷酸化酶a，可催化糖原的磷酸解反应。酶的非活性形式是磷酸化酶b。磷酸化酶b在其激酶的作用下，每个亚基上的第14位丝氨酸残基接受ATP提供的磷酸基被磷酸化。两分子被磷酸化的磷酸化酶b形成四聚体的磷酸化酶a。磷酸化酶a在磷酸化酶磷酸酶的作用下脱去磷酸基又可转变为磷酸化酶b。因此，糖原磷酸化酶的活性形式和非活性形式之间的平衡，使磷酸基共价地结合到酶上或从酶上脱下，从而控制调节着磷酸化酶的活性，进而调节控制着糖原分解的速度。5、所谓回文顺序，就像一个单词，一个词组或一个句子，它们从正方向阅读和反方向阅读，其含义都一样。例如：ROTATOR和NURSESRUN。这个名词被用于描述碱基顺序颠倒重复，因而具有二倍对称的DNA段落。DNA分子上的回文结构就是反向重复顺序；这样的顺序具有链内互补的碱基顺序，故在单链DNA或RNA中能形成发卡结构；在双链DNA内能形成十字架结构。如果颠倒重复存在于同一条链，则这种顺序叫做镜像重复，镜像重复在同一条链内不具有链内互补顺序，因此不能形成发卡结构和十字架结构。 生物化学单元测验II一、是非判断题 （10分）1、糖酵解过程在有氧无氧条件下都能进行。（ ）2、在缺氧条件下，丙酮酸还原为乳酸的意义是使NAD+再生。（ ）3、NADH在340nm处有吸收峰，NAD+ 没有，利用这个性质可将NADH与NAD+区分开来。( )4、琥珀酸脱氢酶的辅基FAD与酶蛋白之间以共价键结合。( )5、生物氧化只有在氧气的存在下才能进行。( )6、NADH和NADPH都可以直接进入呼吸链。( )7、如果线粒体内ADP浓度较低，则加入DNP将减少电子传递的速率。( )8、所有来自磷酸戊糖途径的还原能都是在该循环的前三步反应中产生的。（ ）9、动物体内的乙酰CoA不能作为糖异生的物质。（ ）10、糖异生作用的关键反应是草酰乙酸形成磷酸烯醇式丙酮酸的反应。（ ）二、名词解释（每个3分，共21分）1、新陈代谢 2、底物水平磷酸化 3、回补反应 4、高能化合物5、糖异生作用 6、乙醛酸循环（glyoxylate cycle） 7、生糖氨基酸三、填空题（每空0.5分，共10分）1、糖酵解抑制剂碘乙酸主要作用于_酶。 2、糖酵解在细胞的_中进行，该途径是将_转变为_，同时生成_和_的一系列酶促反应。3、化学渗透学说主要论点认为：呼吸链组分定位于_内膜上。其递氢体有_作用，因而造成内膜两侧的_差，同时被膜上_合成酶所利用、促使ADP + Pi ATP。4、磷酸戊糖途径可分为_阶段，分别称为_和_，其中两种脱氢酶是_和_，它们的辅酶是_。5、植物中淀粉彻底水解为葡萄糖需要多种酶协同作用，它们是_，_，_，_。四、选择题（10分）1、由己糖激酶催化的反应的逆反应所需要的酶是：A果糖二磷酸酶 B葡萄糖-6-磷酸酶C磷酸果糖激酶 D磷酸化酶2、正常情况下，肝获得能量的主要途径：A葡萄糖进行糖酵解氧化 B脂肪酸氧化C葡萄糖的有氧氧化 D磷酸戊糖途径 E以上都是。3、TCA循环中发生底物水平磷酸化的化合物是？A-酮戊二酸 B琥珀酰C琥珀酸CoA D苹果酸4、丙酮酸脱氢酶系催化的反应不涉及下述哪种物质？A乙酰CoA B硫辛酸 CTPP D生物素 ENAD+5、三羧酸循环的限速酶是： A丙酮酸脱氢酶 B顺乌头酸酶 C琥珀酸脱氢酶 D延胡索酸酶 E异柠檬酸脱氢酶6乙酰CoA彻底氧化过程中的PO值是：A2.0 B2.5 C3.0 D3.5 7肌肉组织中肌肉收缩所需要的大部分能量以哪种形式贮存：AADP B磷酸烯醇式丙酮酸 CATP D磷酸肌酸8呼吸链中的电子传递体中，不是蛋白质而是脂质的组分为：ANAD+ BFMN CCoQ DFeS9下述哪种物质专一性地抑制F0因子：A鱼藤酮 B抗霉素A C寡霉素 D缬氨霉素10胞浆中1分子乳酸彻底氧化后，产生ATP的分子数：A9或10 B11或12 C15或16 D17或18五、简答题（49分）1、 辅酶Q的标准还原电势是+0.04V，黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）的标准还原电势为-0.22V。说明FADH2被辅酶Q氧化时理论上释放的能量在标准条件下可以驱动由ADPPi合成ATP。2、 人血浆中的葡萄糖大约维持在5mM。而在肌肉细胞中的游离葡萄糖浓度要低得多。细胞内的葡萄糖浓度为什么如此之低？临床上常用静脉注射葡萄糖来补充病人食物来源，由于葡萄糖转换为葡萄糖-6-磷酸要消耗ATP的，那么临床上却不能直接静脉注射葡萄糖-6-磷酸呢？3、 从葡萄糖-6-磷酸合成糖原所需的能量是否等同于糖原降解为葡萄糖-6-磷酸需要的能量？4、 如果柠檬酸循环与氧化磷酸化整个都被抑制，那么是否能从丙酮酸净合成葡萄糖？5、比较脂肪酸氧化和脂肪酸合成有哪些异同点和相同点？6、为什么说转氨基反应在氨基酸合成和降解过程中都起重要作用？7、别嘌呤醇为什么可用于治疗“痛风症”？参考答案是非题答案1、对。2、对。3、对。4、对。5、错。6、错。7、错。8、对。9、对。10、错名词解释答案1、新陈代谢：新陈代谢是生物与外界环境进行物质与能量交换的全过程，包括生物体内所发生的一切合成和分解作用。包括合成代谢和分解代谢，前者为吸能反应，后者为放能反应。2、底物水平磷酸化（substrate phosphorilation）：ADP或某些其它的核苷5二磷酸的磷酸化是通过来自一个非核苷酸底物的磷酰基的转移实现的。这种磷酸化与电子的转递链无关。3、回补反应(anaplerotic reaction)：酶催化的，补充柠檬酸循环中间代谢物供给的反应，例如由丙酮酸羧化酶生成草酰乙酸的反应。4、高能化合物（high energy compound）：在标准条件下水解时，自由能大幅度减少和化合物。一般是指水解释放的能量能驱动ADP磷酸化合成ATP的化合物。5、糖异生作用（gluconenogenesis）：由简单的非糖前体转变为糖的过程。糖异生不是糖酵解的简单逆转。虽然由丙酮酸开始的糖异生利用了糖酵解中的七步进似平衡反应的逆反应，但还必需利用另外四步酵解中不曾出现的酶促反应，绕过酵解过程中不可逆的三个反应。6、乙醛酸循环：一种被修改的柠檬酸循环，在其异柠檬酸和苹果酸之间反应顺序有改变，以及乙酸是用作能量和中间物的一个来源。某些植物和微生物体内有此循环，他需要二分子乙酰辅酶A的参与；并导致一分子琥珀酸的合成。7、生糖氨基酸（glucongenic amino acid）：降解可生成能作为糖异生前体的分子，例如丙酮酸或柠檬酸循环中间代谢物的氨基酸。填空题答案1、磷酸甘油醛脱氢酶2、细胞质；葡萄糖；丙酮酸；ATP NADH3、线粒体；质子泵；氧化还原电位；ATP 4、两个；氧化阶段；非氧化阶段；6-磷酸葡萄糖脱氢酶；6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶；NADP5、-淀粉酶；淀粉酶；R酶；麦芽糖酶选择题答案1、B。2、B。3、C。4、D。5、E。6、C。7、D。8、C。9、C。10、D。问答题答案1、答：首先计算耦合的氧化-还原反应的标准还原电势，然后计算标准自由能变化。因为将ATP水解为ADP+Pi的标准自由能变化为-30KJmol-1，因此ATP合成的标准自由能变化为+30KJ/mol。所以FADH2被辅酶Q氧化时理论上释放的能量要比由ADP+Pi合成ATP所需的自由能更多。2、答：因为进入肌肉细胞的葡萄糖常常被磷酸化，葡萄糖一旦磷酸化就不能从细胞内逃掉。在pH7时，葡萄糖-6-磷酸的磷酸基团解离，分子带净的负电荷。由于膜通常对带电荷的分子是不通透的，所以葡萄糖-6-磷酸就不能从血流中进入细胞，因此也就不能进入酵解途径生成ATP。3、答：从葡萄糖-6-磷酸合成糖原需要更多的能量，在糖原合成的过程中，有一个高能磷酸酐键被水解，即由UDP-葡萄糖焦磷酸酶作用下形成的PPi很快地水解为2Pi；而糖原降解生成葡萄糖-6-磷酸不需要能量，因为葡萄糖残基是通过磷酸解反应被移去的。4、答：不能；两分子丙酮酸转化为一分子葡萄糖需要供给能量（4ATP2GTP）和还原力（2NADH），可通过檬酸循环和氧化磷酸化获5、不同点： 脂肪酸合成在胞质中，脂肪酸氧化在线粒体中； 脂肪酸合成的酸基载体是 ACP，脂肪酸氧化的酰基载体是辅酶 A； 脂肪酸合成的辅酶是NADP“，脂肪酸氧化的辅酶是NAD”、FAD； 转运系统不同，脂肪酸合成的起始原料乙酸CoA是通过柠檬酸穿梭系统进行转运的，脂肪酸分解起始物脂酸CoA是通过肉毒碱进行转运的； 两条途径完全不同，另外脂肪酸合成消耗能量，脂肪酸分解产生能量。 相同点：都是从羧基端开始， 2个碳原子2个碳原子水解或延长。都需载体的携带，而且都是通过硫酯键与载体结合。6、答：（1）在氨基酸合成过程中，转氨基反应是氨基酸合成的主要方式，许多氨基酸的合成可以通过转氨酶的催化作用，接受来自谷氨酸的氨基而形成。（2）在氨基酸的分解过程中，氨基酸也可以先经转氨基作用把氨基酸上的氨基转移到-酮戊二酸上形成谷氨酸，谷氨酸在谷氨酸脱羟酶的作用上脱去氨基。7、答： “痛风症”基本的生化特征为高尿酸血症。由于尿酸的溶解度很低，尿酸以钠盐或钾盐的形式沉积于软组织、软骨及关节等处，形成尿酸结石及关节炎（尿酸盐结晶沉积于关节腔内引起的关节炎为痛风性关节炎）；尿酸盐也可沉积于肾脏成为肾结石。治疗“痛风症” 的药物别嘌呤醇是次黄嘌呤的类似物，可与次黄嘌呤竞争与黄嘌呤氧化酶的结合；别嘌呤醇氧化的产物是别黄嘌呤，后者的结构又与黄嘌呤相似，可牢固地与黄嘌呤氧化酶的活性中心结合，从而抑制该酶的活性，使次黄嘌呤转变为尿酸的量减少，使尿酸结石不能形成，以达到治疗之目的。 生物化学单元测验III一、是非判断题 （10分）1原核细胞和真核细胞中许多mRNA都是多顺反子转录产物。（ ）2已发现一些RNA前体分子具有催化活性，可以准确地自我剪接，被称为核糖酶（ribozyme），或称核酶。（ ）3原核生物中mRNA一般不需要转录后加工。（ ）4RNA聚合酶对弱终止子的识别需要专一的终止因子(如 蛋白)。（ ）5原核细胞启动子中RNA聚合酶牢固结合并打开DNA双链的部分称为Pribnow box。（ ）6在蛋白质生物合成中所有的氨酰-tRNA都是首先进入核糖体的A部位。（ ）7tRNA的个性即是其特有的三叶草结构。（ ）8从DNA分子的三联体密码可以毫不怀疑的推断出某一多肽的氨基酸序列，但氨基酸序列并不能准确的推导出相应基因的核苷酸序列。（ ）9与核糖体蛋白相比，rRNA仅仅作为核糖体的结构骨架，在蛋白质合成中没有什么直接的作用。10多肽链的折叠发生在蛋白质合成结束以后才开始。（ ）二、名词解释（每个3分，共39分）1、半保留复制2、复制叉3、Klenow片段4、前导链5、启动子6、内含子7、简并密码子（degenerate codon）8、开放读码框（open reading frame）9、信号肽（signal peptide）10、锌指(zine finger)11、亮氨酸拉链(leucine zipper)12、级联系统（Cascade system）13、反馈抑制（Feedback inhibition）三、选择题（10分）1下列关于因子的叙述哪一项是正确的：A是RNA聚合酶的亚基，起辨认转录起始点的作用B是DNA聚合酶的亚基，容许按53和35双向合成C是50S核蛋白体亚基，催化肽链生成D是30S核蛋白体亚基，促进mRNA与之结合E在30S亚基和50S亚基之间起搭桥作用，构成70S核蛋白体2真核生物RNA聚合酶I催化转录的产物是：AmRNA B45S-rRNAC5S-rRNA DtRNA ESnRNA3下列关于原核细胞转录终止的叙述哪一项是正确的：A是随机进行的 B需要全酶的亚基参加C如果基因的末端含GC丰富的回文结构则不需要亚基参加D如果基因的末端含AT丰富的片段则对转录终止最为有效E需要因子以外的ATP酶4下列关于真核细胞mRNA的叙述不正确的是：A它是从细胞核的RNA前体核不均RNA生成的B在其链的3端有7-甲基鸟苷，在其5端连有多聚腺苷酸的PolyA尾巴C它是从前RNA通过剪接酶切除内含子连接外显子而形成的D是单顺反子的5核糖体上A位点的作用是：A接受新的氨基酰-tRNA到位 B含有肽机转移酶活性，催化肽键的形成 C可水解肽酰tRNA、释放多肽链 D是合成多肽链的起始点6蛋白质的终止信号是由： AtRNA识别 B转肽酶识别C延长因子识别 D以上都不能识别7下列属于顺式作用元件的是： A启动子 B结构基因 C RNA聚合酶 D转录因子8下列属于反式作用因子的是： A启动子 B增强子 C终止子 D转录因子9下列有关癌基因的论述，哪一项是正确的：A癌基因只存在病毒中 B细胞癌基因来源于病毒基因 C癌基因是根据其功能命名的 D细胞癌基因是正常基因的一部分10下列何者是抑癌基因 Aras基因 Bsis基因 CP53基因 Dsrc基因四、简答题（41分）1、在复制时DNA解螺旋影响的超螺旋密度。在DNA拓扑异构酶不在的时候，复制叉前面的DNA过分超螺旋，而复制叉后面的DNA螺旋不足。复制叉前面的DNA超螺旋密度如果超过十014复制叉将停止前进。假定一个6000 bp的质粒在体外以双向复制而反应体系中没有拓扑异构酶。质粒原先的 =-0.06，问在复制叉停止前进以前每个复制叉多少碱基对被解螺旋并复制？假定每个复制叉运动速度相同，且体系中存在着除了拓扑异构酶以外的所有DNA延长所需的成分。（6分）2、质粒（plasmids） 为什么可作为载体DNA？（5分）3、何谓cDNA文库？如何建立cDNA文库？（5分）4、叙述DNA聚合酶，RNA聚合酶、逆转录酶、RNA复制酶所催化的反应的三个共同点。指出多核苷酸磷酸化酶与它们的相似点和不同点。5、一个双螺旋DNA片断的模板链含有顺序：（5）GTTAACACCCCTGACTTCGCGCCGTCG （a）写出从这条链转录产生的 mRNA的碱基顺序； （b）从（a）中的 mRNA的 5末端开始翻译产生的肽链的氨基酸顺序是什么； （c）如果这条DNA的互补链被转录和翻译，产生的氨基酸顺序和 （b）中的一样吗？解释你的答案的生物学重要性。（6分）6、甘氨酸的4个密码子是GGUGGCGGA和GGG，请写出它们所有可能的反密码子。 （6分）（a）根据你的答案决定甘氨酸密码子特异性是密码子的哪几个位置？ （b）这些密码子反密码子配对中哪个配对中有摆动碱基？ （c）哪些密码子一反密码子配对所有三个位置都是WatsonCrick配对？7、大肠杆菌细胞被培养在以葡萄糖为惟一碳源的介质中，突然补加色氨酸后细胞被继续培养，把培养时间划分为每30min一段。请定量地介绍当生长条件改变时，在下列条件下，细胞中色氨酸合成酶活性数量的变化。 （7分）（a）Trp mRNA是稳定的（需几小时才能缓慢降解）； （b）Trp mRNA被迅速降解，但色氨酸合成酶是稳定的； （c）Trp mRNA和色氨酸合成酶比通常更迅速地被降解。 8、普通原核阻遏子对特异DNA结合顺序和非特异DNA顺序的亲和力差104106倍，每细 胞有10个阻遏子分子就足以保证高水平阻遏。推测带有同样特异性的阻遏子在人细胞中的情况：多少拷贝的阻遏子分子才能达到原核细胞的阻遏水平（提示，大肠杆菌的基因组含4.7106bp，人的单倍体基因组有2.4109 bp）。（6分）参考答案是非题答案1、错。2、对。3、对。4、对。5、对。6、错。7、错。8、错。9、错。10、错名词解释答案1、半保留复制（semiconservative replication）：DNA复制的一种方式。每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，每个分子都是由一条亲代链和一条新合成的链组成。2、复制叉（replication fork）：Y字型结构，在复制叉处作为模板的双链DNA解旋，同是合成新的DNA链。3、Klenow片段（Klenow fragment）：E.coli DNA聚合酶I经部分水解生成的C末端605个氨基酸残基片段。该片段保留了DNA聚合酶I的5-3聚合酶和3-5外切酶活性，但缺少完整酶的5-3外切酶活性。4、前导链（leading strand）:与复制叉移动的方向一致，通过连续的5-3聚合合成的新的DNA链。5、启动子（promoter）：在DNA分子中，RNA聚合酶能够结合并导致转录起始的序列。6、内含子（intron）：在转录后的加工中，从最初的转录产物除去的内部的核苷酸序列。术语内含子也指编码相应RNA外显子的DNA中的区域。7、简并密码子（degenerate codon）：也称为同义密码子。是指编码相同的氨基酸的几个不同的密码子。8、开放读码框（open reading frame）：DNA或RNA序列中一段不含终止密码的连续的非重叠核苷酸密码。9、信号肽（signal peptide）：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质夸膜转移（定位）的N-末端氨基酸序列（有时不一定在N端）。10、锌指（zine finger）：是调控转录的蛋白质因子中与DNA结合的一种基元，它由大约30个氨基酸残基的肽段与锌螯合形成的指形结构，锌以4个配位键与肽链的Cys或His残基结合，指形突起的肽段含12-13个氨基酸残基，指形突起嵌入DNA的大沟中，由指形突起或其附近的某些氨基酸侧链与DNA的碱基结合而实现蛋白质与DNA的结合。11、亮氨酸拉链（leucine zipper）：这是真核生物转录调控蛋白与蛋白质及与DNA结合的基元之一。两个蛋白质分子近处C 端肽段各自形成两性-螺旋，-螺旋的肽段每隔7个氨基酸残基出现一个亮氨酸残基，两个-螺旋 的疏水面互相靠拢，两排亮氨酸残基疏水侧链排列成拉链状形成疏水键使蛋白质结合成二聚体，-螺旋的上游富含碱性氨基酸（Arg 、Lys）肽段借Arg 、Lys 侧链基团与DNA的碱基互相结合而实现蛋白质与DNA的特异结合。12、级联系统：在连锁代谢反应中一个酶被激活后，连续地发生其它酶被激活，导致原始调节信号的逐级放大，这样的连锁代谢反应系统称为级联系统。13、 反馈抑制：在代谢反应中，反应产物对反应过程中起作用的酶产生的抑制作用。选择题答案1、A。2、B。3、C。4、B。5、A。6、D。7、A。8、D。9、D。10、C。问答题答案1、答：此质粒松弛状态的连系数Lk0= 6000（bp）10.5（bp）=571（保留整数）质粒的超螺旋密度是-0.06故它的拓扑连系数应是： （超螺旋密度）= (LkLk0) / Lk0则Lk=571（006571）=537 在没有DNA拓扑酶活性的情况下，DNA复制解螺旋并没有改变质粒的Lk值，而是靠复制叉前面增加超螺旋密度来补偿。因此，设复制停止前被解开的螺旋数为a，则复制叉前面部分的 Lk应为 537，故：（571a）（1十014）=537，a=100（螺旋）复制停止前被解开的 DNA碱基对数=100105=1050（bp）（即约有 1050个碱基对被解螺旋