胃癌caspase-3表达及其与细胞凋亡的关系研究

精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 1 / 9 胃癌 达及其与细胞凋亡的关系研究 【摘要】目的研究 达在胃癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化 观察 113 例胃癌旁上皮细胞、原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞以及转移灶癌细胞中达， 检测上述组织的细胞凋亡，并分析原发灶癌细胞中 达与胃癌临床病理特征的关系，并探讨 达与细胞凋亡的关系。结果 %的胃癌旁上皮细胞中表达，高于原发灶癌细胞中的阳性率 %;胃癌原发灶浸润淋巴 细胞中的阳性率为 %，高于胃癌旁上皮细胞和原发灶癌细胞中阳性率 ;%的转移灶癌细胞中 达阳性，其阳性率高于对应原发灶癌细胞 ;原发灶癌细胞中 达与胃癌患者的年龄、性别以及胃癌肿瘤大小、浸润深度、转移、 期、生长方式和分化程度无相关性。原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞及转移灶癌细胞中细胞凋亡指数明显低于癌旁上皮细胞。结论胃癌原发灶癌细胞中 达下调和浸润淋巴细胞中 达上调与胃癌发生有关，由导的细胞凋亡与胃癌的发生与发展有关。 【关键词】胃癌 理学凋亡 【 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 2 / 9 、 【 癌仍然是中国乃至全世界多发肿瘤之一。肿瘤的自主增殖和凋亡失控是其最本质的生物学特性，因此研究细胞凋亡在胃癌发生、发展中的重要作用是非常必要的。称半胱氨酸蛋白酶 32。 因是 1994年 利用 术从 T 淋巴细胞文库中筛选出来，当细胞接受刺激时，其经过系列反应被激活，进而参与切割多种死亡底物，导致细胞凋亡。因此，表达具有反映凋亡启动因素存在和凋亡发生的双重生物学效应。本文研究 胃癌旁上皮细胞、原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞以及转移灶癌细胞中的表达，精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 3 / 9 并探讨原发灶癌细胞 达与胃癌临床病理特征的关系。同时分析探讨 表达与细胞凋亡之间的关系。 1 材料与方法 材料江苏省泰兴市第二人民医院和苏 州大学附属第一医院 2003 年 9 月 2008 年 2 月胃癌手术标本 113 例，其早、中、晚期胃癌分别为 26、 34 和 53 例，其中 38 例伴有淋巴结或脏器转移，其代表性转移灶为 43 个。所有病例的原发灶和 43 个转移灶标本均经 10%福尔马林液固定，石蜡包埋，4/ m 厚切片， 色，由两位病理医生确定病理诊断。胃癌的肿块大小、浸润深度、转移、生长方式、 期和组织分型等临床病理特征均被描述。所有患者术前均未接受放、化疗。 方法 抗人多克隆抗体购于 物试剂公司，抗体的稀释倍数为 1： 100， 羊抗兔 S P 试剂盒购于北京中山生物试剂公司。 替一抗为阴性对照。白定位在细胞质上，呈棕黄色颗粒。根据阳性细胞占计数细胞的百分比，将免疫组化结果分级如下：阴性，5%;弱阳性， 6% 25%;阳性， 26% 50%;强阳性， 50%。 组织切片脱蜡后 ,用新鲜配制的付甲醛液室温下固定 30 洗 3 次，将玻片置于渗透液中4孵育 2洗 3 次 ,干燥 ,加 应试剂 50 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 4 / 9 置湿盒内室温反应 60洗 2 次 ,室温干燥 ,加转换剂50 l 置湿盒内 37温箱 60冲洗 3 遍 ,加底物 50 l 室温下孵育 10木素复染，干燥 ,封片 ,光镜观察 ,用 l 替代 阴性对照 ,用已知阳性结肠癌作阳性对照。 统计分析用 验比较各组间率的差异， 析判断各组等级资料的相关性。所有数据均利用统计软件处理。 2 结果 在胃癌旁上皮细胞、原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞以及转移灶癌细胞中的表达 %的胃癌旁上皮细胞中表达，高于原发灶癌细胞的阳性率 %;胃癌原发灶浸润淋巴细胞中的阳性率为 %，高于胃癌旁上皮细胞和原发灶癌细胞。 %的转移灶癌细胞呈现 性表达，与对应原发灶癌细胞中阳性率 %相比升高。 原发灶癌细胞中 达与胃癌临床病理特征的关系原发灶癌细胞中 达与胃癌患者年龄和性别以及胃癌肿块大小、浸润深度、转移、 期、生长方式和分化程度无相关性。 胃癌旁上皮细胞、原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞及转移灶癌细胞中细胞凋亡指数变化 色为核着色 ,凋亡细胞核为深棕黄色。胃癌旁上皮 细胞、原发灶癌细胞和浸润淋精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 5 / 9 巴细胞及转移灶癌细胞中细胞凋亡指数变化见表 3。 凋亡指数在原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞及转移灶癌细胞中细胞凋亡指数明显低于癌旁上皮细胞。 3 讨论 现它在体内各种细胞中广泛分布，主要存在于胞质中，但在淋巴结生发中心 B 细胞、胃小凹上部隐窝细胞和结肠上皮细胞等细胞核内也有阳性表达，提出了 人体绝大部分细胞的生存和死亡有调节作用。本研究显示 胃癌旁上皮细胞中表达率为 %，提示 能在胃黏膜上皮细胞的增殖和凋亡平衡中起到重要调节作用。 李印等研究发现贲门胃癌中 达低于胃良性病变和癌旁上皮细胞，且与 记的增殖指数呈负相关，与 记的凋亡指数呈正相关，说明 达参与胃癌凋亡和增殖的失衡过程。我们的研究结果显示原发灶癌细胞 示 文献报道结果一致。此外，胃癌中 达与胃癌患者的年龄和性别无相关性，提示胃癌中 达无性别年龄差异。胃癌组织中达与其各种生物学行为均无相关性，提示达可能与胃癌的生长、浸润和转移无关，仅是精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 6 / 9 反映胃癌发生的生物学指标。 本研究结果同时显示 胃癌原发灶浸润淋巴细胞中阳性表达率显著高于胃癌旁上皮细胞和原发灶癌细胞，而 胃癌原发灶癌细胞中表达下调，因此大部分病例表现为癌细胞中 乏或低表达，而浸润淋巴细胞强表达。有学者发现肿瘤细胞中 达升高，肿瘤本身多表达可溶性 非膜型 细胞表面大量的膜型 浸润淋巴细胞表面的 合，进而诱导淋巴细胞的凋亡，这些构成了肿瘤免疫逃逸的分子机制。有文献报道，当 动细胞凋亡时， 号系统中起到关键作用的 被活化，而后者发挥凋亡执行作用。本研究结果支持 免疫逃逸机制中效应因子的观点。 细胞凋亡中起关键作用的一类半胱氨酸蛋白酶，它们均在天冬氨酸后的位点切割底物。根据起始激活不同，凋亡活化途 径可分为 3 种：内源性途径，又称为线粒体途径，由线粒体细胞色素 c 的释放来启动，导致 切割活化 ;外源性途径，又称为死亡受体途径，由细胞表面死亡受体如 启动，导致 切割活化 ;第三种途径是近年发现的内质网途径，内质网应激导致 割活化，后者再激活 上3 种途径最后汇聚到同一通路，即活化的 9， 12精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 7 / 9 均切割激活 终导致细胞凋亡。这些调控因子与凋亡的 3 条途径共同组成了一个多信号交联的调控网络。由此可见， 细胞凋亡中发挥非常重要的作用，因此被称为死亡蛋白酶。生理情况下， 无活性的 原形式存在于哺乳动物多种组织和细胞内。当其受到蛋白酶激活后又进一步切割不同的底物，导致蛋白酶级联切割放大，最终使细胞走向凋亡。本研究 色结果显示 ,凋亡指数在原发灶癌细胞和浸润淋巴细胞及转移灶癌细胞中细胞凋亡指数明显低于癌旁上皮细胞。提示 ,进了胃癌细胞的凋亡。 达降低使胃癌细胞凋亡受抑可能参与了胃癌的形成，多数研究结果一致。然而，孙宝华 等发现在肝细胞癌中 表达与肝癌细胞的凋亡无关。提示 调控不同组织起源的肿瘤细胞的凋亡过程中所起的作用可能不同。详细机制尚有待进一步深入研究。 综上所述，胃癌原发灶癌细胞中 达下调和浸润淋巴细胞中 达上调与胃癌发生有关，来自原发灶和转移微环境中的化学物质可能通过增强转移灶癌细胞中 达来提高凋亡水平，进而起到抑制转移灶的作用。 参考文献 张文范，张荫昌，陈峻清 第 2 版 海科精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 8 / 9 学技术出版社 ， 2001： 14 8. 994,269:30761,1997,57:1605李印，郑世营，赵军，葛锦峰 ,等 达及其临床意义 2005， 19：243郑世营，赵军，葛锦峰，王志刚 ,等 调与肿瘤浸润性淋巴细胞凋亡 2003， 10：917郑世营，葛锦峰，赵军，王志刚 ,等 因诱导 表达及胃癌细胞凋亡的研究 2004， 21： 357葛锦峰，王志刚，郑世营 统与肿瘤免疫逃逸 2002， 16： 154oo998,160:56691993,55: