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第十一章 革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌 第一节 肠杆菌科 概念:是一大群生物学性状相近的革兰阴性 杆菌。 分类及临床意义:临床常见有15个菌属,占 临床分离菌总数的50%,和G-总数的80%; 近50%的败血症、70%的泌尿道感染和大量 的肠道感染均由肠杆菌科细菌引起 与医学关系密切的肠道杆菌 条件致病菌 埃希菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 肠杆菌属 沙雷菌属 枸橼酸菌属 致病菌菌 致病性大肠埃希菌 志贺菌属 沙门菌属 耶尔森菌属 肠道杆菌共同特性 形态染色:均为革兰阴性杆菌,无芽孢 ,有菌毛,多数有鞭毛(除外志贺菌属、 克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC无鞭 毛),少数有荚膜 培养特性:需氧、兼性厌氧;营养要求 不高;光滑型菌落; 常用培养基 选择性培养基: SS平板:含乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌 绿、硫代硫酸钠等 Mac平板:含乳糖、中性红指示剂、胆盐等 中国蓝平板:含乳糖、中国蓝和玫瑰红酸指 示剂、 EMB平板:含乳糖、伊红和美蓝指示剂 选择性平板的特点 均含有乳糖和酸碱指示剂: 细菌分解乳糖产酸,使培养基pH降低, 指示剂呈酸性变色,指示剂不同,菌落 呈现不同的颜色。分解乳糖的细菌呈有 色菌落,不分解乳糖的细菌为无色菌落 含有不同的抑制剂: 对革兰阳性菌和非致病菌有不同程度的 抑制作用,因此可以选择性的培养肠道 致病菌。 选择平板细菌生长现象 双糖铁培养基(KIA) 配方:含蛋白胨、牛肉膏、氯 化钠、硫代硫酸钠、硫酸亚铁 、琼脂、酚红、乳糖1 、葡 萄糖0.1 用途:主要用于观察肠杆菌科 细菌是否分解乳糖、葡萄糖产 酸产气、是否产生H2S。 KIA结果观察: 发酵葡萄糖:底层呈酸性反应(黄色), 斜面为碱性反应(红色),若发酵葡萄糖 产酸产气,底层同时有气泡 发酵葡萄糖和乳糖:底层和斜面均呈酸性 反应(黄色) 产生H2S:培养基变黑 1.未接种细菌 3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性 ( AA) 2.分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性(AA) 4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性 (KA) 5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性 (KA) 生化反应: 氧化酶;触酶;硝酸盐还原试验发酵 葡萄糖 非致病菌多数分解乳糖,致病菌多数不分解 乳糖 其他生化反应:KIA、IMViC、MIU 肠杆菌科定科试验主要项目是革兰阴性杆菌、 触酶阳性,氧化酶阴性,硝酸盐还原试验阳性 。 抗原结构 O抗原:化学成分为脂多糖 H抗原:化学成分为蛋白质 表面抗原:化学成分为多糖(埃希菌属称为K抗 原;沙门菌属称为Vi抗原;志贺菌属称为B抗 原) O抗原、H抗原为血清分群分型的依据 表面抗原可阻抑O抗原、H抗原凝集,加热可 解除。 遗传变异:S-R变异、H-O变异 抵抗力 对胆盐,煌绿耐受 临床意义: 致病物质:菌毛、表面抗原、内毒素、肠毒素 传染途径:肠道传染、肠道外传染 所致疾病: 肠道致病菌:以肠内感染为主,腹泻为共显症状 ,引起急慢性肠道感染、食物中毒、旅游者腹 泻及肠热症等。鼠疫耶尔森菌引起鼠疫 条件致病菌:是医院感染的主要病原菌,出现移 位感染 (呼吸道、泌尿道、伤口、中枢神经系 统) 微生物学检验 标本采集 肠道标本:新鲜粪便 肠外标本:根据感染部位不同采集不同 标本 检验程序 粪 便、肛拭 肠道选择培养基 可疑菌落 生化反应血清学实验 结果报告 药敏试验 肠外标本 血平板、弱选择平板 肠道杆菌的生化反应鉴定 定科试验 与其他科细菌鉴别:鉴定试验肠杆菌科非发酵菌弧菌科 氧化酶 葡萄糖氧化/ 发酵(O/F) FOF 鞭毛周鞭毛单、丛、 周 单、丛 l初步分群 苯丙氨酸() 葡萄酸盐() 苯丙氨酸() 葡萄酸盐() 苯丙氨酸() 葡萄酸盐() 埃希菌属变形杆菌属克雷伯菌属 沙门菌属普罗威登斯菌属肠杆菌属 志贺菌属摩根菌属沙雷菌属 枸橼酸菌属哈夫尼亚菌属 爱德华菌属 耶尔森菌属 肠道杆菌属间鉴定 菌属KIAMIU 斜面底层气体 H2S动 力 吲 哚 脲 酶 埃希菌属A/KA/-+/-+- 志贺菌属KA-+/- 沙门菌属KA+D/+- 变形杆菌属KA+/+-/+ 克雷伯菌属AA+-d+ 微量生化反应系统鉴定 将细菌的多项生化反应的2进制数结果数 ,转换成8进制编码而汇集成册,丛编码 的检索表中检索而确定
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