淋巴细胞亚群与临床.ppt

淋巴细胞亚群免疫表型与临床 主要内容 概念 各类淋巴细胞的基础知识 淋巴细胞亚群检测的临床意义 一、概念 淋巴细胞 属白细胞的一种，由淋巴器官产生，是机体免 疫应答功能的重要细胞成分。 淋巴细胞的免疫表型 淋巴细胞的膜表面分子（分化群抗 原 CD）可用于鉴定和区分其亚群和亚类，是研究淋巴细胞 的重要工具。 淋巴细胞亚群 按其发生迁移、表面分子和功能的不同， 可分为T细胞、B细胞和自然杀伤(NK)细胞。淋巴细胞的免 疫表型 淋巴细胞的膜表面分子（分化群抗原 CD）可用 于鉴定和区分其亚群和亚类，是研究淋巴细胞的重要工具。 淋巴亚群在外周血中的比例（%淋巴细胞） T淋巴细胞 50-84% NK细胞 7-40% B淋巴细胞 5-18% 各类淋巴细胞的基础知识 T淋巴细胞 概念 来源于骨髓的淋巴样干细胞，在胸腺中成熟的淋巴 细胞，故称胸腺依赖性淋巴细胞（thymus- dependentlymphocyte），简称T细胞。 功能 负责细 胞免疫功能，参与抗肿瘤、抗细胞内感染微 生物、移植排斥、迟发型超敏反应；对部分体液免疫发挥 辅助功能。 免疫表型：CD3，与TCR形成复合体，是T细胞识别抗原和 转导信号的主要单位。 CD3+/CD4+：辅助性T细胞 CD3+/CD8+：杀伤性T细胞 T淋巴细胞的分化发育 T细胞在胸腺中的发育 T细胞在外周淋巴器官中的分化发育 T细胞在胸腺中的发育 三个阶段 u双阴性阶段 (DN) u双阳性阶段 (DP) u单阳性阶段 (SP) 三个重要事件 uTCR基因重排 u阳性选择 u阴性选择 三个重要结果 u获得功能性TCR u获得MHC限制性 u获得自身耐受 T细胞在外周淋巴器官中的分化发育 初始T细胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依 赖区 T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后，最终分 化为具有不同效应功能的T细胞亚群，效应T 细胞和记忆T细胞。 T淋巴细胞亚群 n 按T细胞所处的活化阶段 初始T细胞（naive T cell） 效应T细胞（effector T cell） 记忆性T细胞（memory T cell ） n 按TCR的表型分类 TCR + T细胞 TCR + T细胞 n 按T细胞的CD4和CD8分子表型 CD4+ T细胞 辅助T细胞 CD8+ T细胞 杀伤T细胞 按T细胞的功能分类 Th（help T cell） Tc/C TL（cytotoxic T cell） Tr（regulatory T cell） 初始T细胞、效应T细胞和记忆T细胞 初始T细胞 表型：CD45RA+、 CD62L+、CD25-（IL-2R） 特点：未接触抗原的成熟T细胞，有分化潜能 效应T细胞 表型： CD4+、CD8+ 迁往炎症部位，执行细胞免疫效应 记忆性T细胞 表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R） 特点：存活期长，再次接受抗原刺激后可迅速活 化 TCRTTCRT细胞和细胞和TCRTTCRT细胞细胞 TCRTTCRT细胞细胞 数量少，占数量少，占5 5 多为多为CD4CD8CD4CD8（DNDN细胞）；少数为细胞）；少数为CD8+CD8+ 分布于皮肤、粘膜参与固有免疫，是抗感染的第分布于皮肤、粘膜参与固有免疫，是抗感染的第 一线细胞一线细胞 TCRTTCRT细胞细胞 数量多，数量多，CD4+CD4+或或CD8+CD8+（SPSP细胞）细胞） TCRTCR识别谱广，是参与免疫应答的主要细胞群识别谱广，是参与免疫应答的主要细胞群 Th、CTL、Ts和Treg细胞 n 辅助性T细胞（Th） 主要表面标记：主要表面标记：CD4CD8- 主要种类：主要种类：TH1，TH2 功能：具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答（促进和 抑制）的作用 n 细胞毒性T细胞（CTL） 主要表面标记：CD4-CD8+CD28+ 功能：特异性直接杀伤靶细胞 杀伤机制： 释放穿孔素，颗粒酶杀伤靶细胞 通过Fasl介导靶细胞的凋亡 n 抑制性T细胞（Ts） 主要表面标志：CD4-CD8+CD28- 功能：对免疫应答有重要的负调节功能，抑制性T细胞功能 的异常，常与T自身免疫性疾病、第I型超敏反应等疾病发生 有关。 n 调节性T细胞（Treg） 主要表面标记：CD4+CD25+ 功能：抑制免疫应答 小结 ThCTLTsTreg 表面标志 CD3+CD4+C D8- CD3+CD4- CD8+CD28+ CD3+CD4- CD8+CD28- CD3+CD4+C D25+ 主要功能 介介导细导细 胞胞 免疫免疫 引起引起迟发迟发 型超敏反型超敏反 应应、 辅辅助体液助体液 免疫免疫 抗寄生虫抗寄生虫 感染感染 特异性直接特异性直接 杀伤杀伤 靶靶细细胞胞 对对免疫免疫应应答答 有重要的有重要的负负 调节调节 功能功能 抑制免疫抑制免疫应应 答答 NK淋巴细胞 NK细胞：一种大颗粒淋巴细胞。英文全称为“natural killer cell”，也称作“自然杀伤细胞”。 它是一种能直接杀伤靶细胞效应的特殊的淋巴细胞系，具 有抗肿瘤抗感染免疫调节的功能，且表现为速发效应。在医 学上被称作是“人体抵抗癌细胞和病毒感染细胞的第一道防 线”。 NK细胞的表型 nNK细胞表面标志物：CD3-/CD16+CD56+ n与T细胞、B细胞相比，NK细胞表面标志的特 异性是相对的。人NK细胞mIg-，部分NK细 胞CD2、CD3和CD8阳性，表达IL-2受体链 （P75，CD122），CD11b/CD18阳性。 细胞因子诱导杀伤细胞（CIK） CIK（cytokine-induced Killer）细胞是由r-IFN、CD3-Ab 、IL-1、IL-2等细胞因子在体外诱导并大量扩增的具有杀伤 肿瘤活性的细胞，是一种新型、高效、广谱的免疫细胞，是 目前最新的肿瘤免疫治疗手段。 CIK细胞：CD3+T细胞为主的异质性细胞群体，同时表达CD3 、CD56，兼CTL强大的抗瘤活性，和NK细胞非MHC限制性杀瘤 特点，目前所知杀伤活性最强的免疫效应细胞。 CIK的表型及起源： 表型： CD3+CD56+和CD3CD56两个亚群，主要效应细胞 CD3+CD56+。 分布：优先分布肝脏，CD3+CD56+占肝脏CD3细胞的1/3，其次外 周血，占-5%。 来源：主要是CD3+CD56的T细胞，多数是CD4-CD8 + 及CD4-CD8- 。 B淋巴细胞 nB淋巴细胞是免疫系统中的抗体产生细胞。 u产生的抗体可与抗原起特异性的结合，如中和细菌的外毒素 使其失去毒性作用； u抗体与抗原结合后形成的复合物易被吞噬细胞清除； u抗体与抗原结合后再结合补体清除病原体。 nB细胞特异性标志物：CD19、CD20等 uB淋巴细胞检测时，多用CD3-CD19+来作为检测标志。 B细胞的亚群 周围淋巴器官中的B细胞具有异质性 可依据CD5是否表达分为B1和B2两亚群 性质B1B2 初次产生时间胎儿期出生后 更新方式自我更新骨髓产生 特异性多反应性单特异性 是否有CD5表达有无 淋 巴 细 胞 亚 群 与 临 床 淋巴细胞亚群的检测内容 目前常做以下项目的检测 n淋巴细胞亚群分析 T细胞亚群分析 uT淋巴细胞（CD3+） u辅助T细胞(CD3+CD4+) u杀伤/抑制T细胞（CD3+CD8+) uCD4+/CD8+的比值 B细胞(CD3+CD19+) NK细胞(CD3-CD16+56+) n活化淋巴细胞的检测 TBNK检测的适用人群 肿瘤病人化疗过程中，抗癌药物对同样处于增殖状 态的、对肿瘤敏感的活化淋巴细胞也有杀伤作用， 甚至免疫功能严重损毁。 活动期的自身免疫病患者，必然表现为淋巴细胞亚 群绝对值和活化淋巴细胞百分比的明显异常。 怀疑有免疫缺陷的病人 器官移植患者术后监测中更具有不可或缺的作用 淋巴细胞亚群的正常参考值（%淋巴细胞群） 项 目百分率（%） 总T淋巴细胞（CD3+CD19-) 50-84 辅助/T淋巴细胞（CD3+CD4+) 27-51 抑制/细胞毒T淋巴细胞（CD3+CD8+) 15-44 辅助/抑制T淋巴细胞比值0.71-2.78 NK细胞（CD3-/CD16+56+) 7-40 总B淋巴细胞（CD3-CD19+) 5-18 T淋巴细胞+NK淋巴细胞+B淋巴细胞 95-105 NK细胞 CIK细胞 B细胞 淋巴细胞亚群的临床意义 n 淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能 的重要指标，它总体反映机体当前的免疫功能、状 态和平衡水平，并可以辅助诊断某些疾病（如自身 免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反 应性疾病等），分析发病机制，观察疗效及检测预 后有重要意义 。 n 当某种细胞亚群所占百分比过高或过低，都提示存 在免疫功能紊乱，但一般情况下对疾病的诊断和鉴 别无特异性。 淋巴细胞亚群测定的结果解释 T细胞异常 CD4细胞异常 CD8细胞异常 CD4/CD8比值异常 B细胞异常 NK细胞异常 总T、总B、NK细胞可以用来判断某些免疫缺 陷和自身免疫性疾病，也可以用于监测移植 后得免疫重建。 T细胞减少 见于先天性免疫缺陷病（例如DiGeorge综合 症，胸腺发不发育） 以及肾脏和心脏移植后接受预防排斥的免疫 调节药物OKT-3的患者 也常见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病（SLE 和RA等）、先天性免疫缺陷病、艾滋病、接 受放疗、化疗或者使用肾上腺皮质激素等免 疫抑制剂资料的患者。 T细胞增多 见于慢性活动性肝炎、重症肌无力等自身免 疫病活动期 CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺 陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂患者。 CD4淋巴细胞增加：可能有过强的细胞免疫反应； 或某些免疫增强药物的有效结果。 CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如SLE 、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染 等。 CD8淋巴细胞减少：见于机体对各种病毒感染的免 疫反应；肿瘤患者具有抗肿瘤免疫反应时 。 CD8细胞与CD4细胞同时减少：见于各种严重的免 疫缺陷以及肿瘤患者晚期或免疫系统严重损伤后。 CD4/CD8比值异常 CD4/CD82.5表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容 易出现自体免疫反应，见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。 CD4CD810称为“免疫抑制”状态，常见于（1）免疫 缺陷病，如艾滋病时的比值常显著小于0.5；（2）恶性肿瘤 ，当发生癌转移时,CD3 、CD4 细胞数明显减少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/ CD8 比值明显降低,提示恶性肿瘤患 者晚期细胞免疫功能更低,预后更差 ；（3）再生障碍性贫血 、白血病；（4）某些病毒感染；CD4/CD8降到1.0以下为“ 倒置”,是较为明显的异常；（5）用于器官移植后监测机体的 免疫状态、用药剂量的调整、抑制排斥反应的发生。若移植 后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排斥反应。比值 持续减低表明移植后感染，若比值0.2时应停用免疫抑制剂 ，以免继发严重感染而导致移植失败。 注意分清主要是CD8细胞增多还是CD4减少 B细胞的异常 B细胞明显增加：见于淋巴组织增生失调（例 如慢性淋巴细胞白血病），也见于病毒感染 早期。 B细胞缺如：见于原发性B细胞缺陷病（如性 联无丙种球蛋白血症）和重症联合免疫缺陷 （T细胞同时缺如）；体液免疫功能不良者则 减少；在生命垂危时可呈现极度减少 NK细胞异常 NK细胞增多：见于病毒感染，肿瘤早期患者 （尚有抗肿瘤免疫反