猪流感病毒研究进展（最新医学综述范文）

精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 1 / 18 猪流感病毒研究进展（最新医学综述范文） 猪流感是由猪流感病毒引起的一种呼 吸道传染病。目前 ,此病在世界各地都有发生 , 危害严重 ,经济损失巨大 ,并对人类的健康构成 威胁。猪流感病毒属于正黏病毒科 A 型流感病 毒属 ,病毒粒子多形态。该病毒对热、消毒剂敏 感 ,而对干燥和低温的抵抗力强大。其分子特性 为多节段的 毒 ,由 8 个片段组成 ,分别 编码 10 种蛋白质。猪流感病毒能够在多种动物 的细胞上增殖 ,但病毒分离和疫苗生产时 ,经常 采用鸡胚接种。病毒具有血凝活性 ,但不同毒株 的抗原性无明显的区分。由于病毒受到抗体的 压力很大 ,因此病毒的变异频繁 ,其机理涉及分 子水平的抗原漂移和抗原转变。文章对病毒的 理化、生物学特性、分子特性、病毒的蛋白和基 因变异等方面的研究情况进行了综述 . 关键词 :猪流感病毒 ;分子特性 ;生物学特性 ;基 因重组 猪流感 (由猪流感病毒 (起的不同日 龄、性别和品种的猪只的一种急性、热性和高度接触性 的呼吸道传染病 ,其临床上以突发高热、咳嗽、呼吸困 难、衰竭和死亡为特征。除单独感染外 ,由于 损 害呼吸道上皮细胞 ,患病猪只容易继发和并发传染性胸 膜肺炎 (猪繁殖与呼吸综合征 (副猪嗜 血杆菌 (巴氏杆菌和弓形虫等 ,使疫病更为复杂 , 死亡率增加 ,给养猪业带来了极大的危害。 1918 年美国 首次报道了 暴发 ,1930 年 猪精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 2 / 18 体中首次分 离到了 型猪流感病毒。目前 ,遍布美、欧、 亚、非等世界各地 1 1 理化特性 于正黏病毒科 A 型流感病毒属。病毒粒子 多形态 ,多数呈球形 ,直径为 80120 些病毒在 初次分离时呈丝状 ,丝状体长短不一 ,长者可达数微米 . 鸡胚和细胞内反复传代繁殖后变为球形。病毒具有囊 膜 ,由双层类脂 膜、糖蛋白突起和基脂蛋白组成。囊膜表 面有许多放射状排列的突起 ,即纤突和刺突 ,其长度为 1214 些排列无特征、形态不一的蛋白突起 ,分 别是柱状的 菇状的 膜上的 脂蛋 白。 为流感病毒亚型和株的主要依据 ,目 前发现 ,猪流感病毒的 15 个亚型 , 9 个亚 型 3。病毒颗粒内为核衣壳 ,呈螺旋状对称 ,直径为 10 端具有环状结构 ,存在于病毒的囊膜内 . 其它有囊膜的病毒相似 ,对乙醚、丙酮等有 机溶剂敏感 ,一般的消毒药物即可使病毒灭活。病毒对 干燥和低温的抵抗力强大 ,冻干或 可保存数年 , 6010 使病毒完全丧失活性 . 2 分子特性 于单股负链 毒 ,基因组大约为 大小不等的 8 个独立片段组成。所有的基因片段 中 ,5的前 13 个 核 苷 酸 都 相 似 , 序 列 为 3 端的 12 个核苷酸也高度保守 ,其序列 为). 精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 3 / 18 8 个基因片段中 ,片段 1 和片断 2 最大 ,为 2 341 个 核苷酸 ,分别编码不同长度的 断 36 分别编码 P 和 段 7 有 3 个读码框 ,编 码基脂蛋白 (逆转录出的 M2 5 端序列相同 ,并且共用翻译起始密 码 ,故 2的前 9个氨基酸是相同的。连续的小 译能力有限 ,目前人们还没有分离 到这一短肽。片断 8 最小 ,仅为 890 个核苷酸 ,该片段有 2个开放阅读框 ,分别编码 3 病毒蛋白 蛋白质是 毒粒子的主要成分 ,具有重要的 功能 ,其主要有以下 10 种蛋白质成分 . 血凝素 (病毒主要的表面糖蛋白 ,属于典型的 I 型糖 蛋白 ,分子量为万 ,大约由 562566 个氨基酸组 成。 有 4 个结构域 :信号肽、胞浆域、跨膜域和胞 外域。 单位组成 , 328 个 氨基酸组成 ,具有与宿主细胞受体结合的特性 ;221 个氨基酸组成 ,是参与和细胞融合的重要亚单位 . 利用 体 ,可以分析和观察 结构及其与受体 的结合。 三聚体的形式镶嵌在双层类脂膜上 ,每 个 体可分成两部分 ,一部分由 成的球形 头部 ,含有受体位点和抗原决定簇 ;另一部分为柄 ,由 插入囊膜。 受体 是位于细胞 膜上的唾液酸糖脂和精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 4 / 18 唾液酸糖蛋白 ,而 部最外面是半乳糖 ,半乳糖和细胞膜上的受体 相结合 ,从而使 染细胞。 染细胞后 , N 端 融 合 序 列(露出来并与细胞质 收稿日期 :2003者简介 :伍 锐 (1977-),男 ,四川人 ,在读硕士 ,主要从事病毒分子生物学研究。 *通讯作者膜发生融合 ,病毒基因组释放到细胞浆内 ,开始病毒复 制 5 合部位呈口袋状 ,其位点相当的 保守 ,如 98位上的 53 位的 83 位的 190 位的 94位的 外 ,这一位点周围的一 些氨基酸也比较保守 ,如99 位的 7 位的 47 位的 。如果受体位点上的某个氨基酸发生变异 , 不仅能引起抗原性变异 ,还能改变受体和病毒的结合能 力 7. 神经氨酸酶 (是构成病毒囊膜纤突之一 ,与 反 ,它 属于 糖蛋白。 括 4 个结构域 :6 个氨基酸的 氨基端胞尾、大约 29 个氨基酸的非极性跨膜区、大约 28 个氨 基酸的茎部以及 390 个氨基酸的头部序列。 氨基酸端 胞 浆 尾 在 检 测 的 不 同 亚 型 中 , 都是一致的 , 即有一个疏水 区 ,其中6 个氨基酸比较保守 ,其余的氨基酸变异较大 . 非极性跨膜区靠近 其功能是将 定在双 层类脂精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 5 / 18 膜上。 亚型的茎部氨基酸的长度和序列都 有差别 ,有些毒株可缺失 20 个氨基酸以上。 头部 相对的保守 ,不同亚型有很高的同原性 ,并且所有的病 毒中 部的 11 个保守氨基 酸在三维结构中构成了 酶活 性中心。 水解 红细胞表面受体特异性糖蛋白末端的 酸 ,使凝集到红细胞的病毒解脱下来 ,或从感染的细胞 中释放出来。另外 ,以阻止病毒粒子的吸附 ,并增 强病毒颗粒的释放 5。最近的研究表明 ,附的牢 固程度 ,以及 性的发挥 ,关系到病毒是否以最佳 的方式进行复制 8。关于 病毒生活周期中其他方 面的作用 ,目前仍不明确 9. 核蛋白 (病毒片段 5 编码 ,大约为 500 个氨基酸。病毒核蛋白 ,具有型特异性 ,主要决定宿主范围。 螺旋形核衣壳的主轴 ,与 段及各种聚合酶相 连 ,在感染的细胞或病毒体中以磷酸化形式存在 5。 少有 3 个互相重叠的抗原区 ,其中一个区在各型流感 病毒间均存在。针对这一区的单克隆抗体可抑制病毒 说明 录过程中 起着开关作用。 核苷酸相对的保守 ,但也可发生 突变 . 基脂蛋白 (M) M 为疏水性蛋白 ,富含精氨酸 ,其编码基因为片段 7,具有 3 个读码框 ,由 250 个氨基酸组成 ,能诱导子代 精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 6 / 18 病毒的组装 ,具有型特异性抗原活性。 染细胞的 阶段不同 ,其作为结构蛋白所表现出的功能也有所差 异。 在成熟病毒中 ,病毒脱壳时 ,释放核糖核蛋白。在感 染细胞中 ,与核糖核蛋白结合 ,使其自细胞内转 移到核外。 97 个氨基酸组成 ,其核苷酸最保守 . 以四聚体形式组成寡聚体 , 大量存在感染细胞的表面 ,但在成熟病毒粒子内和囊膜 表面含量很少。 感染细胞内作为质子通道 ,一方 面控制高尔基体的 ,保证 过时的完整性 ; 另一方面在病毒粒子脱壳时 ,形成酸化环境 ,激活 融合功能。 14 个氨基酸组成 ,对其功能 ,目前 还不清楚 10. 聚合酶蛋白 ( 病毒片段 1、2 和 3 编码 ,分别由 720、 760 和 760 个氨基酸组成。 3 个聚合酶蛋白与核蛋 白和病毒相连接 ,构成病毒特异性的聚合酶复合体 ,具 有转录和核酸内切酶的活性。其中 别并裂解宿 主细胞 帽子结构 ,以此作为病毒转录的引物 ; 有使模板 病毒 断延长的作 用 ;功能未明 ,可能是一解链蛋白 ,或具有蛋白激 酶活性。通过对不同毒株间的 P 蛋白核苷酸和氨基酸 序列分析 ,发现大多数P 蛋白的氨基酸均高度保守 . 非结构蛋白 ( 两个阅 读框 ,分别编码 子量 为万和万。 线性 码产物 ,有 精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 7 / 18 202207 个氨基酸。 剪接的 录而来 , 有 121 个氨基酸。序列表明 , 70 个氨基 酸重叠。 白含有 2 个核定位信号区 ,其中 3438 氨基酸高度保守 ,即 2 个信号 区在 203207 位氨基酸处 . 要存在于感染细胞的核内 ,而 在于 感染细胞内。 子的氨基酸残基和磷酸基团共价 连接 ,磷酸化的白可调节病毒复制过程。 白 结合共存在于病毒体内 ,其具体的作用还不明 确 . 4 生物学特性 血凝特性 血凝特性是 一个重要的生物活性 ,其血凝 谱相当的广泛。在一定的条件下 ,凝集鸡、豚鼠、 大鼠、小鼠、兔、牛、人等红细胞。在实际的病毒分离过程 中发现 ,病毒的血凝活性并不一致。同一亚型不同毒株 , 同一代次病毒的血凝价相差很大。 血凝活性容易 破坏 ,大多数情 况下 ,血凝素均为 热不稳定性 ,6010 可被灭活 11. 抗原性 根据表面和内部抗原 ,流感病毒可分为 A、 B 和 C 三个亚型。 于 A 型流感病毒 属。 A 型和 B 型病毒 的内部抗原为核蛋白 (基脂蛋白 (M),其性质很 稳定 ,可用血清学方法区分。表面抗原为血凝素 (和神经氨酸酶 (容易变异 5。在 A 型流感病毒中 各亚型之间交叉保护力弱 ,B 型流感病毒的 容易变异 ,且无亚型之分。精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 8 / 18 1981 年 ,郭元吉却从猪群 中意外的分离到了无神经氨酸酶的 C 型猪流感病 毒 12。据资料报道 ,国外也从猪群中分离到了 C 型猪流 感病毒。虽然 不同毒株血凝特性具有明显的差 别 ,但抗原性无明显的区分。 抗原性较强 ,自然或 人工感染的动物一般都能 产生较高的中和抗体 . 增殖特性 多种动物细胞 感受性都很高 ,这些细胞包 括狗肾细胞 (犊牛肾细胞、胎猪肺细胞、猪肾 细胞、鸡胚成纤维细胞、人二倍体细胞等。通过研究 ,鸡 26 动物医学进展 2004年 第 25卷 第 1期 (总第 129期 )胚对 此 ,分离病毒时 ,病料 通常接种于 911 日龄的鸡胚。病毒接种细胞 ,也能产 生细胞病变 (表现为圆缩和脱落。然而连续传代 , 病毒对细胞的感染性会降低 ,故流感疫苗的生产 ,通常 都采用鸡胚培养 . 5 病毒的变异 多的血 清型是其遗传变异频繁的有力证据 , 其机理涉及分子水平的抗原漂移和抗原转变。由于表面 蛋白受到抗体的压力很大 ,编码它们的基因很容易发生 变异。由于基因自发的点突变引起小幅度的变异 ,导致 改变积累到一定程度或 好使抗原决定簇 改变 ,引起的抗原变异称为抗原漂移。 因组中 , 变异频率最高。每个核苷酸在复制周期 中 ,变异率可达210 原转变只限于 A 型 流感病毒 ,是指大幅度的变异导致新的亚型出现。 抗原变异的原因有以下两个方精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 9 / 18 面 :一方面是 合酶缺乏校正功能 ,病毒基 因组复制时容易出现差错 ; 另一方面是 基因组是分散的 ,当不同的毒株同 时感染同一细胞时 ,其核苷酸片段就有可能发生同源交 换 ,从而导致抗原的改变 13 由于 到的免疫压力较大 ,8 个基因片段的氨 基酸变化不断积累 ,其抗原变异明显。在孤立的地理环 境中 ,可持续存在并保持相对的遗传稳定性 . 1930 年分离的第一株古典 流感病毒的 原在近几十年里一直保持着相当的保守性 15,其 因漂移发生频率估计在每年 %15,在大 多数情况下 ,变异速度很快。通过 对 A/(株的研究表明 ,针对古典 克隆抗体已不能应用此毒株的检测 ,与 3年前最初的 A/726/88(比较 ,其 发生了 16 个氨基酸的突变。进一步的研究表明 ,包括蛋 白糖基化在内的 3 个抗原位点发生了改变 15 1998 年美国猪群中 ,分离到的 型猪流感 ,与 1995 年 人 其 因至少发生了 12 个氨基酸的变异 17. 通过 态学和分子进化的研究 ,表明了 因重组的现象是非常普遍的。基因重组是指 2 个或 2 个以上的不同毒粒子同时感染一个宿主时 ,在 病毒的繁殖中 ,不同精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 10 / 18 病毒的 8 个基因片段随时的互相交 换 ,从而发生核酸水平的重新组合。 1978 年日本爆发的 流感病毒是由 3因重组而产 生的新亚型 18。而 1994 年英国出现的 能来源 于人 型和猪 型 19。这种重组现象同 样也发生在禽流感病毒和猪流感病毒之间 ,1979 年以 后在欧洲分离的 同于古典 毒 ,是由禽 源 猪 组产生的新 亚型 20. 研究表明 ,猪流感和人流感病毒之间也可以发生交 叉感染和传播。 1978 年 ,从台湾的一个猪群中分离到了 型猪流感病毒 ,通过测序发现 ,此病毒发生了 人流感和猪流感基因片段的重组 20。 1998 年 ,美国加利 福利亚等州暴发了几起猪流感 ,通过种系发生分析 ,此 次的 其来源分别 为人流感病毒 (猪流感病毒 ( M)和禽流感病毒 (21。而1999年美国猪群中 流行的 却是三重 流感病毒的再次重组 21. 一般而言 ,流感病毒具有宿主特异性 ,从一种动物 传到另一种动物是相当困难的。越来越多的资料表明 , 猪作为流感病毒的 “ 混合器 ”, 在流感病毒跨种属障碍而 感染新宿主的过程中 ,起着重要的作用。由于猪上皮细 胞具有唾液酸 2,6,3 人流感病毒可与前者结合 ,而禽流感病毒与后者结合 , 因此 ,猪上皮细胞就能够被精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 11 / 18 人流感病毒和禽流感病毒感 染 ,而成为毒株间基因重组的活载体 22 基因重组 ,导致了新毒株的出现 ,从而对世 界养猪业造成了 严重的损失。由于 直接感染人 , 导致人们患病或死亡 25其公共卫生意义日渐凸现 . 对 研究 ,对减少世界的经济损失 ,提高人类的卫 生健康 ,都将具有深远的影响 . 参考文献 : 1 E,D , L,et of 8M999:2772 G. 996,3 ,et of a za 15:of 996,217:5084 N, M, M,et . 996:1397 5 A, M. he 品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 12 / 18 N, M, M,. 996:1353- 1395. 6 L, J, J,et of A 950 957 977 983:. 48:2757 J, G, W,of (H1 J981,31:4178 T,of to of to of 001,75:37669 , C, W,et a in or 995,69:109910 J, H,et 2 a 994,68: 155111 王连想 ,毕英佐 ,曹永长 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 13 / 18 定及其特性 J2003,33(2):1712 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 M中国 农业出版社 ,1999:24813 R, G. B N, M, M,. 996:139714 , , et of in 992,(4):38015 M, W, S. to 1 . J 992,66:106616 W, W, J,et of a 1J993,54:163017 I, M, A,et 3N2 977000,68:71精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 14 / 18 18 ,et of in 1992,54(2):3527 伍 锐等 : 猪 流 感 病 毒 研 究 进 展 动 物 医 学 进展 ,2004,25(1):28氏杆菌研究进展 骆学农 ,曹晓瑜 综述 才学鹏 审校 (中国农业科学院兰州兽医研究所 ,甘肃兰州 730046) 中图分类号 : 文献标识码 :A 文章编号 :1007004)01 要 :李氏杆菌病是一种重要的人畜共患传 染病 ,主要由单核细胞 增多性李氏杆菌引起 ,呈 世界性分布。文章回顾了李氏杆菌的分离鉴定、 培养、分型等生物学特性以及与其毒力有关的 基因功能方面的研究进展 ,着重就该病诊断和 检测的重要性以及 测方法进 行了概述 ,同时对该病的免疫预防和今后的研 究重点进了探讨 . 关键词 :李氏杆菌 ;生物学特性 ;毒力相关基因 ; 检测 ;疫苗 李氏杆菌病 (一种重要的人畜共患传 染病 ,主要由单核细胞增多性李氏杆菌 (起。自 1926 年首次分离到本病 原后 ,现已呈 世界性分布 ,作为致病菌和腐生植物致病 菌而广泛存在于环境中。目前已证实可感染 40 多种动 物。在牛、绵羊、山羊、猪李氏杆菌最频繁的引起脑膜脑 炎、流产和急性败血病 ,家禽感染精品文档 2016 全新精品资料 全程指导写作 独家原创 15 / 18 可导致败血症和心肌 坏死 ,实验动物如兔子、小鼠等啮齿类也是主要的易感 动物 1。近年来国内有关动物李氏杆菌病例的报道很 多 ,波及全国十多个省市 ,涉及动物有绵羊、山羊、牛、 猪、鸡、兔、鸭、鹅、鹿、鹦鹉、北极狐等 ,平均死亡率达 32%以上 ,对畜牧业造成了较大的危害。动物 L 美国、英国、保加利亚、新西兰等国家几乎每年都有发 生 ,主要集 中在绵羊和牛 ,疾病的发生多与青贮饲料有 密切关系 ,故又将本病称为 “ 青贮病 ”. 作为一种重要的食物源性