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河南农业大学 硕士学位论文 杨树花提取物对肉仔鸡生产性能、肠道菌群及免疫功能的影响 姓名：梅红 申请学位级别：硕士 专业：农业推广养殖 指导教师：王志祥;王彩玲 20090501 河南农业大学硕士学位论文 摘要 杨树花提取物( a s p e nf l o w e re x t r a c t ) 是一种具有多种生物学活性的中草药，大量研究证 实其具有抗菌、抗病毒等药理活性的作用。本试验探讨了杨树花提取物对肉仔鸡生产性能、免疫 功能、肠道养分表观消化率、微生物菌群数量影响，为杨树花在肉鸡生产和疾病防治中进一步应 用提供科学依据。 将1 日龄临床健康、体重相近的科宝5 0 0 肉仔鸡9 0 0 只，随机分为5 组，每组6 个重复，每 个重复3 0 只鸡，试验共进行4 9 天。对照组饲喂基础日粮。试验组( 1 组、2 组、3 组、4 组) 分别 在基础日粮中添加0 5 k g t 、1 o k g t 、i 5 k g t 、2 o k g t 的杨树花提取物。分别在1 日龄、2 1 日龄、4 9 日龄测定对照组和试验组肉仔鸡的体重，并计算平均日增重、采食量及料重比。在肉仔 鸡2 1 、4 9 日龄时，分别采集血样、屠宰，测定生产性能、免疫学指标及微生物菌群数量；在4 6 日龄时，每组选取6 羽，连续收集3 天粪尿，测定养分表观消化率。 结果表明： i 杨树花提取物能够可显著提高肉仔鸡的生产性能。在整个试验阶段( 0 - 4 9 日龄) ，日粮 中添加1 5 k g t 杨树花提取物组日增重分别比对照组、0 5 k g t 组、i k g t 组、2 o k g t 组提高 了7 9 6 ( p o 0 5 ) 、3 9 5 ( p 0 0 5 ) 、5 3 l ( p o 0 5 ) 。 2 杨树花提取物可增强肉仔鸡免疫功能。在2 1 日龄时，1 5k g t 杨树花提取物组的i g a 水 平分别比对照组、0 5k g t 组、1 0k g t 组、2 0k g t 组提高1 6 1 3 ( p o 0 5 ) 。 3 日粮中添加杨树花提取物能提高肉仔鸡肠道养分表观消化率。添加不同水平杨树花提取物 可显著提高肉仔鸡对蛋白质的表观消化率，其中添加1 5 k g t 杨树花提取物组蛋白质的表观消化 率比对照组、0 5 k g t 组、1 o k g t 组、2 o k g t 组分别提高1 2 2 8 ( p o 0 5 ) 。 综上所述，1 0 杨树花提取物在肉仔鸡日粮中最适宜的添加量为1 5 k g t 。 关键词：杨树花提取物；肉仔鸡；生产性能；免疫功能；养分表观消化率；肠道微生物菌群 2 河南农业大学硕士论文 e f f e c t so fa s p e nf 1 0 吧re x t r a c t0 np e r f o i 蝴a n c ea n d i n t e s t i n a lm i c r o f l o r aa n di m m u n ef u n c t i o ni n b r o i l e r s s u p e r v i s o r ：w a n gz h i x i a n g m a s t e rc a n d i d a t e ：m e ih o n g a b s t r a c t ：a s p e nf l o w e re x t r a c t ，ak i n do fc h i n e s em e d i c i n e ，h a v eb e e np r o v e d t h a ti th a sm u l t i p l i c a t ep h a r m a c o l o g ya c t i v e n e s ss u c ha sa n t i m i c r o b i a la n da n t i v i r a l t h ep r e s e n ts t u d ya i m e dt oe x p l o r et h et h ee f f e c t so fa s p e nf l o w e re x t r a c to n p e r f o r m a n c e ，i m m u n ef u n c t i o n ，a p p a r e n ta v a i l a b i l i t yo fn u t r i e n ta n di n t e s t i n a l m i e r o f l o r ao fb r o i l e r sa n dl a yaf o u n d a t i o nf o rt h ea p p l i c a t i o no fa s p e nf l o w e r e x t r a c to nb r o i l e r sa n dd i s e a s ep r e v e n t i o n i no u re x p e r i m e n t ，9 0 01 - d a yo l dh e a l t hk e b a o5 0 0b r o i l e r sw e r er a n d o m l y a s s i g n e dt of i v eg r o u p sw i t hs i xr e p l i c a t e s ，o n eh u n d r e d e i g h t yk e b a o 5 0 0b r o i l e r s p e rg r o u p e x p e r i m e n t a lp e r i o dw a sf o r t y - n i n ed a y s 。t h ec o n t r o lw a sf e dw i t hb a s a l d i e t ，t h ek e b a o5 0 0b r o i l e r si nt h ee x p e r i m e n t a lg r o u p sw e r ef e dw i t hb a s a ld i e t s u p p l e m e n t e d w i t h 0 5 k g t ，1 o k g t ，1 5 k g t a n d 2 o k ：g ta s p e nf l o w e r e x t r a c tr e s p e c t i v e l y t h ew e i g h tw a sm e a s u r e di n1d a y , 21d a ya n d4 9d a ya n dd a i l y w e i g h tg a i n s ，a v e r a g ef e e di n t a k ea n df e e de f f i c i e n c y ( f e e d g a i n s ) w e r ec a l c u l a t e d b l o o ds a m p l e sw e r ec o l l e c t e da tt h ee n do ft h e2 1 d a ya n d4 9 - d a yf e e d i n gt r i a l ，a n d t h ep a r a m e t e r sr e l a t e d g r o w t hp e r f o r m a n c e ，i m m u r m e f u n c t i o na n di n t e s t i n a l m i c r o f l o r aw e r eo b s e r v e d a tt h ee n do ft h e4 6 一d a y , 4 7 一d a ya n d4 8 一d a yf e e d i n gt r i a l ， u r i n ea n df e c e sw e r ec o l l e c t e dt om e a s u r ea p p a r e n ta v a i l a b i l i t yo fn u t r i e n t t h e r e s u l t ss h o w e dt h a t ： 1 t h eg r o w t hp e r f o r m a n c eo fb r o i l e r sc o u l db ei n c r e a s e db ya s p e nf l o w e r e x t r a c ts u p p l e m e n t a t i o n w i t hs u p p l e m e n t a t i o no f1 5 k ：g ta s p e nf l o w e re x t r a c t i n t h e d i e t , d a i l yw e i g h tg a i n s o ft h eb r o i l e r si n c r e a s e d b y7 9 6 ( p 0 0 5 ) 3 9 5 ( p 0 0 5 ) ，5 3 1 ( p 0 0 5 ) 2 t h ei m m u n ef u n c t i o no fk e b a o5 0 0b r o i l e r sw a ss t r e n g t h e n e db ya s p e n f l o w e re x t r a c t a d d i t i o n i n21 d a y , i g al e v e l so ft h eb r o i l e r si n1 5 k g tg r o u p i n c r e a s e db y1 6 1 3 ( p 0 0 5 ) ，试验期7 周。基础日粮组作对照组；处理l 基础日粮+ 0 5 k g 的杨树叶浓缩物；处理2 为基础日粮+ i k g 的杨树花浓缩物；处理3 为基础日粮+ 1 5 k g 的杨 树花浓缩物；处理4 基础日粮+ 2 k g 的杨树花浓缩物( 见表3 ) 。饲养前做好消毒工作，饲养 期内采取人工投料，各组鸡均采用计量不限量自由采食和自由饮水。预混料中不添加任何药 物( 抗球虫药除外) 。并按上述处理加入杨树花浓缩物。 表3 试验分组 3 2 2 饲养管理及免疫 3 2 2 1 饲养管理 试验前将所需用具、设备( 饲喂器具、饮水器具) 洗刷干净，再用浓度为5 的百毒杀( 稀 释1 5 0 0 倍) 进行喷雾消毒。于正式饲养前7 d ，对鸡舍每立方米用高锰酸钾1 8 9 和福尔马林 3 6 m l 进行熏蒸消毒，所用器具一并进行熏蒸。鸡舍密闭2 4 h ，而后通风放出有害气体。试验 育雏阶段在室内笼养，采用4 层立体式育雏笼，舍内温度在3 3 3 4 “ ( 2 之间。1 0 日龄后采用后 垫料地面平养，鸡舍温度逐渐降低，到3 5 日龄后鸡舍温度基本上在2 5 2 7 “ c 之间。光照采 用自然光照和日光灯光照相结合，基本上是采取2 4 小时光照。鸡舍通风状况一般。自由饮 水，饮水后2 小时开始喂料，o 2 1 日龄饲喂肉鸡前期颗粒料，2 2 4 9 日龄饲喂肉鸡后期颗粒 料，在1 3 日龄投入雏鸡开食盘中饲喂，从4 日龄开始直接投入料槽中饲喂，自由采食。每 日分早、晚喂2 次( 其中l 3 日龄时每日喂4 5 次) 。饲养至4 9 日龄时试验结束。 3 2 2 2 免疫 试验期间共免疫3 次，6 日龄时用新城疫+ 传染性支气管炎二联苗，经点眼滴鼻途径进行 免疫；1 2 日龄时用传染性法氏囊活毒苗经滴口途径进行免疫；2 1 日龄时经饮水途径用新城疫 + 传染性支气管炎二联苗加强免疫1 次。雏鸡进入后在饮水中添加适当的葡萄糖和多维，连续 饮用1 周。 3 3 测定指标与方法 3 3 1 生产性能 9 河南农业大学硕士论文 根据每个阶段采食量和空腹体重的记录，统计耗料量，并计算平均日增重、平均日采食 量和平均料重比住1 。 平均日采食量( g d 只) = ( 给料量一余料量) ( 鸡的数量x 饲喂时间) 平均日增重( g d ) = ( 末体重一初体重) 试验时间( d ) 平均料重比= 平均采食量平均体增重 3 3 2 免疫指标的测定 3 3 2 1 血清i g a 、i g g 、i g m 的测定 试验动物分别于2 1 日龄和4 9 日龄采血，采血前要求对试验鸡只停食、停水1 2 h 。每组 每个重复随机抽取1 羽接近平均体重的试验鸡只，心脏采血2 m l ，迅速放置于3 7 “ c 培养箱左 右，静止2 - 3 h ，3 0 0 0 r m i n 离心l o m i n ，取血清编号分装至高压灭菌的离心管中，于一2 0 冰箱保存备用，用于测定血清i g h 、i g g 、i g m 。 血清i g h 、i g g 、i g m 含量用免疫比浊法测定伫7 1 。 3 3 2 2 免疫器官重量及免疫器官指数 分别将2 1 日龄和4 9 日龄采血后的试验鸡只进行颈静脉放血屠宰，迅速解剖取左侧胸腺 ( 剔除周围脂肪) 、脾脏和法氏囊，快速称其鲜重，并按下式计算胸腺、脾脏和法氏囊各免 疫器官指数。 免疫器官指数= 免疫器官鲜重( g ) 鸡活重( k g ) 3 3 3 养分表观消化率的测定 3 3 3 1 禁食 在4 6 日龄时，每组选择6 羽肉鸡，共3 0 羽，采用全收粪尿法，连续收集3 天的粪尿 ( 套袋法) 。将待试验的3 0 羽鸡于试验开始前准确禁食2 4 小时，期间鸡只自由饮水。 3 3 3 2 强饲 禁食结束后，将各试验组的鸡分别准确强饲各自对应的日粮6 0 9 只，并及时按个体记 录强饲结束时间。强饲时，注意动作轻缓、防止鸡受伤，避免较大的应激。 3 3 3 3 排泄物的收集和处理 强饲结束后，准确收集每只试鸡4 8 h 内的排泄物。前2 4 h ，每4 h 收粪尿一次，后2 4 h ， 每6 h 收粪尿一次。收集后将粪样剔除鸡毛、杂物后，按每l o o g 鲜粪加1 0 盐酸l o m l ，避免 粪只氨氮的损失。并将粪尿立即保存于4 “ c 以下的冰箱中，收粪4 8 h 后，将粪样在6 0 6 5 1 2 下烘干至恒重置室温下回潮2 4 h ，称重、记录每个试验鸡每次收集的风干排泄物重，混合 均匀、粉碎，过6 0 目筛装瓶，并测定水分，封存待分析。以c r 2 0 。( 分析纯) 为外源指示剂测 定饲料养分消化率。钙的测定用e d t a 滴定法测定，磷的测定用分光光度法测定汹。 3 3 3 4 养分表观消化率的计算方法 粗蛋白的表观消化率( a 脏) = ( 食入日粮粗蛋白量一食入日粮后排泄物粗蛋白量) ( 食 入日粮粗蛋白量) l o 河南农业大学硕士学位论文 钙的表观消化率= ( 食入日粮总钙量一食入日粮后排泄物钙量) ( 食入日粮总钙量) 磷的表观消化率= ( 食入日粮总磷量一食入日粮后排泄物磷量) ( 食入日粮总磷量) 3 3 4 空肠微生物菌群的测定 3 3 4 1 采样 4 9 日龄早晨8 ：0 0 从各处理中随机选取6 只试验鸡屠宰后立即解剖，取出并结扎空肠，用 酒精棉球消毒各结扎口，然后放入液氮罐中保存，待测。 3 3 4 2 内容物稀释 空肠内容物运回实验室，立即于无菌操作台中取o 5 9 内容物于无菌试管内，加入无菌 稀释液4 5 m l ，用磁力振荡3 - 5 m i n ( 2 5 0 r m i n ) ，进行1 0 - i 稀释，在1 0 0 0 r m i n 下离心， 吸取上清液0 5 m l 加入盛有4 5 m l 无菌释液的第二根试管中进行1 0 2 ，稀释，并依次进行 1 0 - 3 1 0 - 6 倍稀释。各稀释度按重复吸取0 i m l 接种于选择性培养皿上。大肠杆菌、乳酸 杆菌、双歧杆菌分别接种于麦康凯、l b s 、b s 培养基平皿上培养驯。 3 3 4 3 麦康凯培养基 结晶紫0 0 0 1g ：酵母浸膏3 o g ；中性红0 0 2 5g ；蛋白胨1 2 o g ；乳糖1 0 0g ；琼脂 1 2 o g ；n a c l l 5g ；三号胆盐4g ；蒸馏水1 0 0 0 m l ，充分混匀，1 2 1 “ c 灭菌3 0 m i n ，倾注无菌 平皿。 3 3 4 4 乳酸杆菌培养基( l b s ) 蛋白胨l o 0 9 ：磷酸氢二钾2 o g ；牛肉膏1 0 o g ；乙酸钠3 h 2 05 0 9 ；酵母浸膏5 o g ； 枸橼酸三胺2 o g ；葡萄糖2 0 o g ：硫酸镁7 h 2 00 2 9 ；吐温一8 0i 0m l ；硫酸锰4 h 2 00 0 5 9 ； 琼脂2 5 o g ；蒸馏水1 0 0 0 m l 。配好后加热融化，用n a o h 调p h 值至6 0 - 6 5 ，1 2 1 c 灭菌3 0 m i n ， 倾注无菌平皿。 3 3 4 5 双歧杆菌杆菌培养基( b s ) 肝汤1 5 0m l ；蛋白胨1 0 0 9 ；牛肉浸膏3 o g ；酵母浸膏5 0 9 ：胰胨8 0 9 ；可溶性淀粉 o 5 9 ；葡萄糖1 0 o g ；琼脂2 0 o g 吐温- 8 01 0m l ；蒸馏水7 6 5 m i ；1 0 的k i - h p 0 4 溶液1 0m l ； h 溶液5 m l ；a 溶液：f e s 0 4 7 h 2 00 5 9 = n a c l0 5 9 = m g s 0 4 7 h 2 01 0 9 ；m n s 0 40 3 3 7 9 ；蒸 馏水2 5 0 m i 。加热溶解后，用n a o h 调p h 值至7 2 ，1 2 1 “ c 灭菌3 0 r a i n 灭菌3 0 m i n ，冷却至4 5 5 0 时，加入l 一半胱氨酸0 5 9 ，倾注无菌平皿。 3 3 4 6 接种和培养 大肠杆菌：将空肠内容物稀液各1 0u1 接种于麦康凯n 0 3 培养平皿上( 各稀释度设3 个重 复) ，3 7 “ c 有氧培养2 4 h 后进行菌落计数。 乳酸杆菌：将空肠内容物1 0 喝1 0 。6 稀释液1 0u1 接种于乳酸杆菌选择性培养平皿上( 各稀释 度设3 个重复) ，3 7 “ c 厌氧培养4 8 h 后进行菌落计数。 双歧杆菌：将空肠内容物稀液各1 0pl 接种于双歧杆菌选择性培养平皿上( 各稀释度设3 个重复) ，3 7 “ c 厌氧培养4 8 h 后进行菌落计数。 河南农业大学硕士论文 3 4 数据统计 试验结果均以平均数加减标准差( a + s d ) 表示。试验数据采用s p s s l 2 0 软件 o n e - w a y a n o - v a 进行方差分析，差异显著时采用d u n c a n 多重比较检验法对各组进行比较， 以p o 0 5 ( 差异不显著) 、p o 0 5 ) ，大写字母不同表示差异极显著( p o 0 5 ) d i f f e r e n tc a p i t a il e t t e rm e a ns i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( p 0 0 5 ) 各试验组的平均体重基本上都呈线性增长。但在 2 2 日龄，1 5k g t 杨树花提取物组的平均体重最高；lk g t 杨树花提取物组和1 5k g t 杨树花提取物组的平均体重比对照组分别提高7 1 2 ( p 0 0 5 ) 、 4 5 8 ( p 0 0 5 ) ，差异不显著：其它各组之间差异均不显著。 4 1 2 不同水平杨树花提取物对肉仔鸡平均体增重的影响 1 2 河南农业大学硕士学位论文 表3 2 不同水平杨树花提取物对肉仔鸡平均体增重的影响( g ) t a b l e3 - 2t h ee f f e c to f a s p e nf l o w e re x t r a co ng a i no f a v e r a g eb o d yw e i g h to f b r o i l e r s 由表3 2 可知，在试验的前期( 0 - 2 1 日龄) ，1 5k g t 杨树花提取物组的体增重最大， 比对照组、0 5k g t 组分别提高了9 2 2 ( p 0 0 5 ) 、4 1 0 ( p 0 0 5 ) ，差异不显著。试验后期( 2 2 - 4 9 日龄) ，各组体增重的趋势和试验前期体重增长趋势一样，以1 5k g t 杨树花提取物组的 体增重最大，比对照组、l0k g t 组、2 0k g t 组分别提高了7 4 9 ( p 0 0 5 ) ，差异不显著。在试验的整 个阶段( 0 - 4 9 日龄) ，1 5k g t 杨树花提取物组的体增重最大，比对照组、0 5k g t 、1 0 k g t 、2 0k g t 组分别提高了7 9 6 ( p o 0 5 ) ，2 1 6 ( p 0 0 5 ) 、3 4 5 ( p 0 0 5 ) ：在试验的后期( 2 2 4 9 日龄) ，1 0 k g t 杨树花提取物组的平均采食量最小，分别比对照组、0 5k g t 、1 5 k g t 组、2 0 k g t 组降 低4 4 7 ( p 0 0 5 ) 、4 5 6 ( p 0 0 5 ) 、5 8 5 ( p 0 0 5 ) 、8 5 4 ( p 0 0 5 ) 、3 9 5 ( p 0 0 5 ) 、 5 3 1 ( p 0 0 5 ) ，6 3 7 ( p 0 0 5 ) 、4 7 8 ( p 0 0 5 ) 、6 1 7 ( p 0 0 5 ) 、8 5 4 ( p 0 0 5 ) 、3 9 5 ( p o 0 5 ) ， 5 3 1 ( p 0 0 5 ) ： 在试验的后期( 4 - 7 周) ，对照组、0 5 k g t 组、2 0 k g t 组三组之间差异不显著( p o 0 5 ) ； 1 0 k g t 杨树花提取物组、1 5 k g t 杨树花提取物组两组之间差异极显著( p 0 0 5 ) ，分别比对照组、0 5 k g t 、2 o k g t 组减少6 3 9 ( p 0 0 s ) 、6 8 7 ( p o 0 5 ) 、3 1 3 ( p 0 0 5 ) 、 0 7 6 ( p o 0 5 ) 、3 1 3 ( p o 0 5 ) ，差异不显著。 4 9 日龄时，1 5 k g t 杨树花提取物组的i g a 水平分别比对照组、0 5 k g t 组、2 o k g t 组提高1 1 4 3 ( p o 0 5 ) 、1 0 5 5 ( p 0 0 5 ) 、 2 1 6 ( p o 0 5 ) 、1 6 1 7 ( p o 0 5 ) 。 4 9 日龄时，1 o k g t 杨树花浓缩物组和1 5 k g t 杨树花提取物组较高，分别比对照组、0 5 k g t 组、2 0 k g t 组提高1 2 8 6 ( p o 0 5 ) ；在钙的吸收率方面，添加1 5 杨树花浓缩物组对钙的消化吸收率比对照组提高 了8 4 6 ( p o 0 5 ) ，但各组差异不显著( p o 0 5 ) ；对磷的消化利用率，各组基本上都维持在 相近的水平，差异不显著( p o 0 5 ) 。 4 4 不同水平杨树花提取物对肉仔鸡肠道微生物菌群的影响 表3 1 0 杨树花对肉仔鸡肠道微生物菌群的影响( ) t a b l e3 - 1 0e f f e c t so fa s p e nf l o w e re x t r a co ni n t e s t i n a lm i c r o f l o r ao f b r o i l e r s 可由表3 - 1 0 得出，日粮中添加杨树花提取物能改善肉仔鸡肠道微生物菌群的数量，对肠 道大肠杆菌、乳酸杆菌数量影响显著。添j j l l 5 k g t 杨树花提取物组肠道大肠杆菌的数量分 别比对照组、0 5 k g t 组、1 0 k g t 组、2 o k g t 组减少了5 3 1 ( p o 0 5 ) 。 5 讨论 5 1 杨树花提取物对肉仔鸡生产性能的影响 杨树花风干品中粗蛋白质含量高达3 0 5 6 ，但在家禽生产中的研究报道较少。黄增利等 1 7 河南农业大学硕士论文 啪1 通过在3 8 周龄罗曼蛋鸡日粮中添加1 干制粉碎杨树花的试验发现，试验组产蛋率比对照组 提高9 2 ，经比较分析差异显著( p 0 0 5 ) ；i g m 、i 蜘浓度虽有提高的趋势，1 5 k g t 组的浓度高于1 o k g t ( ( p o 0 5 ) ) ，但与其它组间差异显著( p 0 0 5 ) ，这可能与磷的代谢 受肠道内p h 值影响小的原因有关，但究竟是杨树花提取物中的哪种成分改善了肉仔鸡的营养 利用率及其机理如何，在这方面相关的深入报道还没有，还需迸一步研究与探讨。 5 4杨树花提取物对肉仔鸡肠道微生物菌群的影响 5 4 i 大肠杆菌( ec o ii ) 革兰氏阴性菌，大多数是消化道中的正常菌，一般不致病，但当宿主肌体发生变化或进 入消化道意外的不位时，则成为致病菌。大肠杆菌为需氧或兼性厌氧菌，生长温度1 8 4 2 ， 最适温度3 7 ，最适p h 值为7 4 - 7 6 在肠道菌选择培养基上，能发酵乳酸产酸，使指示剂 河南农业大学硕士学位论文 变色形成有色菌落。在e m b 培养基上生长良好，菌落呈红色，表面光滑，低凸，边缘整齐， 有光泽，镜检为两端钝园的短杆菌。 5 4 2 乳酸杆菌( l a c t o b o c i l ，u s ) 革兰氏阳性菌，消化道中的正常菌，对致病菌有抑制作用( 魏曦，1 9 8 5 ) 。细胞成典 型的杆状，形态变化从细长、有时弯曲的杆状到短的、通常为棍棒状的球杆状，普遍成链。 无芽孢，无鞭毛。专性厌氧或兼性厌氧，对氧有一定的耐受性，但在厌氧环境中能更好生长。 最适温度3 0 4 0 。嗜酸，其重要的特性是具有高度的耐酸性，最适p h 值为5 5 - 6 2 ，在 p h 值为3 5 仍能生长。f u l l e r 和t u r v e r ( 1 9 7 1 ) 证实，乳酸杆菌是家禽嗉囊中的正常菌群， 是保持肠道微生物群落平衡的重要保障，乳酸杆菌吸附在肠壁上，与有害微生物竞争空间和 营养，可抑制肠道内大肠杆菌的生长、可产生类抗生素物质、乳酸，降低肠道p h 值( 魏曦， 1 9 8 5 ) 。乳酸杆菌在l b s 培养基上生长良好，为小的乳白色稍突起的菌落，中央呈乳突状隆 起，边缘不整齐，镜检成短杆状，菌落连接成链状存在。 5 4 3 双歧杆菌( b i f i d o b a c t e r i u m ) 双歧杆菌是动物肠道中的重要菌群，在正常情况下，动物从出生到死亡，一直与次菌 保持正常的共生关系。能抗拈多种肠道病源微生物( 魏曦，1 9 8 5 ) 。双歧杆菌为革兰氏阳性 菌，菌体形态因培养基的不同而发生变化，呈高度多样性，有y 字形、v 字形、弯曲状、铲 状或棍棒状等( 萨仁娜，1 9 9 8 ) 。无鞭毛、无芽孢，无荚膜，是专性厌氧菌，最适温度3 7 - 4 1 ， 最适p i l 值为6 5 - 7 0 ，在p h 值为4 5 - 5 0 或p h 值为8 0 - 8 5 不生长。双歧杆菌在b s 培养 基上生长良好，菌落光滑、凸起，呈黄褐色，菌落不易分散，有隆起，镜检为短杆状，呈y 型、v 型、弯曲型等多种形态。 肠道微生态系统是机体最庞大、最重要的微生态系统。健康畜禽的肠道栖息着1 0 h 个细菌， 是机体细胞总数的1 0 “2 0 倍，有多达5 0 0 余种细菌。大量肠道细菌主要位居于结肠和远端小肠， 嗉囊、胃、十二指肠、空肠及回肠上端细菌较少。肠道微生物可分为3 大部分：1 与宿主共 生的生理性细菌，为专性厌氧菌，是肠道的优势菌群，占9 9 0 9 9 9 ，如双歧杆菌、乳酸 杆菌和消化链球菌等是肠道菌群的主要构成者；2 与宿主共栖的条件致病菌，以兼性厌氧菌 为主，为肠道非优势菌群，如肠球菌、肠杆菌，在肠道微生态平衡时是无害的，在特定条件 下具有侵袭性，对肌体有害；3 病原菌，大多为过路菌，长期定植的机会少，微生态平衡时 这些菌数量少，不会致病，如数量超出正常水平，则可引起人体发病，如变形杆菌等。每个 菌种的生态学地位由宿主的生理状态、细菌间的相互作用和环境的影响所确定嘲”。肠道众 多的益生菌和共生菌在肠道黏膜形成有十分重要作用的菌膜。正常情况下，肠道黏膜菌群的 表层主要是大肠埃希菌和肠球菌，它们附着在肠黏膜表面称腔菌群，可游动，属于兼性厌氧 或需氧菌：中层是类杆菌为主的厌氧菌：深层即紧贴黏膜上皮者为双歧杆菌和乳酸杆菌。以 双歧杆菌、乳酸杆菌为主的专性厌氧菌与肠黏膜上度表面特异性受体相结合，形成组分相当 固定的菌膜结构和生物屏障，可有效抵御过路菌对机体的侵袭。双歧杆菌等益生菌对肌体的 2 l 河南农业大学硕士论文 生长发育、营养物质代谢、免疫激活、预防疾病、维护肠壁吸收分泌功能、合成机体必需的 一些维生素和微量元素、抵御致病菌侵入、分解代谢肠道中的有害物质、参与胆红素的肠肝 循环、维护肝脏功能及保护机体健康等方面起到不可替代作用。就目前所知，双歧杆菌、 乳酸杆菌、类杆菌等肠道厌氧菌在维持宿主健康及肠道的消化吸收功能和阻止外来茵的繁 殖、刺激免疫等方面表现出重要的作用。当如致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌 等对动物的生长有很大的损害睇1 当消化道内有益菌群占优势时，动物就会向健康的方向发 展；而有害菌群占优势时，最终会导致宿主的病变反应“ 此外，李平兰等m 1 报道，中草药 能调节肉鸡肠道微生物平衡，显著增加有益菌乳酸杆菌的数量利降低有害菌大肠杆菌的数 量。 一般情况下，大肠杆菌一般在畜禽消化道的后断较多。在正常情况下对宿主无害，但愈 来愈多的研究表明，大肠杆菌某些菌株可导致幼小畜禽下痢并发生肠炎，何清明等( 1 9 8 6 ) 研究憎1 了健康鸡与病鸡肠道内菌群的变化，发现鸡下痢时大肠杆菌数量增加，而乳酸杆菌等 其它菌无明显变化。有试验表明1 ，杨树花中的黄酮醇衍生物和黄酮衍生物可有效抑制畜禽 体内的致病菌如大肠杆菌、沙门氏菌等。从本试验看日粮添加不同水平的杨树花提取物， 可显著抑制肉仔鸡回肠中大肠杆菌的繁殖( p o 0 5 ) ，而且随着杨树花添加剂量的增加，抑制 作用加强。以1 5 k g t 的杨树花提取物添加水平最好，效果最显著( p 0 0 5 ) 。乳酸杆菌在畜 禽肠道正常菌群的种类中，具有较强的耐酸性，同时本身具有产酸能力，可使肠道p h 值降 低，对致病菌有较强的抗拮作用，是动物机体抵抗疾病的一道天然屏障( f u l l e r ，1 9 7 7 ) 。 从本试验看，1 o k g t 的杨树花提取物添加水平组、1 5 k g t 的杨树花提取物添加水平都有 较好的对乳酸杆菌繁殖促进的作用。且1 5 k g t 的杨树花提取物添加水平对乳酸杆菌繁殖的 促进效果最显著( p o 0 5 ) 。双歧杆菌是畜禽机体内的正常菌群，是有益菌。从本试验看，不 同杨树花提取物添加水平组对双歧杆菌的繁殖有促进作用，但各组间差异不显著( p o 0 5 ) 。 6 结论 6 1 日粮中添加提高杨树花提取物能提高日增重，降低平均料重比，显著提高了肉仔鸡的生 产性能。 6 2 日粮中添加1 5 k g t 杨树花提取物，可显著提高肉仔鸡血清i g a 、i g g 水平、胸腺指数， 增强了机体的免疫功能。 6 3 日粮中添加杨树花提取物，肉仔鸡肠道对养分的消化率有所提高，其中1 5 k g t 杨树花 提取物组可显著提高对蛋白质的表观消化率。 6 4 日粮中添加1 5 k g t 杨树花提取物，可降低肉仔鸡大肠杆菌的数量、提高乳酸杆菌的数 量，从而显著改善了肉仔鸡肠道微生物菌群的数量。 综上所述，1 0 杨树花提取物在肉仔鸡日粮中最适宜的添加量为1 5 k g t 。 塑堕奎些奎堂堡主兰竺笙茎 参考文献： 【l 】李鹏，齐广海饲料添加剂中常用抗生素替代品f j j 饲料博览，2 0 0 6 ( 8 ) ：2 4 【2 】闫俊书，单安山中草药饲料添加剂对畜禽肉品质的影响饲料博览，2 0 0 6 ( 9 ) ：4 0 【3 ：i l 京市门头沟区畜牧兽医站及良种场，华北农大兽医系教学基点；用杨树花试治仔猪白痢 病的临床观察，1 9 7 6 、8 月 【4 】北京第二传染病医院：杨树花治疗急性细菌性痢疾2 0 例小结，内部资料，1 9 7 5 【5 】宋唐慎微：经史证类急本草，l1 0 8 年。 【6 】明李时珍：本草纲目，1 5 7 8 年 【7 】北京医学院药学系：杨树抑菌有效部分的研究，1 9 7 5 年 【8 】杨秀珍。“杨树花”治疗急性菌痢7 8 例( 1 9 7 8 年农业学术论文会论文之一) 【9 1 北京市宣武区陶然亭医院：杨树花治疗肠炎痢疾临床效果观察，医药结合资料、8 ：2 4 3 0 ，1 9 7 6 、1 【1 0 = i l 京市门头沟区畜牧兽医站，华北农大兽医系数学基点：中草药“杨树花”对羔羊痢疾病 原抗菌作用的初步观察，1 9 7 7 、3 【l l 】杨树花治仔猪白痢【j 】甘肃畜牧兽医，1 9 9 1 ， ( 5 ) ：1 2 1 2 】北京市杨树花协作组：杨树花制剂一痢消灵片的研究1 9 7 5 、1 2 【1 3 何方奕，张婕莉，李铁纯，侯冬岩。杨树花挥发性成分的g c m s 的分析辽宁大学报自 然科学版，2 0 0 0 ，2 7 ( 3 ) ， 【1 4 】梁延寿，等中药通报【j 】，1 9 8 8 ，1 3 ( 1 ) ：4 1 【1 5 】李建中，等中国中药杂志【j 】，1 9 8 9 ，1 4 ( 1 ) ：4 3 【1 6 】林秀英，等中草药t j 】，1 9 9 4 ，2 5 ( 1 2 ) ：6 2 5 【1 7 】潘继兰杨树花防治羔羊痢疾【j 】，当代畜禽养殖业，2 0 0 5 ( 4 ) ：2 2 【1 8 】潘立辉，孟光章杨树花、叶，皮治疗羊腹泻效果好【j 】当代农业，2 0 0 2 ( 4 ) ：2 9 【1 9 ：f 宪超中草药治羊腹泻【j 】农业科技与信息，2 0 0 3 ( 7 ) ：3 2 【2 0 梁峰中草药治羊腹泻【j 】河北畜牧兽医，2 0 0 4 ，2 0 ( 1 ) ：3 9 【2 l 】黄旭明。仔猪自痢的中草药单方辩证治疗【j 】福建畜牧兽医，2 0 0 5 ，2 7 ( 1 ) ：2 9 - 3 0 【2 2 】李福杨树花制剂治疗仔猪白痢【j 】中国兽医杂志，1 9 9 4 ，2 0 ( 1 ) 3 7 【2 3 】黄增利，郭德智杨树花在畜禽中的应用【j 】农村百事通。1 9 9 9 ，( 7 ) 2 9 【2 4 吴永胜，董国忠，王立常，等饲粮中添加铬烟酸复合物对肉鸭生产性能、胴体成分及 血液生化指标的影响动物营养学报，2 0 0 0 ，1 2 ( 2 ) ：2 0 “ - 2 5 2 5 ：t 0 燕强，韩正康粗酶制剂添加于大麦日粮中对鸡生长和血液生化值的影响动物营养 学报，1 9 9 9 ，1 1 ( 2 ) ：3 0 3 7 【2 6 杨立彬，李德发，滤仕谯，等日粮不同能量和蛋白质水平对肉仔鸡生产性能和胴体品质 的影响饲料博览，2 0 0 0 ( 5 ) ：4 - 6 河南农业大学硕士论文 【2 7 朱立平，陈学清免疫学常用实验方法北京：人民军医出版社，2 0 0 0 8 8 9 9 【2 8 】杨风主编。饲料分析及饲料质量检测技术【m 】。北京农业大学出版社，1 9 9 3 【2 9 张国营，李彦勇，朱国生，马玉胜，等绿茶和茶多酚抗人轮状病毒试验。茶叶科学， 1 9 9 4 ，( 2 ) ：1 5 5 1 5 6 【3 0 】黄增利，李永娥中草药杨树花饲喂蛋鸡的效果山东家禽，1 9 9 6 ( 4 ) ：2 3 【3 1 李福，张俊发。杨树花制剂对治疗仔猪自痢病的疗效观察j j 河北畜牧兽医，1 9 9 3 ， 9 ( 3 ) ：1 3 0 【3 2 】马玉胜，景锡银，朱国生。杨树花代替部分豆饼饲喂蛋鸡对比试验f j j 饲料博览，1 9 9 4 ， ( 5 ) ：2 4 - 2 5 【3 3 李巧云，杨树花在畜牧生产中的应用。经济日报，实用技术农村版，2 0 0 6 ，第a 0 8 版 【3 4 董明发，王天奇，夏海林。杨树花及其复方制剂对兔大肠杆菌的体外抑菌试验f j j 中兽 医医药杂志，2 0 0 7 ，4 【3 5 】宋智娟，张艳铭，季妍等。b - 甘露聚糖酶对肉鸡免疫机能的影响 j 】饲料工业，2 0 0 8 ， 2 9 ( 1 4 ) 3 9 - 4 0 【3 6 李矗，王宝东，王艳波，付晶，单安山等。沙棘黄酮对a a 肉鸡生产性能和免疫功能 的影响 j 】家禽营养与饲料科技进展( 第二届全国家禽营养与饲料科技研讨会论文集) 2 1 8 2 1 9 【3 7 】卢玉发、廖清华。褪黑素对肉仔鸡生产性能及免疫功能的影响【j 】饲料工业， 2 0 0 8 ；2 9 ( 1 3 ) ：3 7 - 3 9 【3 8 1 3 三重庆，关迎辉，李启靖导入蓖麻毒蛋白的供体淋巴细胞在小鼠皮肤移植中产生的特 异免疫耐受北京大学学报( 自然科学版) ，1 9 9 7 ，2 ( 3 3 ) ：2 3 7 【3 9 】内蒙古农牧学院，安徽农学院家畜解剖学及组织胚胎学北京：农业出版社，1 9 9 7 1 0 【4 0 】罗安智，齐长明，枉云峰。“免疫增益汤”对高母源抗体雏鸡接种n d 疫苗的影响及机 理研究【j 】中国兽医药杂志，2 0 0 4 ；( 2 ) ：3 - 5 【4 l 】钱存柔，黄仪秀。微生物学实验教程【m 】北京：北京大学出版社，2 0 0 1 ：6 6 - 6 7 f 4 2 】徐宜为最新禽病与防制北京：中国农业科技出版社，1 9 9 3 。1 8 4 8 【4 3 】陈嫒，周玫启由基医学【m 】j 匕京：人们军医出版社，1 9 9 1 ；5 5 - 5 7 【4 4 】朴香淑，史彬林，李德发保尔福对肉仔鸡生长、微生物菌群及免疫功能的影响中国饲 料，2 0 0 4 ( 11 ) ：2 4 2 6 【4 5 】牛竹叶，刘福柱，王勇生，等锗对肉鸡免疫器官生长发育的影响西北农林科技大学 学报，2 0 0 l ，2 9 ( 5 ) ：