麦芽糖化力的测定.docx

麦芽糖化力的测定（一）：实验室测定麦芽糖化力（酵素力）是检测麦芽质量的一个重要参量，他是麦芽-淀粉酶和-淀粉酶二者活力之和，是反应麦芽总的分解淀粉能力，决定酶化过程中使用输料比例的依据。一、 实验原理：淀粉经糖化酶水解生成葡萄糖，葡萄糖具有还原性，其羧基易被若氧化剂次碘酸钠所氧化 I22NaOH=NaIO+NaI+H2O NaIO+C6H12O6=NaI+CH2OH(CHOH)4COOH+NaI体系中加入过量的碘氧化反应完成后用硫代替硫酸钠滴定过量的碘，即可算出糖化力 I2+2Na2S2O3=Na2S4O6+2NaI二、仪器与试剂仪器：吸管（25ml.5ml.2ml.10ml），容量瓶200ml2个，250ml碘量瓶试剂：2%可溶性淀粉溶液，乙酸一乙酸缓冲溶液，麦芽浸出液，1mol/L的氢氧化钠溶液，0.1mol/L碘溶液，1mol/L的硫酸溶液，0.1mol/L硫代硫酸钠溶液。三、实验步骤实验分为三步骤，即麦芽糖化的制备，空白实验的制备以及碘量法定糖；1、 麦芽糖化液的制备 量取2%可溶性淀粉溶液100ml，置于200ml的容量瓶中。加10ml乙酸一乙酸缓冲溶液，摇匀，在20水浴中保温20分钟。准确加入5.00ml麦芽浸出液，摇匀，在20水浴中准确保温30分钟，立即加入1mol/L的氢氧化钠溶液4ml，震荡，以终止酶的活动，用水定容至刻度。2、 空白实验的制备 量取2%可溶性淀粉溶液100ml，置于200ml的容量瓶中。在20水浴中保温20分钟后，加入1mol/L的氢氧化钠溶液2.35ml，摇匀，准确加入5.00ml麦芽浸出液，用水定容至刻度。3、 碘量法定糖吸取麦芽糖化液和空白实验液各50.00ml，分别置入250ml碘量瓶中，各加入0.1mol/L碘溶液25.00ml，1mol/L的氢氧化钠溶液3m摇匀，盖好，静置15分钟。加1mol/L的硫酸溶液4.5m，立即用0.1mol/L硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色失为终点。四、数据记录实验记录表项目糖化液空白液次数123123取样毫升数 /ml滴定消耗亚硫酸钠毫升数/ml平均值/mlV=V=五、结果计算：麦芽糖化力是以100g无水麦芽在20，ph4.3条件下分解可溶性淀粉30min产生1g麦芽糖为一个唯科（WK）糖化力单位麦芽糖化力（WK）=（V0-V）C34.2（1-M）100式中V0-空白液消耗亚硫酸钠标准溶液的毫升数 V-麦芽糖化液消耗亚硫酸钠标准溶液的毫升数 C-亚硫酸钠标准溶液的摩尔浓度数 M-麦芽水分百分含量 34.2-换算系数（二）生产中测定用SKALAR间隔流动分析仪测定麦芽糖化力用SKALAR间隔流动分析仪 (SFA)测定麦芽糖化力 (DP)的方法。该方法操作简便 ,数据重复性好 ,结果准确 ,适于大批量的样品分析。一、原理：采用间隔流动技术 ,试样进入反应器后 ,被空气泡隔开 ,在反应器中进行如混匀、加热、渗析等化学处理 ,最后用分光光度计检测。1材料与方法1 1分析的原理麦芽浸出液进入反应器后 ,与淀粉溶液反应 ,水解淀粉生成的还原糖在碱性条件下与铁氰化钾发生氧化还原反应 ,3+变成2 +,颜色变浅 ,在 4 2 0下测光密度 ,根据光密度的变化即可计算出值。测定的主要反应如下 : + 2() 3 6 + 2- + 2() 4 - 6 +2 1 2二、主要药品1 2 13 5(3 0 %)淀粉 (直链 )铁氰化钾醋酸 (1 0 0 %)醋酸钠碳酸钠氯三、主要仪器SKALAR间隔流动分析仪 分析天平四、试验方法1、麦芽浸出液的制备：称取10克经粉碎的无水麦芽于500ml容量瓶中，加入200ml5%的NaCL 20保温2小时，每隔20分钟搅拌一次，及时过滤使用。2、SFA分析法 麦芽浸出液 混合NaCl溶液 35水浴反应淀粉溶液 95氧化还原 比色（420nm）碱性铁氰化钾溶液计算公式：可知，仪器分析与常规分析的MaxXi-X3，因此，各自的X都可以做为测量值，仪器分析的/X0.01，而常规分析的/X0.05，这说明仪器分析比常规分析的稳定性要好的多。 为了检测仪器分析的准确性，若以常规分析结果作为真实值，仪器分析结果的相对标准差为（307.85-293.8）/293.8=4.779%。由于测定麦芽糖化力的允许相对标准差为9%因此可以把仪器分析结果作为测量结果。五、结论1.SFA稳定性好，其/X1%，可大大减少人为原因造成的误差。2.SFA操作简单，使用方便，节省了人力与物力。非常适合于工厂大批量的样品分析。3.应用SFA做分析，要注意精确配置标准液。所有试剂不允许有悬浮物或沉淀物存在，否则，重配置或过滤后再使用。4.应用SFA的过程中，维护与保养时关键，每次使用前后，必须做好清洗工作。5.由于麦芽中各淀粉酶的比例不同，测量不同麦芽品种的糖化力时，其作为标准液的淀粉酶活力单位有待于进一步研究。三（总结）1、麦芽糖化的方法，视要求产物的甜度以及相应的理化性质而定，基本上分为三类。 (1)酸法。系以无机酸作催化剂，使淀粉水解，先生成中间产物糊精、麦芽糖等类低聚糖寡糖，最终生成葡萄糖等单糖。有批量作业的加压罐法和连续作业的管道法。 (2)酶法。系采用淀粉酶进行淀粉的水解。淀粉先经液化酶液化生成糊精等中间产物，再经糖化酶糖化生成麦芽糖以至葡萄糖。这样，由于全用酶水解故称全酶法。用液化酶和糖化酶，也称双酶法。 (3)酸酶结合法。采用酸法液化，酶法糖化，互相结合的方法。由淀粉糖化制取的产品为淀粉糖品。通常以水解程度或糖化程度，按葡萄糖当量计值(简称DE值)为淀粉糖品的特征指标。淀粉糖品有糖浆、糖浆粉、结晶糖等。除高纯度结晶糖品外，多为各以葡萄糖、麦芽糖或果糖等为主的混合糖品。可直接作甜味剂食用，或用作食品工业的配料，作医药工业中工业发酵的糖原基料。2、啤酒生产中麦芽糖化的方法一般分为煮出糖化法和浸出糖化法。煮出法是利用麦芽中酶的生化作用和